本文關(guān)鍵詞：聲帶細(xì)胞外基質(zhì)干預(yù)和人羊膜上皮細(xì)胞移植后聲帶瘢痕修復(fù)再生的研究

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【摘要】：目的應(yīng)用聲帶細(xì)胞外基質(zhì)干預(yù)(膠原酶和透明質(zhì)酸注射)和人羊膜上皮細(xì)胞(human amniotic epithelial cells, hAEC)在聲帶瘢痕內(nèi)的移植,觀測(cè)聲帶固有層及主要細(xì)胞外基質(zhì)變化的特點(diǎn),探索其對(duì)聲帶瘢痕修復(fù)再生的作用。方法對(duì)20只新西蘭兔(40側(cè)聲帶)中的38側(cè)聲帶施行全身麻醉直接喉鏡下聲帶銳性損傷,形成聲帶瘢痕。分離培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)用hAEC,慢病毒綠色熒光蛋白基因轉(zhuǎn)染作標(biāo)記。將hAEC移植入10側(cè)瘢痕聲帶,即hAEC移植組；聲帶細(xì)胞外基質(zhì)干預(yù)(注射膠原酶和透明質(zhì)酸)10側(cè)瘢痕聲帶,即基質(zhì)干預(yù)組；hAEC移植同時(shí)細(xì)胞外基質(zhì)干預(yù)10側(cè)瘢痕聲帶,即復(fù)合組；瘢痕未處理8側(cè)聲帶,即瘢痕組。2側(cè)正常聲帶作為對(duì)照組。術(shù)后1個(gè)月、2個(gè)月時(shí)示蹤觀察hAEC在聲帶內(nèi)的生長、分布及活性情況；術(shù)后1、2、3、6個(gè)月采用HE染色、Masson染色及免疫組化染色觀察聲帶形態(tài)學(xué)變化及聲帶固有層膠原、纖維連接蛋白的分布及含量變化。結(jié)果hAEC原代培養(yǎng)4 d后呈鋪路石樣生長,移植入瘢痕聲帶后可在固有層內(nèi)持續(xù)存活2個(gè)月；術(shù)后1、2個(gè)月免疫熒光顯示角蛋白(上皮細(xì)胞標(biāo)志性蛋白)熒光陽性；術(shù)后6個(gè)月光鏡下觀察并半定量分析示：瘢痕組較正常組膠原量明顯增加、排列紊亂,hAEC移植組、基質(zhì)干預(yù)組及復(fù)合組膠原量和排列較瘢痕組改善,hAEC移植組、基質(zhì)干預(yù)組二者相似,復(fù)合組優(yōu)于前兩組,但均未及正常；免疫組化染色示瘢痕組較正常組纖維連接蛋白平均光密度明顯增加,hAEC移植組、基質(zhì)干預(yù)組及復(fù)合組纖維連接蛋白平均光密度介于瘢痕組和正常對(duì)照組之間,hAEC移植組與基質(zhì)干預(yù)組相差不明顯,復(fù)合組優(yōu)于前兩組。結(jié)論聲帶細(xì)胞外基質(zhì)干預(yù)和hAEC注射移植復(fù)合作用于兔瘢痕聲帶后,具有更好地促進(jìn)聲帶細(xì)胞外基質(zhì)分泌、合理分布及部分有序化排列的功能,促進(jìn)聲帶瘢痕的修復(fù)再生。
【關(guān)鍵詞】：聲帶 瘢痕 羊膜 上皮細(xì)胞 細(xì)胞移植 再生 細(xì)胞外基質(zhì) 兔
【學(xué)位授予單位】：復(fù)旦大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R767.4
【目錄】：

• 中英文縮寫對(duì)照4-5
• 中文摘要5-6
• 英文摘要6-8
• 前言8-10
• 第一部分：人羊膜上皮細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及生物學(xué)標(biāo)記10-15
• 1.材料10
• 2.方法10-11
• 3.結(jié)果11-12
• 4.討論12-14
• 5.結(jié)論14-15
• 第二部分：聲帶瘢痕模型的建立及實(shí)驗(yàn)處理15-19
• 1.材料15-16
• 2.方法16-17
• 3.結(jié)果17
• 4.討論17-18
• 5.結(jié)論18-19
• 第三部分：人羊膜上皮細(xì)胞在瘢痕聲帶內(nèi)的存活19-24
• 1.材料19
• 2.方法19
• 3.結(jié)果19-22
• 4.討論22-23
• 5.結(jié)論23-24
• 第四部分：聲帶形態(tài)學(xué)觀察和組織學(xué)觀測(cè)24-35
• 1.材料24
• 2.方法24-27
• 3.結(jié)果27-32
• 4.討論32-34
• 5.結(jié)論34-35
• 全文總結(jié)35-44
• 參考文獻(xiàn)44-40
• 綜述40-46
• 參考文獻(xiàn)44-46
• 致謝46-47
• 論文發(fā)表47
• 學(xué)術(shù)活動(dòng)47
• 獲獎(jiǎng)情況47-48

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 黃冬雁,楊偉炎,王榮光;透明質(zhì)酸在聲帶中的作用[J];國外醫(yī)學(xué).耳鼻咽喉科學(xué)分冊(cè);2005年05期

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本文編號(hào)：995174