SAA基因高表達(dá)對(duì)人鼻咽癌CNE2細(xì)胞生長增殖的影響
發(fā)布時(shí)間:2017-10-04 00:34
本文關(guān)鍵詞:SAA基因高表達(dá)對(duì)人鼻咽癌CNE2細(xì)胞生長增殖的影響
更多相關(guān)文章: pcDNA3.1(+)-SAA CNE2細(xì)胞 轉(zhuǎn)染 增殖
【摘要】:目的 運(yùn)用基因重組技術(shù),構(gòu)建pcD NA3.1(+)-SAA真核表達(dá)載體并將此重組載體轉(zhuǎn)染人鼻咽癌CNE2細(xì)胞,檢測(cè)該重組載體在人鼻咽癌CNE2細(xì)胞中的表達(dá),,探討SAA基因高表達(dá)對(duì)人鼻咽癌CNE2細(xì)胞生長增殖的影響,為研究SAA基因在鼻咽癌發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制提供新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法 以人鼻咽癌CNE2細(xì)胞的cDNA為模板,通過PCR擴(kuò)增得到SAA蛋白編碼區(qū)CDS片段,經(jīng)酶切純化后與pcD N A3.1(+)連接;并對(duì)重組載體進(jìn)行測(cè)序及Blast比對(duì)分析;隨后將重組載體用脂質(zhì)體LipofectamineTM2000轉(zhuǎn)染人鼻咽癌CNE2細(xì)胞,采用Western bloting檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后人鼻咽癌CNE2細(xì)胞中SAA蛋白的表達(dá),并用MTT法檢測(cè)SAA蛋白對(duì)人鼻咽癌CNE2細(xì)胞增殖的影響。 結(jié)果: 1、pcD N A3.1(+)-SAA經(jīng)酶切、測(cè)序鑒定及Blast比對(duì)分析,真核表達(dá)載體構(gòu)建成功; 2、Western blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染pcD N A3.1(+)-SAA真核表達(dá)載體后人鼻咽癌CNE2細(xì)胞中SAA蛋白表達(dá)水平明顯高與未轉(zhuǎn)染組及轉(zhuǎn)染空載體pcD N A3.1(+)組,統(tǒng)計(jì)分析差異具有顯著性意義(P<0.05); 3、MTT實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),從轉(zhuǎn)染24小時(shí)起,轉(zhuǎn)染pcD N A3.1(+)-SAA真核表達(dá)載體的CNE2細(xì)胞生長速度明顯快于未轉(zhuǎn)染組及轉(zhuǎn)染空載體pcD N A3.1(+)組,統(tǒng)計(jì)分析差異具有顯著性(P<0.05)。 結(jié)論 1、pcD N A3.1(+)-SAA真核表達(dá)載體成功在鼻咽癌CNE2細(xì)胞中表達(dá); 2、淀粉樣蛋白A(SAA)能促進(jìn)鼻咽癌CNE2細(xì)胞生長增殖。
【關(guān)鍵詞】:pcDNA3.1(+)-SAA CNE2細(xì)胞 轉(zhuǎn)染 增殖
【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R739.63
【目錄】:
- 參與的課題3-5
- 中文摘要5-7
- Abstract7-9
- 前言9-11
- 技術(shù)路線11-12
- 材料與方法12-26
- 實(shí)驗(yàn)結(jié)果26-32
- 討論32-35
- 結(jié)論35-36
- 參考文獻(xiàn)36-41
- 主要縮略詞及英文索引41-42
- 綜述42-50
- 參考文獻(xiàn)47-50
- 在讀期間發(fā)表的論文50-51
- 致謝51
【參考文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條
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本文編號(hào):967664
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