本文關(guān)鍵詞：殼聚糖席夫堿合成及其對灰霉菌抑菌機制，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:研究化學合成的四種殼聚糖席夫堿(CTS-Sal、CTS-2Hy、CTS-Val、CTS-O-val)對灰霉菌的抑菌活性,及其中抑菌活性最佳者的抑菌機制。方法:采用紅外光譜(FT-IR)和紫外分光光譜(UV)對席夫堿結(jié)構(gòu)進行表征;通過微量液體稀釋法和真菌菌絲生長速率法測定了CTS(原料)和四種席夫堿對灰霉菌的最小抑菌濃度(MIC)和半數(shù)有效濃度(EC50);席夫堿(抑菌活性最佳者)處理灰霉菌后,通過對菌絲顯微結(jié)構(gòu)觀察以及菌體細胞細胞壁、細胞膜、細胞核三個層次的生理生化指標的測定來研究其抑菌機制;數(shù)據(jù)采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件包進行數(shù)據(jù)整理、錄入、分析;計量資料均使用(SX±)來表示;多組資料間比較采用重復測量的兩因素方差分析(MANOVA of repeated measuring)及簡單效應分析(simple effect analysis).結(jié)果:1.紅外圖譜和紫外圖譜分析表明四種醛已經(jīng)結(jié)合于CTS載體;2.與CTS(對照組)相比,四種席夫堿對灰霉菌均有明顯抑制作用,其中CTS-2Hy的MIC值和EC50值均最小,分別為1184.49和724.44μg/m L;3.經(jīng)過CTS-2Hy處理后的灰霉菌在透射電鏡下觀察,發(fā)現(xiàn)菌體細胞的細胞壁模糊不清甚至嚴重缺失,細胞壁完整性被破壞、細胞膜亦發(fā)生斷裂,細胞核無明顯變化,而CTS處理組細胞結(jié)構(gòu)完整;相同的處理時間組CTS-2Hy組的幾丁質(zhì)含量均低于CTS組(P0.01);4.12h、16h、20h時CTS-2Hy組電導率均高于CTS組(P0.01);20h時CTS-2Hy可溶性蛋白滲透量高于CTS組(P0.01);8h、12h、16h、20h時CTS-2Hy可溶性還原糖含量均高于CTS組(P0.01);5.4h、8h、16h、64h時CTS-2Hy組β-1,3葡聚糖合成酶活性低于CTS組(P0.01);16h和32h時CTS-2Hy組幾丁質(zhì)酶活性高于CTS組(P0.01);6.對應相同時間組,CTS-2Hy組過氧化氫酶活性均低于CTS組(P0.01);7.CTS-2Hy和CTS不同濃度分別作用于灰霉菌后,基因組DNA含量的差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論:1.四種醛與殼聚糖均發(fā)生了席夫堿反應;四種席夫堿中,CTS-2Hy對灰霉菌的抑菌效果最佳;2.CTS-2Hy作用在細胞膜上,改變了細胞膜的通透性,CTS-2Hy通過破壞細胞膜來影響膜上和胞內(nèi)相關(guān)酶的活性;一是幾丁質(zhì)酶活性增強、β-1,3葡聚糖合成酶活性降低,致使幾丁質(zhì)加速分解、葡聚糖的合成受阻,從而導致細胞壁完整性被破壞;過氧化氫酶活性下降,導致解毒作用降低,影響細胞的代謝活動,導致灰霉菌被抑制或死亡;3.CTS-2Hy對細胞核有無影響有待進一步研究。
【關(guān)鍵詞】：殼聚糖席夫堿 灰霉菌 抑制作用 作用機制
【學位授予單位】：貴陽醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R914.5;R96
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-10
• 略縮詞表10-11
• 0 引言11-14
• 1. 材料與方法14-26
• 1.1 材料14-17
• 1.2 方法17-26
• 2. 結(jié)果26-46
• 2.1 殼聚糖席夫堿光譜分析26-28
• 2.2 灰霉菌抑菌活性實驗28-32
• 2.3 CTS-2Hy處理對灰霉菌菌絲的形態(tài)影響32-34
• 2.4 CTS-2Hy對灰霉菌菌絲體內(nèi)含物滲漏的影響34-38
• 2.5 CTS-2Hy對灰霉菌幾丁質(zhì)含量的影響38-42
• 2.6 CTS-2Hy對灰霉菌菌體相關(guān)酶活性的影響42-44
• 2.7 CTS-2Hy對灰霉菌DNA的影響44-46
• 3. 討論46-50
• 3.1 機制研究實驗方法探討46-47
• 3.2 殼聚糖席夫堿的抑菌活性實驗探討47
• 3.3 顯微結(jié)構(gòu)觀察47
• 3.4 生理生化指標實驗47-50
• 4. 結(jié)論50-51
• 參考文獻51-55
• 綜述55-66
• 參考文獻62-66
• 作者簡歷66-67
• 致謝67-68
• 學位論文數(shù)據(jù)集68

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本文編號：283019