本文關(guān)鍵詞：PCDH8基因?qū)Ρ茄拾┘毎闏NE-1作用機制的研究

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【摘要】：目的探討PCDH8基因表達對鼻咽癌細胞體外增殖、周期、侵襲、藥物敏感性等生物學(xué)行為的影響及其機制研究。 方法采用脂質(zhì)體介導(dǎo)將質(zhì)粒pcDNA3.1-PCDH8（實驗組）與質(zhì)粒pcDNA3.1（對照組）轉(zhuǎn)染至鼻咽癌細胞株CNE-1，應(yīng)用RT-PCR、Westernblot技術(shù)檢測轉(zhuǎn)染后CNE-1細胞中PCDH8mRNA及蛋白的表達情況；通過CCK-8細胞生長曲線試驗，，流式細胞周期試驗，Transwell侵襲試驗、CCK-8細胞藥物敏感性試驗及裸鼠皮下種植瘤模型，進一步對轉(zhuǎn)染PCDH8基因的細胞株CNE-1的增殖能力、生長周期、細胞侵襲能力、對化療藥物的敏感性及其體內(nèi)成瘤能力進行分析，并與轉(zhuǎn)染對照質(zhì)粒的細胞株進行對比。通過Real time PCR檢測實驗組與對照組MMP-9、MMP-2、VEGF基因mRNA水平表達變化，Western blot檢測實驗組與對照組CDK-4、P21、P27、JNK基因蛋白水平表達變化，了解PCDH8基因在鼻咽癌細胞內(nèi)的作用機制。 結(jié)果①RT-PCR、Western blot檢測表明轉(zhuǎn)染質(zhì)粒pcDNA3.1-PCDH8的實驗組細胞株中PCDH8mRNA及蛋白成功表達并明顯高于轉(zhuǎn)染質(zhì)粒pcDNA3.1的對照組細胞株（P0.05）。②CCK-8細胞生長曲線試驗表明試驗組細胞株的生長速度明顯低于對照組（P0.05）。③流式細胞周期試驗檢測實驗組細胞株G0/G1期較對照組增加，S期細胞較對照組減少（P0.05）；④Tramswell侵襲試驗表明實驗組細胞株侵襲能力明顯低于對照組（P0.05）。⑤CCK-8細胞藥物敏感性試驗表明PCDH8基因表達能顯著提高鼻咽癌細胞株CNE-1對順鉑化療藥物的敏感性（P0.05）；⑥裸鼠鼻咽癌皮下移植瘤模型中表達PCDH8基因的實驗組CNE-1細胞的成瘤能力低于對照組CNE-1細胞（P0.05）。⑦Realtime PCR試驗證明在mRNA水平上MMP-9在實驗組的表達量低于對照組（P0.05），而MMP-2、VEGF在實驗組的表達量與對照組無明顯差別(P0.05)；⑧Western bolt試驗中CDK-4、P27、JNK基因在實驗組中的表達高于實驗組的表達（P0.05）。P21在實驗組中的表達高于對照區(qū)但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。結(jié)論脂質(zhì)體成功介導(dǎo)pcDNA3.1-PCDH8與pcDNA3.1質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入鼻咽癌CNE-1細胞株并建立穩(wěn)定細胞株。PCDH8基因的表達能降低CNE-1細胞的增殖、侵襲能力，延緩細胞分裂周期，提高對順鉑化療藥物的敏感性，降低鼻咽癌細胞體內(nèi)成瘤能力。PCDH8基因可能通過MMP-9、CDK-4、P27、JNK基因及相關(guān)通路，作用于鼻咽癌細胞，在抑癌方面起到一定作用。
【關(guān)鍵詞】：PCDH8 鼻咽癌 CNE-1
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R739.63
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照5-6
• 中文摘要6-8
• ABSTRACT8-10
• 前言10-12
• 第一部分 PCDH8 基因轉(zhuǎn)染鼻咽癌細胞株 CNE-1 及其對細胞生物學(xué)行為的影響12-30
• 1 實驗材料與方法12-22
• 2 結(jié)果22-28
• 3 討論28-30
• 第二部分 PCDH8 基因?qū)θ吮茄拾┘毎?CNE-1 相關(guān)蛋白的影響30-41
• 1 材料與方法30-35
• 2 結(jié)果35-38
• 3 討論38-41
• 全文總結(jié)41-43
• 參考文獻43-47
• 附插圖47-51
• 文獻綜述51-58
• 參考文獻55-58
• 致謝58-59
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文59-60

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

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本文編號：979035