變應(yīng)性鼻炎患者外周血iNOSmRNA-iNOS及NO定量檢測在皮質(zhì)類固醇激素治療評價中的作用
發(fā)布時間:2017-09-02 12:17
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【摘要】:[目的] 本實驗通過檢測變應(yīng)性鼻炎(allergic rhinitis,AR)患者局部應(yīng)用皮質(zhì)類固醇激素治療前后外周血NO、iNOS及EOS的水平變化,并結(jié)合病人鼻黏膜及臨床癥狀改善情況,尋找臨床效果評價的方便、快速的試驗指標(biāo),為變應(yīng)性鼻炎的治療和病情評估提供新的手段。 [方法] 1、實驗對象與選擇:變應(yīng)性鼻炎病人組選擇就診我院門診的變應(yīng)性鼻炎患者59例,與組對象均符合中華醫(yī)學(xué)會耳鼻喉科分會推薦的變應(yīng)性鼻炎的診斷標(biāo)準(zhǔn),且皮膚過敏原點刺試驗均為陽性表現(xiàn),取11例初診及第四周復(fù)診病人鼻黏膜。健康對照組為健康體檢人員50例。10例正常鼻黏膜取自尸檢。 2、實驗對象癥狀體征評價:確定隨訪時間為四周,每四周對復(fù)診AR病人進行癥狀、體征評價,隨訪24周。 3、實驗方法:抽取初診、復(fù)診AR病人及健康體檢人員的外周血,采用實時熒光定量多聚酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)方法檢測外周血白細胞iNOS mRNA水平變化,采用ELISA法檢測血漿iNOS的水平變化,采用硝酸還原酶比色法測定血漿NO含量,并對外周血嗜酸粒細胞EOS進行常規(guī)計數(shù)。 [結(jié)果] 1.變應(yīng)性鼻炎患者癥狀體征的變化:至第24周隨訪結(jié)束,8例退出實驗。第4周末復(fù)診,余51例中取得顯著改善的病人34例,有效改善病人16例,無效者1例,顯效率67%,有效率31%,總有效率達98%,第8周末復(fù)診,無效病人聯(lián)合應(yīng)用抗組胺藥物,癥狀體征得到滿意改善;34例顯效病人有2例病人復(fù)發(fā),16例有效病人中有3例病人復(fù)發(fā),對于復(fù)發(fā)的5例病人在接下來的治療中給予皮質(zhì)類固醇激素、抗組胺類藥物聯(lián)合治療,其余病人癥狀體征較前有顯著改善,評分較前降低,治療同前;第12末復(fù)診,32例顯效病人和13例有效病人中均有2人癥狀復(fù)現(xiàn),補加抗組胺類藥物聯(lián)合治療,其余病人單用皮質(zhì)類固醇藥物,藥量減半,用藥至第16周末復(fù)診;第16周末41例有效病人在所用藥物減半后癥狀控制良好,無復(fù)發(fā)病例出現(xiàn),其中聯(lián)合用藥病人10例,4例病人對藥物療效滿意,6人不滿意治療效果,癥狀體征評分未見明顯改善;第20周末復(fù)診病人中未見有新復(fù)發(fā)病例出現(xiàn);聯(lián)合用藥治療效果滿意者遵醫(yī)囑繼續(xù)用藥,不滿意者放棄治療;第24周末復(fù)診病人未見有新復(fù)發(fā)病例出現(xiàn)。 2、鼻黏膜HE染色結(jié)果:正常對照組黏膜上皮可見纖毛,間質(zhì)可見少量腺體及淋巴細胞,偶見EOS(圖5)。AR組黏膜上皮損傷、纖毛減少,表面有炎性滲出物;間質(zhì)水腫、腺體增多可見大量EOS(圖6)。AR病人治療后黏膜上皮完整;間質(zhì)水腫減輕、腺體減少;EOS明顯減少(圖7)。 3、硝酸還原酶比色法檢測變應(yīng)性鼻炎及健康體檢人員外周血NO水平:AR患者外周血NO水平為68.89±9.76(μmol/L),健康體檢人員外周血NO水平43.47±9.47(μmol/L); AR治療組為55.62±9.89(μmol/L),比治療前明顯降低。各組相比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.01)。 4、ELISA法檢測變應(yīng)性鼻炎病人組治療四周前、后與健康體檢人員外周血相關(guān)因子含量,并對外周血EOS數(shù)目常規(guī)計數(shù): 4.1外周血EOS計數(shù) 變應(yīng)性鼻炎患者治療前外周血EOS數(shù)目均明顯高于健康對照組,差異顯著具有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.01),治療后外周血EOS數(shù)目顯著下降,顯著高于健康對照組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義,(p<0.05),EOS數(shù)目治療后與治療前計數(shù)做統(tǒng)計學(xué)分析,無統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05) 4.2外周血iNOS 變應(yīng)性鼻炎患者治療前外周血iNOS水平顯著高于健康對照組,差異顯著,具有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.01);經(jīng)局部皮質(zhì)類激素治療后外周血iNOS水平仍明顯高于健康對照組,有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05),變應(yīng)性鼻炎患者治療后外周血iNOS水平較前顯著下降(p<0.01),差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。 5、實時熒光定量PCR法檢測變應(yīng)性鼻炎病人治療四周前、后及健康對照組入組人員外周血白細胞iNOSmRNA: 變應(yīng)性鼻炎患者治療4周前、后外周血白細胞iNOS mRNA表達量明顯高于健康對照組(p0.05),變應(yīng)性鼻炎患者治療前外周血白細胞iNOS mRNA表達量明顯高于治療后(p0.05),有統(tǒng)計學(xué)意義。 [結(jié)論] 1.AR病人外周血iNOS-mRNA表達增加與外周血iNOS水平增加及NO水平增高與臨床癥狀相關(guān),提示該通路具有重要作用。 2.鼻用皮質(zhì)類固醇激素可降低AR患者外周血NO、iNOS水平,降低EOS數(shù)目,顯著改善臨床癥狀;隨訪提示規(guī)律用藥,復(fù)發(fā)率低。 3.檢測變應(yīng)性鼻炎患者外周血NO、iNOS、iNOS mRNA及EOS可協(xié)助評價變應(yīng)性鼻炎治療效果,其中實時熒光定量PCR是可靠的、方便快速的實驗室檢測方法。
【關(guān)鍵詞】:變應(yīng)性鼻炎(allergic rhinitis AR) 嗜酸粒細胞(eosinophil EOS) 一氧化氮(nitric oxide NO) 誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase iNOS) 誘導(dǎo)型一氧化氮合酶-信使核糖核酸(inducible nitric oxide synthase-messenger ribonucleic acid iNOS-mRNA)
【學(xué)位授予單位】:山東大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R765.21
【目錄】:
- 中文摘要6-9
- ABSTRACT9-12
- 符號說明12-13
- 前言13-15
- 材料與方法15-25
- 實驗結(jié)果25-27
- 討論27-36
- 結(jié)論36-37
- 附表37-38
- 附圖38-41
- 參考文獻41-47
- 致謝47-48
- 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表及待發(fā)表學(xué)術(shù)論文48-49
- 附表49
【參考文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條
1 李祖望;許昱;陶澤璋;陳婉儀;鄧愛玲;孔勇剛;;標(biāo)準(zhǔn)化塵螨變應(yīng)原疫苗舌下免疫治療變應(yīng)性鼻炎的臨床研究[J];中國耳鼻咽喉頭頸外科;2010年01期
,本文編號:778492
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