本文關鍵詞：胍丁胺-I1咪唑啉受體系統(tǒng)對阿片成癮的調節(jié)作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：阿片成癮,俗稱“吸毒”。不僅嚴重損害成癮者健康,而且引發(fā)一系列重大的社會、經濟和公共衛(wèi)生問題,嚴重阻礙社會的進步與發(fā)展,已成為世界性公害。因此,深入研究阿片成癮神經生物學機制,尋找理想的防復吸靶標,研發(fā)自身不成癮且具有防復吸作用的新藥具有重大生物學意義。課題組前期經過系統(tǒng)的研究發(fā)現(xiàn),胍丁胺本身不成癮,能預防和治療阿片軀體和精神依賴、緩解稽延癥狀、防復吸。在細胞水平和整體水平提示胍丁胺可能是通過激活I1咪唑啉受體(I1 imidazoline receptor,I1R)發(fā)揮上述抗阿片成癮的作用,因此胍丁胺-I1R可能構成了一個新的阿片功能調節(jié)系統(tǒng),為阿片成癮的治療提供了可能的新靶點和新機制。然而,胍丁胺本身并不是I1R的高特異性激動劑,同時還能與??-腎上腺素受體(?2-adrenergic receptor,?2-AR)結合,且對NMDA受體、電壓門控鈣通道具有阻斷作用,抑制一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)活性,并且以上五個作用靶點均與阿片成癮有密切關系。因此I1R在阿片成癮中的作用尚不能完全確定。所以,本課題組構建了IRAS(imidazoline receptor antisera selected protein)基因敲除小鼠,經證實I1R候選蛋白IRAS具有天然I1R生物學特征,為研究I1R調節(jié)阿片成癮的作用機制提供了良好的實驗模型和工具。本課題旨在采用IRAS(I1R)基因敲除小鼠系統(tǒng)研究I1R在阿片成癮中的調節(jié)作用以及胍丁胺在小鼠中的抗阿片成癮作用。本文的主要發(fā)現(xiàn)如下:(一)I1R在阿片精神依賴過程中的作用。(1)自身給藥模型是動物操作性條件反射模型,最大程度地模擬了人類從用藥到成癮的主觀能動性,反映了成癮的形成、維持、戒斷及復吸的動態(tài)過程,成為最具有測試效度的模型,為研究成癮的機制提供了重要的實驗手段。有利于動態(tài)的分析I1R在阿片成癮發(fā)生、發(fā)展過程中的作用。在固定比率1(fixed ratio 1,FR1)訓練程序下,在單劑量海洛因(0.025 mg/kg/次注射,i.v.)誘導的小鼠自身給藥實驗中發(fā)現(xiàn),I1R敲除小鼠自身用藥行為顯著高于野生型小鼠。在海洛因誘導自身給藥的量效曲線研究中,I1R敲除小鼠的海洛因量效曲線較野生型小鼠向上移動,提示I1R敲除后對海洛因的藥物效應的反應性是增強的(敏感性增加)。從上述海洛因量效曲線中可以觀察到,I1R敲除小鼠自身用藥行為(有效鼻觸次數(shù))和藥物攝入量顯著高于野生型小鼠。以上實驗結果證明I1R敲除能顯著上調海洛因的正性強化作用。首次發(fā)現(xiàn)I1R對海洛因成癮可能具有負性調節(jié)作用。(2)在基礎行為觀察實驗中I1R敲除后不影響小鼠的自發(fā)活動;單次急性給予嗎啡(5、10 mg/kg,s.c.)后,I1R敲除小鼠運動距離低于野生型;在嗎啡(5、10 mg/kg,s.c.)誘導的行為敏化實驗中,野生型小鼠可以顯著形成10mg/kg嗎啡誘導的行為敏化行為,而敲除型小鼠不能。這與海洛因誘發(fā)自身給藥實驗結果并不一致,具體原因有待進一步研究。