基于3D細胞模型的楊梅花色苷納米脂質(zhì)體抗氧化機制的研究
發(fā)布時間:2021-01-08 12:47
花色苷在自然界廣泛分布,具有良好的抗氧化活性,屬于高效的天然抗氧化劑,但因其穩(wěn)定性較差、體內(nèi)代謝快等原因?qū)е缕淇寡趸阅懿荒芨咝У陌l(fā)揮,制約了花色苷資源的深度研發(fā)。納米脂質(zhì)體因其特殊的結(jié)構(gòu)以及特有的小尺寸、量子效應(yīng)等特點,使花色苷被包埋后進入機體后具有更好的穩(wěn)定性和更高的生物活性等優(yōu)點。體外自由基氧化損傷模型是基于細胞的細胞內(nèi)氧化水平研究,能更好地預(yù)測物質(zhì)在體內(nèi)的抗氧化活性。本實驗研究將花色苷制備成花色苷納米脂質(zhì)體的最優(yōu)工藝方案,評價其表征、穩(wěn)定性和體外抗氧化活性,探究其對Caco-2細胞存活率、活性、凋亡比例、內(nèi)部結(jié)構(gòu)等的影響。同時在3D和2D細胞培養(yǎng)模型中,通過SOD、GSH、MDA和T-AOC四個指標(biāo)對花色苷納米脂質(zhì)體的抗氧化活性進行了比較,對抗氧化機制進行了初步探究,具體結(jié)果如下:(1)花色苷納米脂質(zhì)體的最優(yōu)處方工藝為脂膽比2.87:1mg/mg、旋蒸溫度41.41℃、花色苷濃度0.17mg/m L;ㄉ占{米脂質(zhì)體的包封率為70.43%±1.95%,粒徑為165.78nm;多分散性指數(shù)PDI為0.143;透射電子電鏡下花色苷納米脂質(zhì)體呈囊泡狀結(jié)構(gòu),粒徑在200nm左右;(2)...
【文章來源】:中國計量大學(xué)浙江省
【文章頁數(shù)】:98 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
矢車菊素-3-葡萄糖苷結(jié)構(gòu)
[65],納米脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)圖如圖1.2所示[66],其可以天然存在也可以人工的合成。目前,制備納米脂質(zhì)體的壁材主要有膽固醇和磷脂,而其中的磷脂則包括天然磷脂、改性磷脂和合成類脂分子。脂質(zhì)體按其結(jié)構(gòu)可分為:1、單室脂質(zhì)體;2、多室脂質(zhì)體。脂質(zhì)體中的磷脂為雙親性,兼脂溶性和水溶性,能夠分別包封不同極性的物質(zhì)。由天然成分組成的脂質(zhì)體,擁有排列有序的生物膜磷脂雙分子層的結(jié)構(gòu),又可稱為人工制造的生物膜。脂質(zhì)體在水中分散時,親水部分會向水相靠近,疏水部分則偏向空氣,經(jīng)過攪動后含有磷脂雙分子層的球形脂質(zhì)體進而形成。磷脂主要是指卵磷脂、肌醇磷脂和腦磷脂等物質(zhì),是細胞膜結(jié)構(gòu)的主要成分之一,廣泛存在于動物細胞中的生物膜和原生質(zhì)內(nèi)。動物體內(nèi)的磷脂酰膽堿中含有飽和脂肪鏈,可以增強脂質(zhì)體膜的穩(wěn)定性和非滲透性。PC-大豆卵磷脂的功能:1、可以調(diào)節(jié)生物體細胞膜內(nèi)成分的比例:磷脂和膽固醇;2、可以增加生物體細胞膜磷脂中不飽和脂肪鏈比例
圖 1. 3 2D 細胞模型與 3D 細胞模型的形態(tài)差異[113]Fig 1.3 The morphological difference between 2D and 3D cell culture models.4.3 3D 細胞培養(yǎng)的應(yīng)用應(yīng)用 3D 細胞培養(yǎng)模型對細胞進行培養(yǎng),在天然細胞微環(huán)境物質(zhì)結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)的同時, 又更好的模擬機體細胞生長的環(huán)境,為細胞水平的研究提供了一種確、更真實、更可靠的方法。鑒于 3D 細胞培養(yǎng)模型的優(yōu)良性能,其已經(jīng)被于細胞研究以及多種細胞培養(yǎng)研究的各個方面。在腫瘤研究方面,三維培養(yǎng)被認做是理想的腫瘤學(xué)體外藥物測試模型,其能夠再現(xiàn)體內(nèi)實體瘤中的細信號傳導(dǎo)、細胞異質(zhì)性、細胞外微環(huán)境、生長動力學(xué)、內(nèi)部結(jié)構(gòu)特征和基因及耐藥性[114;115]。因此,該技術(shù)在腫瘤生物學(xué)及藥物活性篩選領(lǐng)域已成為研點[116]。由于 3D 細胞培養(yǎng)技術(shù)可以再現(xiàn)組織細胞的體內(nèi)生長情況,現(xiàn)在已經(jīng)在腫學(xué)、再生醫(yī)學(xué)、藥物篩選、病毒檢測等各個領(lǐng)域逐漸應(yīng)用并正在快速發(fā)展中[120]
