本文關(guān)鍵詞：醒鼻凝膠劑對(duì)變應(yīng)性鼻炎TSLP依賴型肥大細(xì)胞干預(yù)機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： 中藥醒鼻凝膠劑 AR TSLP MCs 機(jī)制 實(shí)驗(yàn)研究

【摘要】：目的：運(yùn)用現(xiàn)代藥理學(xué)和分子生物學(xué)方法,探討中藥醒鼻凝膠劑對(duì)AR模型豚鼠的治療作用及可能的作用機(jī)制,并探究其是否通過抑制鼻黏膜TSLP依賴型MCs的活化起作用,為其進(jìn)一步開發(fā)利用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù),也為AR發(fā)病機(jī)制與中醫(yī)藥防治思路提供新的途徑。 方法：(1)豚鼠以O(shè)VA0.5mg、氫氧化鋁30mg加lml生理鹽水腹腔注射致敏,鼻腔滴注2%OVA激發(fā)復(fù)制AR模型。60只豚鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、醒鼻凝膠劑低劑量組(6.88mg/kg)、中劑量組(13.76mg/kg)、高劑量組(27.52mg/kg)及陽(yáng)性藥布地奈德組(20μg/kg),每組10只。比較6組AR模型豚鼠的行為學(xué)表現(xiàn)。 (2)豚鼠最后一次激發(fā)后1h腹腔注射戊巴比妥(50mg/kg)麻醉,取血清、鼻腔灌洗液和鼻粘膜,Lavens SE法定量測(cè)定肥大細(xì)胞活化標(biāo)志物類胰蛋白酶含量,ELISA法檢測(cè)血清中抗體IgE,血清和鼻腔灌洗液中炎性因子IL-5、IL-6、TNF-α、GM-CSF、CCL1、 CXCL8的含量,并對(duì)豚鼠病變鼻黏膜進(jìn)行病理組織學(xué)檢查。 (3)通過免疫組織化學(xué)法檢測(cè)鼻黏膜中TSLP、TSLP受體(TSLPR)和NF-κB p65蛋白的表達(dá)；通過RT-PCR檢測(cè)鼻黏膜組織中TSLP、TSLPR、NF-κB mRNA的表達(dá)。 結(jié)果：(1)AR病模行為學(xué)指標(biāo)評(píng)分：模型組激發(fā)時(shí)出現(xiàn)了噴嚏、撓鼻和流涕的典型變應(yīng)性鼻炎癥隊(duì),隨激發(fā)次數(shù)的增加,癥狀加劇,與正常對(duì)照組比較,豚鼠的行為學(xué)積分有顯著差異(P0.01)。而給藥組AR癥狀有明顯的緩解。第五次激發(fā)時(shí)AR行為學(xué)評(píng)分：正常對(duì)照組：0.50±0.85；模型組：5.00±1.33；低劑量組：2.70±0.95；中劑量組：2.70±1.49；高劑量組：2.00±0.82；；布地奈德組：1.60±1.07。各給藥組可顯著降低豚鼠的AR癥狀(P0.01)。 (2)鼻黏膜HE染色觀察：模型組豚鼠鼻黏膜有不同程度腫脹增厚,血管擴(kuò)張充血.,杯狀細(xì)胞增多,伴有大量嗜酸性粒細(xì)胞等炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。而各用藥組有不同程度的改善。EOS計(jì)數(shù)：正常對(duì)照組：1.90±0.74；模型組：12.00±1.76；低劑量組：8.70±1.34；中劑量組：3.10±0.88；高劑量組：2.30±0.95；布地奈德組：2.10±0.31。各給藥組可顯著減少AR豚鼠鼻粘膜的嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)(P0.01)。 (3)與模型組比較,醒鼻凝膠劑中、高劑量組可明顯降低血清中類胰蛋白酶、IgE、IL-5、IL-6、TNF-α、GM-CSF含量(P0.01或P0.05),高劑量組可顯著降低血清中CXCL-8、CCL-1含量(P0.01或P0.05)。醒鼻凝膠劑中、高劑量組可明顯降低鼻腔灌洗液中IL-6、GM-CSF含量(P0.01或P0.05),高劑量組可顯著降低鼻腔灌洗液中IL-5、YNF-α含量(P0.01或P0.05)。灌洗液中CXCL-8、CCL-1含量雖有所降低,但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 (4)鼻黏膜免疫組化、PCR結(jié)果顯示,醒鼻凝膠劑中、高劑量組可顯著降低鼻黏膜中TSLP、TSLPR、NF-κB p65蛋白的表達(dá)(P0.01)。醒鼻凝膠劑低、中、高劑量組可顯著降低鼻黏膜中TSLP、NF-κB mRNA的表達(dá)(P0.01)。 結(jié)論：通過現(xiàn)代藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)證明醒鼻凝膠劑能緩解豚鼠的AR癥狀,改善鼻黏膜的病理學(xué)改變,提示醒鼻凝膠劑對(duì)AR有一定的治療作用,其作用可能與穩(wěn)定肥大細(xì)胞,調(diào)控NF-B信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),抑制TSLP、TSLPR及炎性因子(IL-5、IL-6等)的釋放有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：中藥醒鼻凝膠劑 AR TSLP MCs 機(jī)制 實(shí)驗(yàn)研究
【學(xué)位授予單位】：福建中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R285.5;R765.21
【目錄】：