綜上結果表明,海洛因誘導小鼠自身給藥模型中I1R敲除后增強了阿片成癮的敏感性,這與前期胍丁胺激活I1R后具有抗阿片成癮作用的結果相一致。(二)在獲得I1R完全敲除模式動物后,為了提高實驗結果的特異性,減少系統(tǒng)外因素對實驗結果的影響,我們又構建了神經元特異性I1R敲除小鼠模式動物。對首批獲得的神經元特異性敲除小鼠我們首先進行了基礎生理及與精神行為學相關的測試。(1)在蔗糖誘導自然獎賞實驗中,敲除小鼠與野生型小鼠對5%蔗糖誘導的自身用藥行為無顯著性差異,提示干擾神經元表達的I1R不影響自然獎賞行為。(2)在基礎痛閾的測定模型中,熱板實驗結果表明,I1R神經元特異性敲除小鼠的基礎痛閾減弱,提示神經元中I1R可能參與疼痛的調節(jié)。而該發(fā)現(xiàn)與前期研究中胍丁胺激活I1R發(fā)揮弱的鎮(zhèn)痛作用的結果相一致。(3)在阿片類物質嗎啡誘導的高活動性實驗中,單次給予嗎啡(4、8、16mg/kg,s.c.),均能顯著增高野生型和I1R神經元特異性敲除小鼠的活動度,且兩者無顯著性差異。以上結果提示,I1R神經元特異性敲除不影響生理性自然獎賞效應,同時神經元的I1R可能對疼痛的形成有一定的抑制作用,而胍丁胺激活I1R發(fā)揮弱的鎮(zhèn)痛作用,增強嗎啡鎮(zhèn)痛從而降低嗎啡軀體依賴的形成,所以神經元的I1R也可能參與阿片類物質成癮的調節(jié)。而神經元特異性敲除后對于中高劑量嗎啡的反應性無顯著性變化。(三)基于本研究的I1R敲除動物為小鼠,而前期研究中胍丁胺具有抗阿片精神依賴的作用均是在大鼠上獲得的,因此我們預先采用與敲除動物遺傳背景相近的C57BL/6J小鼠進行研究,觀察胍丁胺對嗎啡誘導的行為敏化所致的精神依賴的藥理學作用。(1)胍丁胺(1-80 mg/kg,s.c.)不影響小鼠自發(fā)活動和急性嗎啡(10 mg/kg,s.c.)誘導的小鼠高活動性;對嗎啡誘導行為敏化有減弱的趨勢,并無顯著性差異。(2)胍丁胺具有多個作用靶點,如I1R、?2-AR、NMDA受體等。其中對?2-AR的親和力僅次于I1R,另有研究表明I1R和?2-AR存在功能上的交互作用。因此我們聯(lián)合給予?2-AR選擇性拮抗劑育亨賓觀察胍丁胺對阿片成癮的調節(jié)作用。實驗結果如下:育亨賓(2 mg/kg,i.p.)單獨給藥不影響實驗動物自發(fā)活動和急性嗎啡致高活動性。當育亨賓(2 mg/kg,i.p.)與胍丁胺(80 mg/kg,s.c.)共同給藥時顯著降低小鼠急性嗎啡致高活動性和行為敏化的形成。提示育亨賓阻斷?2-AR的同時胍丁胺激活I1R具有拮抗嗎啡正性強化作用及精神依賴的作用。以上結果提示,胍丁胺在小鼠的阿片精神依賴模型中具有一定的抗阿片成癮效應,但不完全與大鼠的結果(胍丁胺抑制嗎啡誘發(fā)大鼠行為敏化的形成)相一致,并且其是否通過I1R發(fā)揮作用,需在敲除小鼠中進行深入研究。綜上所述,本研究發(fā)現(xiàn)特異性敲除I1R增強了阿片成癮的敏感性,與胍丁胺激活I1R抗成癮的作用相呼應;而神經元特異性敲除小鼠不影響自然獎賞效應,其基礎痛閾減弱與胍丁胺激活I1R發(fā)揮弱的鎮(zhèn)痛效應相一致;并且胍丁胺聯(lián)合育亨賓用藥在野生型小鼠中具有一定的抗阿片成癮的作用。提示胍丁胺-I1咪唑啉受體可能構成了一個新的阿片功能調節(jié)系統(tǒng),成為理想的抗阿片成癮的藥物靶標。
【關鍵詞】：I1咪唑啉受體敲除 胍丁胺 阿片成癮 嗎啡 海洛因
【學位授予單位】：中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R965
【目錄】：

