本文關(guān)鍵詞：氯化鋰腹腔注射聯(lián)合嗅鞘細(xì)胞玻璃體腔內(nèi)移植對損傷視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的影響

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【摘要】：目的： 研究不同劑量氯化鋰(LiCl)腹腔注射,嗅鞘細(xì)胞(OEC)玻璃體腔內(nèi)移植以及兩者聯(lián)合作用對成年SD大鼠視神經(jīng)(ON)橫斷后視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(RGCs)存活的影響，并分析視網(wǎng)膜內(nèi)腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)的表達(dá)情況,對其機(jī)制進(jìn)行初步研究。 方法： 1雌性SD大鼠120只,隨機(jī)分為腹腔注射生理鹽水(saline)對照組和腹腔注射低劑量(30mg/kg/d)、中劑量(60mg/kg/d)、高劑量(85mg/kg/d)LiCl實驗組。術(shù)前1D按分組給予腹腔注射相應(yīng)藥物�？魞�(nèi)據(jù)視神經(jīng)根部1.5mm處橫斷視神經(jīng)且殘端留置熒光金及術(shù)后每天腹腔注射saline或不同劑量的LiCl溶液,直至術(shù)后2D、7D和14D處死動物。平鋪視網(wǎng)膜后取樣計數(shù)熒光金(FG)逆行標(biāo)記的存活RGCs,并由此計算出每一視網(wǎng)膜內(nèi)RGCs的平均密度。并在7D和14D時在蛋白和基因水平研究視網(wǎng)膜內(nèi)BNDF的表達(dá)情況。 2眶內(nèi)橫斷60只成年雌性SD大鼠左側(cè)視神經(jīng)且殘端留置熒光金后,隨機(jī)分為玻璃體腔內(nèi)移植DF12組,玻璃體腔內(nèi)移植OEC組,其中36只SD雌性大鼠在術(shù)后7D,14D,21D處死,平鋪視網(wǎng)膜后取樣計數(shù)熒光金逆行標(biāo)記的存活RGCs,并由此計算出每一視網(wǎng)膜內(nèi)RGCs的平均密度。剩余24只SD大鼠在7D和14D兩個時間點,處死動物取視網(wǎng)膜,在蛋白和基因水平研究視網(wǎng)膜內(nèi)BNDF的表達(dá)情況。 3選取48只SD雌性大鼠,隨機(jī)分為腹腔注射中劑量LiCl聯(lián)合玻璃體腔移植OEC組,腹腔注射saline聯(lián)合玻璃體腔內(nèi)移植12組。術(shù)前一天按分組腹腔給藥,眶內(nèi)橫斷據(jù)視神經(jīng)根部1.5mm處橫斷視神經(jīng)并在殘端留置熒光金,取7D和14D兩個時間點,平鋪視網(wǎng)膜后取樣計數(shù)熒光金逆行標(biāo)記的存活RGCs,并由此計算出每一視網(wǎng)膜內(nèi)RGCs的平均密度,并在蛋白和基因水平研究視網(wǎng)膜內(nèi)BNDF的表達(dá)情況。 結(jié)果： 1視神經(jīng)橫斷后2D后,各劑量LiCl組RGCs平均密度與對照組相比無顯著性差異(P0.05)。當(dāng)存活時間增至7D時,各劑量LiCl組RGCs密度均明顯高于對照組(P0.01),且中劑量LiCl組RGCs密度增高最為顯著。且各劑量組BDNF在蛋白和基因水平的表達(dá)明顯高于對照組,其中中劑量組BDNF的表達(dá)明顯高于低劑量組。術(shù)后14D后,低劑量與中劑量組RGCs密度仍顯著高于對照組(P0.01),但高劑量組RGCs密度與對照組相比無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。BDNF在蛋白和基因水平的表達(dá)低劑量組和中劑量組與對照組之間有顯著性差異(P0.01),且中劑量組BDNF的表達(dá)明顯高于低劑量組。 2玻璃體腔內(nèi)移植OEC在術(shù)后7D和14D時RGCs密度均明顯高于玻璃體腔內(nèi)移植DF12組(P0.01),且玻璃體腔內(nèi)移植OEC的視網(wǎng)膜內(nèi)BDNF在蛋白和基因水平的表達(dá)與玻璃體腔內(nèi)移植DF12組相比有顯著性差異(P0.01)。但在術(shù)后21D時,玻璃體腔內(nèi)移植OEC組RGCs密度與玻璃體腔內(nèi)移植DF12組無顯著性差異(P0.05)。 3在視神經(jīng)橫斷7D和14D后,腹腔注射中劑量LiCl聯(lián)合玻璃體腔內(nèi)移植OEC組RGCs的密度與腹腔注射sali ne聯(lián)合玻璃體腔內(nèi)移植DF12組相比有顯著性差異(P0.01),且腹腔注射中劑量LiCl聯(lián)合玻璃體腔內(nèi)移植OEC組視網(wǎng)膜內(nèi)BDNF在蛋白和基因水平的表達(dá)與腹腔注射salinc聯(lián)合玻璃體腔內(nèi)移植DF12組相比有顯著性差異(P0.01)。 結(jié)論： 1腹腔內(nèi)注射LiCl可顯著促進(jìn)成年SD大鼠視神經(jīng)切斷后RGCs的存活,這種神經(jīng)保護(hù)作用為劑量依賴性,在中劑量(60mg/kg/d)時作用最顯著。且這種作用是可以通過視網(wǎng)膜內(nèi)BDNF表達(dá)的提高來發(fā)揮作用的。 2玻璃體腔內(nèi)移植OEC與玻璃體腔內(nèi)移植DF12相比可以促進(jìn)RGCs的存活,與在視神經(jīng)殘端注入OEC相比最長可以維持14D,延長了OEC存活的時間。且這種作用是通過提高視網(wǎng)膜內(nèi)BDNF的表達(dá)產(chǎn)生的。 3玻璃體腔內(nèi)移植OEC聯(lián)合腹腔注射中劑量LiCl組可以在7D時顯著提高BDNF的表達(dá),進(jìn)一步促進(jìn)了RGCs的存活。
【關(guān)鍵詞】：視神經(jīng)切斷 視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞 嗅鞘細(xì)胞 鋰劑 神經(jīng)保護(hù) 大鼠
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R774.1
【目錄】：

• 中文摘要5-8
• Abstract8-12
• 前言12-14
• 第一部分 實驗一 不同劑量氯化鋰腹腔注射對大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的影響14-28
• 1 材料14-16
• 2 方法16-21
• 3 結(jié)果21-24
• 4 結(jié)論24-25
• 5 討論25-28
• 第二部分 實驗二 嗅鞘細(xì)胞玻璃體腔內(nèi)移植對大鼠節(jié)細(xì)胞的保護(hù)作用的研究28-37
• 1 材料28-29
• 2 方法29-31
• 3 結(jié)果31-35
• 4 結(jié)論35
• 5 討論35-37
• 第三部分 實驗三 氯化鋰腹腔注射聯(lián)合嗅鞘細(xì)胞玻璃體腔內(nèi)移植對大鼠節(jié)細(xì)胞的影響37-44
• 1 材料37
• 2 方法37-38
• 3 結(jié)果38-42
• 4 結(jié)論42-43
• 5 討論43-44
• 參考文獻(xiàn)44-48
• 綜述48-56
• 參考文獻(xiàn)53-56
• 縮略詞表56-57
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況57-58
• 致謝58-59
• 作者簡介59

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：998099