【參考文獻】:
期刊論文
[1]培養(yǎng)板懸滴法三維細胞培養(yǎng)模型建立及細胞活力檢測方法比較[J]. 林鶴,王婉秋,焦佳媛,楊昊珅,任利翔,邢立國. 藥物評價研究. 2017(08)
[2]分子影像技術(shù)在腫瘤細胞凋亡的研究現(xiàn)狀及進展[J]. 劉巖,任佳忠,楊國仁. 腫瘤學(xué)雜志. 2017(06)
[3]山楂葉多酚的酶法提取及抗氧化活性研究[J]. 陳安徽,巫永華,劉恩岐,陳尚龍,邵穎. 食品科技. 2017(02)
[4]葉黃素納米脂質(zhì)體的制備工藝優(yōu)化及其氧化穩(wěn)定性[J]. 焦巖,李大婧,劉春泉,肖亞冬. 食品科學(xué). 2017(18)
[5]桑葚的提取及其自由基清除活性研究[J]. 劉茜,唐潔. 食品研究與開發(fā). 2017(03)
[6]配體介導(dǎo)的納米脂質(zhì)體作為腫瘤疫苗載體的可行性評價[J]. 李可欣,常莎莎,邸東華,修敬雅. 沈陽藥科大學(xué)學(xué)報. 2017(01)
[7]脂質(zhì)體在嬰兒體外胃腸道消化的膜結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性[J]. 馮炎雯,李娜,徐紀(jì)璇,鄔琰澤,韓劍眾,劉瑋琳. 食品科學(xué). 2017(13)
[8]抗腫瘤靶向脂質(zhì)體的研究進展[J]. 姜雅萌,朱妍妍,趙軼男,甄宇紅,張樹彪. 生命科學(xué). 2016(09)
[9]丁香精油納米脂質(zhì)體的制備及其在不同豆制品中的應(yīng)用[J]. 林琳,代婭婕,周昌倩,陶貴澤,黎雅婷,崔海英. 中國食品添加劑. 2016(09)
[10]正交設(shè)計與響應(yīng)面優(yōu)化玄參黃酮提取工藝研究[J]. 索南卓瑪,包顯云,包錦淵. 分子科學(xué)學(xué)報. 2016(01)
博士論文
[1]類胡蘿卜素脂質(zhì)體的研究[D]. 譚晨.江南大學(xué) 2015
[2]楊梅花色苷對胰島細胞氧化應(yīng)激損傷的保護作用及其機制探討[D]. 張波.浙江大學(xué) 2010
[3]紅景天苷納米脂質(zhì)體的研制[D]. 范明輝.江南大學(xué) 2008
碩士論文
[1]基于2D和3D Caco-2細胞培養(yǎng)研究納米氧化鋅的安全性[D]. 陶淼.中國計量大學(xué) 2016
[2]矢車菊素-3-葡萄糖苷對重金屬鎘、鉛致大鼠損傷的的保護機制研究[D]. 藺懷.沈陽大學(xué) 2016
[3]連翹酯苷對雞胸腺組織中炎癥因子及抗氧化的作用[D]. 吳悅.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[4]小分子化合物木脂素VB6通過激活JNK信號通路誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡和自噬的機制研究[D]. 胡會永.浙江大學(xué) 2012
本文編號:2964623
【文章來源】:中國計量大學(xué)浙江省
【文章頁數(shù)】:98 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
矢車菊素-3-葡萄糖苷結(jié)構(gòu)
[65],納米脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)圖如圖1.2所示[66],其可以天然存在也可以人工的合成。目前,制備納米脂質(zhì)體的壁材主要有膽固醇和磷脂,而其中的磷脂則包括天然磷脂、改性磷脂和合成類脂分子。脂質(zhì)體按其結(jié)構(gòu)可分為:1、單室脂質(zhì)體;2、多室脂質(zhì)體。脂質(zhì)體中的磷脂為雙親性,兼脂溶性和水溶性,能夠分別包封不同極性的物質(zhì)。由天然成分組成的脂質(zhì)體,擁有排列有序的生物膜磷脂雙分子層的結(jié)構(gòu),又可稱為人工制造的生物膜。脂質(zhì)體在水中分散時,親水部分會向水相靠近,疏水部分則偏向空氣,經(jīng)過攪動后含有磷脂雙分子層的球形脂質(zhì)體進而形成。磷脂主要是指卵磷脂、肌醇磷脂和腦磷脂等物質(zhì),是細胞膜結(jié)構(gòu)的主要成分之一,廣泛存在于動物細胞中的生物膜和原生質(zhì)內(nèi)。動物體內(nèi)的磷脂酰膽堿中含有飽和脂肪鏈,可以增強脂質(zhì)體膜的穩(wěn)定性和非滲透性。PC-大豆卵磷脂的功能:1、可以調(diào)節(jié)生物體細胞膜內(nèi)成分的比例:磷脂和膽固醇;2、可以增加生物體細胞膜磷脂中不飽和脂肪鏈比例
