目的 利用畢氏酵母血管生成素1重組質(zhì)粒(pEGFP/Ang-1)轉(zhuǎn)染大鼠BMSCs,將轉(zhuǎn)染后的BMSCs行視網(wǎng)膜下移植,從而確認血管緊張素1(Ang-1)轉(zhuǎn)染BMSCs對糖尿病大鼠視網(wǎng)膜的保護作用。 方法 選取雄性SD大鼠4⁶只,無菌條件下取出股骨和脛骨,剪去骨骺端,用培養(yǎng)基反復沖洗骨髓腔分離BMSCs,并結(jié)合反復貼壁法使其進一步純化鑒定。利用畢氏酵母血管生成素1重組質(zhì)粒(pEGFP/Ang-1)轉(zhuǎn)染大鼠BMSCs,將轉(zhuǎn)染后的Ang-1/BMSC視網(wǎng)膜下移植。另選SD大鼠96只,隨機分為正常大鼠組(CON)、空白對照糖尿病組(DM1)、糖尿病大鼠+視網(wǎng)膜下移植BMSCs組(DM2)、糖尿病大鼠+視網(wǎng)膜下移植Ang-1/BMSCs組(ANG)。尾靜脈注射鏈脲佐菌素(STZ)建立糖尿病模型,成模后DM2組視網(wǎng)膜下移植BMSCs,ANG組視網(wǎng)膜下移植Ang-1/BMSCs,分別4w、8w、12w處死動物。用伊凡思藍方法檢測視網(wǎng)膜的滲透量;用免疫組化觀察移植細胞在視網(wǎng)膜中的分布融合情況,Western blot方法檢測各組大鼠視網(wǎng)膜Ang-1的表達情況。 結(jié)果 DM1、D...

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖13兩組細胞的Ang-1蛋白Westernb注：1、轉(zhuǎn)染組2、未轉(zhuǎn)染

1512圖13兩組細胞的Ang-1蛋白Westernblot表達注：1、轉(zhuǎn)染組2、未轉(zhuǎn)染二、大鼠一般情況、血糖和體重變化隨著時間的延長，糖尿病大鼠皮毛稀疏發(fā)黃，伴有不同程度的精神萎靡，飲水量和尿量明顯增加，但體重增長緩慢，甚至消瘦。視網(wǎng)膜移植Ang-1/BMSCs、BMS....

圖14各組大鼠體重比較

二、大鼠一般情況、血糖和體重變化隨著時間的延長，糖尿病大鼠皮毛稀疏發(fā)黃，伴有不同程度的精神萎靡，飲水量和尿量明顯增加，但體重增長緩慢，甚至消瘦。視網(wǎng)膜移植Ang-1/BMSCs、BMSCs后體重無明顯改善（表4，圖14），血糖無變化（表5，圖15）。表4各組大鼠體重....

圖15各組大鼠血糖比較

表5各組大鼠血糖的變化（x±s，mmol/L,n=8）組別4周組8周組12周組CON3.71±0.53.7±0.283.76±0.63DM123.7±3.77*24.80±5.19*25.7±2.36*DM223.3±5.19*△24.9±4....

圖16EB在甲酰胺溶液中的標準曲線

圖16EB在甲酰胺溶液中的標準曲線與CON組相比DM1、DM2大鼠視網(wǎng)膜滲透量明顯增加，差異有統(tǒng)計學義（P<0.01）。隨著糖尿病時間的延長DM1、DM2組EB滲透量明顯增加，48周、12周分別增加了1.7倍、1.9倍、2.2倍。而ANG較DM1組和DM2EB滲透降低了17.....

本文編號：4000749