本文關鍵詞：骨形態(tài)發(fā)生蛋白-6對氧化應激狀態(tài)下的視網(wǎng)膜色素上皮細胞基質(zhì)金屬蛋白酶及其抑制劑的影響

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【摘要】：目的探討骨形態(tài)發(fā)生蛋白-6(bone morphogenetic protein-6,BMP-6)保護視網(wǎng)膜色素上皮細胞免受氧化應激損傷的可能作用機制。方法將ARPE-19細胞分別置正常對照、75μmol·L-1 H2O2(H2O2組)、75μmol·L-1 H2O2+150 ng·mL-1 BMP-6(H2O2+BMP-6組)及150 ng·mL-1BMP-6(BMP-6組)環(huán)境中培養(yǎng)0 h、3 h、6 h、9 h及12 h后,用MTT法觀察細胞的活性,確定試劑的干預時間。選定作用時間后采用Western blot及RT-qPCR測定基質(zhì)金屬蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)以及基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑(the inhibitor of matrix metalloproteinase-1,TIMP-1)蛋白及mRNA水平的變化。結(jié)果作用3 h及6 h后,H2O2組、BMP-6組及H2O2+BMP-6組細胞活性(3 h為0.524 8±0.024 0、1.012 5±0.017 7、0.591 7±0.099 8;6 h為0.459 3±0.030 9、1.077 5±0.021 4、0.582 0±0.013 9)差異均有統(tǒng)計學意義(均為P0.05)。MMP-2、MMP-9、TIMP-1的mRNA及蛋白水平的檢測結(jié)果是一致的,H2O2組、BMP-6組及H2O2+BMP-6組兩兩比較差異均有統(tǒng)計學意義(均為P0.05),各組的不同時間差異也均有統(tǒng)計學意義(均為P0.05)。H2O2組隨著作用時間的延長,MMP-2、MMP-9在蛋白及mRNA水平的含量表達明顯增加,而TIMP-1在蛋白及mRNA水平的表達均是降低的。BMP-6組MMP-2、MMP-9在蛋白及mRNA水平的表達明顯降低,而TIMP-1在蛋白及mRNA水平的表達均是升高的。BMP-6+H2O2組MMP-2、MMP-9的水平均較單純H2O2組的水平低,而TIMP-1的水平是升高的。結(jié)論 H2O2是通過打破基質(zhì)金屬蛋白及其抑制劑的平衡起到氧化損傷作用。而BMP-6可以保護視網(wǎng)膜色素上皮細胞免受氧化應激的損傷,其可能機制是通過基質(zhì)金屬蛋白酶系統(tǒng)起作用的。
【作者單位】： 西安交通大學醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院眼科;西安市第一醫(yī)院眼科;西安交通大學醫(yī)學院神經(jīng)生物研究所;
【關鍵詞】： 骨形態(tài)發(fā)生蛋白- 氧化應激 年齡相關性黃斑變性 基質(zhì)金屬蛋白酶 基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑
【基金】：陜西省科技攻關項目基金資助(編號:2012K16-11-01)~~
【分類號】：R774
【正文快照】： 大量研究結(jié)果提示,氧化應激可能是年齡相關性黃斑變性(age-related mucular degeneration,AMD)發(fā)生發(fā)展的一個重要的促進因素[1]。尸檢發(fā)現(xiàn),早期AMD患者視網(wǎng)膜色素上皮細胞中骨形態(tài)發(fā)生蛋白-6(bone morphogenetic protein-6,BMP-6)的水平明顯下降[2]。還有研究表明基質(zhì)金屬蛋

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