圖 1. 3 2D 細胞模型與 3D 細胞模型的形態(tài)差異[113]Fig 1.3 The morphological difference between 2D and 3D cell culture models.4.3 3D 細胞培養(yǎng)的應(yīng)用應(yīng)用 3D 細胞培養(yǎng)模型對細胞進行培養(yǎng),在天然細胞微環(huán)境物質(zhì)結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)的同時, 又更好的模擬機體細胞生長的環(huán)境,為細胞水平的研究提供了一種確、更真實、更可靠的方法。鑒于 3D 細胞培養(yǎng)模型的優(yōu)良性能,其已經(jīng)被于細胞研究以及多種細胞培養(yǎng)研究的各個方面。在腫瘤研究方面,三維培養(yǎng)被認做是理想的腫瘤學(xué)體外藥物測試模型,其能夠再現(xiàn)體內(nèi)實體瘤中的細信號傳導(dǎo)、細胞異質(zhì)性、細胞外微環(huán)境、生長動力學(xué)、內(nèi)部結(jié)構(gòu)特征和基因及耐藥性[114;115]。因此,該技術(shù)在腫瘤生物學(xué)及藥物活性篩選領(lǐng)域已成為研點[116]。由于 3D 細胞培養(yǎng)技術(shù)可以再現(xiàn)組織細胞的體內(nèi)生長情況,現(xiàn)在已經(jīng)在腫學(xué)、再生醫(yī)學(xué)、藥物篩選、病毒檢測等各個領(lǐng)域逐漸應(yīng)用并正在快速發(fā)展中[120]
【參考文獻】:
期刊論文
[1]培養(yǎng)板懸滴法三維細胞培養(yǎng)模型建立及細胞活力檢測方法比較[J]. 林鶴,王婉秋,焦佳媛,楊昊珅,任利翔,邢立國. 藥物評價研究. 2017(08)
[2]分子影像技術(shù)在腫瘤細胞凋亡的研究現(xiàn)狀及進展[J]. 劉巖,任佳忠,楊國仁. 腫瘤學(xué)雜志. 2017(06)
[3]山楂葉多酚的酶法提取及抗氧化活性研究[J]. 陳安徽,巫永華,劉恩岐,陳尚龍,邵穎. 食品科技. 2017(02)
[4]葉黃素納米脂質(zhì)體的制備工藝優(yōu)化及其氧化穩(wěn)定性[J]. 焦巖,李大婧,劉春泉,肖亞冬. 食品科學(xué). 2017(18)
[5]桑葚的提取及其自由基清除活性研究[J]. 劉茜,唐潔. 食品研究與開發(fā). 2017(03)
[6]配體介導(dǎo)的納米脂質(zhì)體作為腫瘤疫苗載體的可行性評價[J]. 李可欣,常莎莎,邸東華,修敬雅. 沈陽藥科大學(xué)學(xué)報. 2017(01)
[7]脂質(zhì)體在嬰兒體外胃腸道消化的膜結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性[J]. 馮炎雯,李娜,徐紀(jì)璇,鄔琰澤,韓劍眾,劉瑋琳. 食品科學(xué). 2017(13)
[8]抗腫瘤靶向脂質(zhì)體的研究進展[J]. 姜雅萌,朱妍妍,趙軼男,甄宇紅,張樹彪. 生命科學(xué). 2016(09)
[9]丁香精油納米脂質(zhì)體的制備及其在不同豆制品中的應(yīng)用[J]. 林琳,代婭婕,周昌倩,陶貴澤,黎雅婷,崔海英. 中國食品添加劑. 2016(09)
[10]正交設(shè)計與響應(yīng)面優(yōu)化玄參黃酮提取工藝研究[J]. 索南卓瑪,包顯云,包錦淵. 分子科學(xué)學(xué)報. 2016(01)
博士論文
[1]類胡蘿卜素脂質(zhì)體的研究[D]. 譚晨.江南大學(xué) 2015
[2]楊梅花色苷對胰島細胞氧化應(yīng)激損傷的保護作用及其機制探討[D]. 張波.浙江大學(xué) 2010
[3]紅景天苷納米脂質(zhì)體的研制[D]. 范明輝.江南大學(xué) 2008
碩士論文
[1]基于2D和3D Caco-2細胞培養(yǎng)研究納米氧化鋅的安全性[D]. 陶淼.中國計量大學(xué) 2016
[2]矢車菊素-3-葡萄糖苷對重金屬鎘、鉛致大鼠損傷的的保護機制研究[D]. 藺懷.沈陽大學(xué) 2016
[3]連翹酯苷對雞胸腺組織中炎癥因子及抗氧化的作用[D]. 吳悅.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[4]小分子化合物木脂素VB6通過激活JNK信號通路誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡和自噬的機制研究[D]. 胡會永.浙江大學(xué) 2012
本文編號:2964623
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