• 縮略詞表5-6
• 摘要6-9
• Abstract9-12
• 前言12-15
• 第一章 I1咪唑啉受體敲除對阿片精神依賴的調節(jié)作用15-23
• 1 研究背景15
• 2 材料與方法15-17
• 2.1 實驗動物15
• 2.2 實驗藥品15
• 2.3 實驗設備15-16
• 2.4 實驗方法16-17
• 2.5 統(tǒng)計分析17
• 3 實驗結果17-21
• 3.1 I1 咪唑啉受體敲除對海洛因自身給藥行為和量效曲線的影響17-19
• 3.2 I1 咪唑啉受體敲除對小鼠基礎活動性和急性嗎啡處理致高活動性 的影響19-20
• 3.3 I1 咪唑啉受體敲除對嗎啡行為敏化的影響20-21
• 4 小結21
• 5 討論21-23
• 第二章 神經元特異性I1 咪唑啉受體敲除后對成癮相關行為學的研究23-29
• 1 研究背景23
• 2 材料與方法23-24
• 2.1 實驗動物23
• 2.2 實驗藥品23
• 2.3 實驗設備23
• 2.4 實驗方法23-24
• 2.5 統(tǒng)計分析24
• 3 實驗結果24-27
• 3.1 神經元特異性I1 咪唑啉受體敲除對蔗糖自身攝取行為的影響24-25
• 3.2 神經元特異性I1 咪唑啉受體敲除對小鼠基礎痛閾的影響25-26
• 3.3 神經元特異性I1 咪唑啉受體敲除對急性嗎啡致小鼠高活動性的影響26-27
• 4 小結27
• 5 討論27-29
• 第三章 胍丁胺對小鼠阿片精神依賴的影響29-38
• 1 研究背景29
• 2 材料與方法29-31
• 2.1 實驗動物29
• 2.2 實驗藥品29
• 2.3 實驗設備29
• 2.4 實驗方法29-31
• 2.5 統(tǒng)計分析31
• 3 實驗結果31-35
• 3.1 單獨給予胍丁胺或育亨賓以及二者聯(lián)合用藥對小鼠活動性的影響31-32
• 3.2 單獨給予胍丁胺或育亨賓以及二者聯(lián)合用藥對急性嗎啡致小鼠高活動性的影響32-33
• 3.3 胍丁胺單獨給藥或聯(lián)合育亨賓給藥對嗎啡誘導小鼠行為敏化的影響33-35
• 4 小結35
• 5 討論35-38
• 第四章 總結38-39
• 參考文獻39-43
• 綜述43-57
• 參考文獻53-57
• 發(fā)表文章57-70
• 個人簡歷70-71
• 致謝71

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 蘇瑞斌,李錦;咪唑啉I_2受體研究進展[J];中國藥理學與毒理學雜志;2004年01期

2 蘇瑞斌,李錦,秦伯益;左旋精氨酸及左旋精氨酸脫羧酶抗血清對嗎啡鎮(zhèn)痛及耐受的影響[J];中國藥物依賴性雜志;2003年02期

3 李錦,李昕,裴鋼,秦伯益;胍丁胺抗大鼠身體依賴作用與阿片受體的關系[J];中國藥物依賴性雜志;1999年03期

4 張敬新,徐云根,華維一,朱東亞;咪唑啉受體的研究[J];藥學進展;1997年03期

  本文關鍵詞：胍丁胺-I1咪唑啉受體系統(tǒng)對阿片成癮的調節(jié)作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：309918