本文關鍵詞：睪丸酶和支持細胞功能蛋白在順鉑致大鼠睪丸細胞損傷中的作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的通過觀察順鉑對大鼠睪丸組織病理學、精子密度和活率、睪丸酶、氧化應激和支持細胞功能相關蛋白表達水平等變化,探討順鉑對睪丸細胞的毒作用及其可能機制。方法選擇健康的成年雄性Wistar大鼠,隨機分為4組,即生理鹽水對照組、順鉑(CP)1.0、2.5和5.0 mg/kg組,進行腹腔注射染毒,每天1次,連續(xù)3天。于第4天處死大鼠,摘取大鼠附睪和睪丸組織進行檢測。(1)常規(guī)制備睪丸組織病理切片,PAS染色后鏡下觀察病理學變化。(2)采用精子質(zhì)量分析儀檢測附睪中精子密度和活率。(3)制備睪丸組織勻漿,用生化法分別檢測睪丸組織中乳酸脫氫酶(LDH)、琥珀酸脫氫酶(SDH)、蘋果酸脫氫酶(MDH)、酸性磷酸酶(ACP)和堿性磷酸酶(AKP)的活力,以及氧化應激指標總抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的水平。(4)用實時熒光定量PCR法測定血紅素加氧酶-1(HO-1)和金屬硫蛋白-1(MT-1)的mRNA表達水平。(5)用western blot技術分析睪丸組織中支持細胞功能評價相關蛋白如轉(zhuǎn)鐵蛋白、波形蛋白、雄激素結(jié)合蛋白(ABP)和抑制素B的蛋白表達水平。結(jié)果(1)與對照組比較,順鉑2.5 mg/kg和5.0 mg/kg組大鼠體重顯著降低,順鉑5.0 mg/kg組大鼠睪丸絕對濕重降低,順鉑2.5 mg/kg和5.0 mg/kg組大鼠睪丸臟器系數(shù)升高(P0.05)。PAS染色結(jié)果顯示,順鉑各劑量組大鼠睪丸生精小管出現(xiàn)精原細胞數(shù)目減少,生精上皮層細胞排列紊亂,生精小管官腔內(nèi)可見脫落的生精細胞,間質(zhì)血管壁增厚等不同程度的病理學改變。(2)精子質(zhì)量分析顯示：與對照組比較,順鉑5.0 mg/kg組精子密度下降,c級精子數(shù)量減少而d級精子數(shù)量增多(P0.05)。(3)睪丸酶檢測結(jié)果顯示：與對照組比較,順鉑5.0 mg/kg組睪丸組織中LDH、ACP和AKP活力均明顯升高(P0.05),順鉑各劑量組睪丸組織中SDH活力均顯著降低而MDH活力僅在順鉑5.0 mg/kg組顯著下降(P0.01)。(4)氧化應激效應指標檢測發(fā)現(xiàn),順鉑5.0 mg/kg組睪丸組織中SOD活力降低而MDA含量升高,順鉑各劑量組T-AOC水平均降低(P0.05)。順鉑各染毒組GSH-Px活力與對照組比較差異均無統(tǒng)計學意義(P0.05)。(5)與對照組相比,順鉑各劑量組睪丸細胞中MT-1mRNA表達水平均下調(diào),而HO-1 mRNA表達僅在順鉑5.0 mg/kg組上調(diào)(P0.05)。(6)western blot結(jié)果顯示,與對照組比較,順鉑2.5 mg/kg組和5.0mg/kg組睪丸組織中轉(zhuǎn)鐵蛋白和雄激素結(jié)合蛋白表達下降(P0.05),順鉑各劑量組波形蛋白和抑制素B表達水平均降低(P0.01)。結(jié)論順鉑導致大鼠睪丸組織損傷與其所致睪丸酶活力改變、氧化應激效應增強和支持細胞功能相關蛋白表達水平下調(diào)有關。
【關鍵詞】：順鉑 睪丸酶 氧化應激 轉(zhuǎn)鐵蛋白 雄激素結(jié)合蛋白
【學位授予單位】：蘭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R96
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-9
• 一 前言9-16
• 1.1 順鉑的一般生物學特征9
• 1.2 順鉑的臨床毒副作用9-12
• 1.3 順鉑對實驗動物的一般毒作用及其機制12-14
• 1.4 順鉑對實驗動物的生殖毒性及其機制14-15
• 1.5 研究目的和意義15-16
• 二 實驗方法16-25
• 2.1 材料16-17
• 2.1.1 動物16
• 2.1.2 試劑16
• 2.1.3 儀器16-17
• 2.2 方法17-24
• 2.2.1 劑量選擇及分組17
• 2.2.2 大鼠睪丸和附睪組織分離、摘取17-18
• 2.2.3 大鼠睪丸組織PAS染色18
• 2.2.4 大鼠精子活率和密度測定18
• 2.2.5 制備大鼠睪丸組織勻漿及生化指標測定18-22
• 2.2.6 大鼠睪丸組織HO-1和MT-1的mRNA水平測定22-23
• 2.2.7 大鼠睪丸組織中相關蛋白檢測23-24
• 2.3 統(tǒng)計處理24-25
• 三 結(jié)果25-30
• 3.1 大鼠睪丸組織病理學變化25
• 3.2 大鼠體重和睪丸質(zhì)量分析25-26
• 3.3 大鼠附睪精子活率和密度變化26-27
• 3.4 順鉑對大鼠睪丸酶的影響27-28
• 3.5 順鉑對大鼠睪丸組織氧化應激的影響28
• 3.6 順鉑對大鼠睪丸組織相關酶mRNA表達的影響28-29
• 3.7 順鉑對大鼠睪丸支持細胞功能蛋白的影響29-30
• 四 討論30-36
• 五 結(jié)論及不足之處36-37
• 5.1 結(jié)論36
• 5.2 本研究的不足之處36-37
• 參考文獻37-42
• 附錄42-44
• 在學期間的研究成果44-45
• 致謝45

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 李英;順鉑誘發(fā)小白鼠精子畸形的研究[J];癌變.畸變.突變;1991年02期

  本文關鍵詞：睪丸酶和支持細胞功能蛋白在順鉑致大鼠睪丸細胞損傷中的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：268536