• 中文摘要7-9
• Abstract9-11
• 縮略詞表11-13
• 前言13-17
• 第一章 醒鼻凝膠劑對(duì)AR模型豚鼠的治療作用17-26
• 1 實(shí)驗(yàn)材料17-18
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物17
• 1.2 實(shí)驗(yàn)藥品17
• 1.3 實(shí)驗(yàn)試劑17
• 1.4 實(shí)驗(yàn)儀器17-18
• 2 實(shí)驗(yàn)方法18-21
• 2.1 變應(yīng)性鼻炎豚鼠模型的建立18
• 2.2 給藥18
• 2.3 AR病模行為學(xué)指標(biāo)評(píng)分18-19
• 2.4 樣本采集與處理19
• 2.5 指標(biāo)檢測(cè)19-21
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果21-24
• 3.1 AR病模行為學(xué)指標(biāo)評(píng)分21-22
• 3.2 血清IgE檢測(cè)22
• 3.3 肥大細(xì)胞活化標(biāo)志物類胰蛋白酶檢測(cè)22-23
• 3.4 中藥醒鼻凝膠劑對(duì)AR豚鼠鼻粘膜組織形態(tài)學(xué)的影響23-24
• 4 討論與小結(jié)24-26
• 4.1 討論24-25
• 4.2 小結(jié)25-26
• 第二章 醒鼻凝膠劑對(duì)TSLP相關(guān)炎性因子的抑制作用26-36
• 1 實(shí)驗(yàn)材料26-27
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物26
• 1.2 實(shí)驗(yàn)藥品26
• 1.3 實(shí)驗(yàn)試劑26-27
• 1.4 實(shí)驗(yàn)儀器27
• 2 實(shí)驗(yàn)方法27-29
• 2.1 變應(yīng)性鼻炎豚鼠模型的建立27
• 2.2 給藥27
• 2.3 樣本采集與處理27
• 2.4 指標(biāo)檢測(cè)27-29
• 2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法測(cè)定29
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果29-35
• 3.1 血清及鼻腔灌洗液中IL-5檢測(cè)29-30
• 3.2 血清及鼻腔灌洗液中IL-6檢測(cè)30-31
• 3.3 血清及鼻腔灌洗液中TNF-α檢測(cè)31-32
• 3.4 血清及鼻腔灌洗液中GM-CSF檢測(cè)32-33
• 3.5 血清及鼻腔灌洗液中CCL-1檢測(cè)33-34
• 3.6 血清及鼻腔灌洗液中CXCL-8檢測(cè)34-35
• 4 討論與小結(jié)35-36
• 4.1 討論35
• 4.2 小結(jié)35-36
• 第三章 醒鼻凝膠劑對(duì)NF-KB、TSLP及其受體蛋白與基因的影響36-46
• 1 實(shí)驗(yàn)材料36-38
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物36
• 1.2 實(shí)驗(yàn)藥品36
• 1.3 實(shí)驗(yàn)試劑36-37
• 1.4 實(shí)驗(yàn)儀器37
• 1.5 主要試劑配制37-38
• 2 實(shí)驗(yàn)方法38-42
• 2.1 變應(yīng)性鼻炎豚鼠模型的建立38
• 2.2 給藥38
• 2.3 樣本采集與處理38
• 2.4 指標(biāo)檢測(cè)38-42
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果42-44
• 3.1 鼻黏膜NF-κB p65蛋白的檢測(cè)42
• 3.2 鼻枯膜NF-κB mRNA表達(dá)的檢測(cè)42-43
• 3.3 對(duì)AR豚鼠鼻黏膜TSLP蛋白表達(dá)的影響43
• 3.4 對(duì)鼻粘膜組織TSLP mRNA表達(dá)的檢測(cè)43-44
• 3.5 對(duì)AR豚鼠鼻黏膜TSLPR蛋白表達(dá)的影響44
• 4 討論與小結(jié)44-46
• 4.1 討論44-45
• 4.2 小結(jié)45-46
• 全文總結(jié)46-47
• 參考文獻(xiàn)47-49
• 附圖49-55
• 致謝55-56
• 文獻(xiàn)綜述56-64
• 參考文獻(xiàn)61-64
• 作者簡(jiǎn)介64

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：912356