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Mincle在大鼠角膜上皮抗煙曲霉菌感染固有免疫階段作用的研究

發(fā)布時間:2017-08-20 12:19

  本文關鍵詞:Mincle在大鼠角膜上皮抗煙曲霉菌感染固有免疫階段作用的研究


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【摘要】:目的:觀察巨噬細胞誘導型C型凝集素因子(monocyte-inducible C-type lectin, mincle)在大鼠角膜上皮抗煙曲霉菌固有免疫階段的表達情況,探討其在真菌性角膜炎固有免疫中的作用。 方法:清潔級Wistar大鼠72只,隨機分為煙曲霉菌感染組,陰性對照組,空白對照組,取右眼為實驗眼,在刮除大鼠角膜上皮后涂以煙曲霉菌菌絲并覆蓋自制的角膜接觸鏡,建立大鼠角膜真菌感染模型,分別于4、8、16、24小時觀察大鼠角膜變化情況。采用HE染色觀察角膜組織學變化,分別采用Real-time RT-PCR技術免疫組織化學及免疫熒光方法檢測角膜上皮mincle受體及炎性因子mRNA及蛋白表達情況。 結果:造模后4小時角膜輕度水腫,隨著時間的延長,角膜病變逐漸加重,24小時形成潰瘍。Mincle mRNA在正常對照組、損傷各組均有表達,在曲霉菌感染組mincle的表達量明顯上升,在16h達到高峰,各時間點比較差距具有統計學意義(p0.05)。TNF-a、IL-1β、IL-6、IL-10、CCL2、CCL3、CXCL1、CXCL2在正常組及曲霉菌組均有表達,差距具有統計學意義(p0.05)。mincle與TNF-a、IL-1β、il-10、ccl3的表達含量有顯著相關性(p0.05)。 結論:1、組織病理學觀察和真菌培養(yǎng)證實大鼠煙曲霉菌性角膜炎模型建立成功。2. mincle受體在正常大鼠角膜上皮中存在,煙曲霉菌刺激后可引起表達上調。3.TNF-a、IL-1β、IL-6、IL-10、CCL2、CCL3、CXCL1、CXCL2在大鼠角膜上皮中存在,且煙曲霉菌刺激后表達上調。4.mincle與TNF-a、IL-1β、IL-10、CCL3司存在明顯相關,mincle可能作為模式識別受體參與大鼠真菌性角膜炎的固有免疫階段。
【關鍵詞】:mincle 固有免疫 角膜上皮 曲霉菌
【學位授予單位】:青島大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2013
【分類號】:R772.21
【目錄】:
  • 摘要2-3
  • Abstract3-6
  • 引言6-7
  • 第1章 材料與方法7-14
  • 1.1 實驗材料7-8
  • 1.1.1 實驗對象7
  • 1.1.2 實驗主要儀器與設備7
  • 1.1.3 實驗主要耗材及試劑7-8
  • 1.2 實驗方法8-13
  • 1.2.1 實驗動物分組8-9
  • 1.2.2 真菌懸液制備9
  • 1.2.3 角膜接觸鏡的制備9
  • 1.2.4 動物模型的制備9
  • 1.2.5 組織病理學觀察9-10
  • 1.2.6 免疫組織化學實驗方法10
  • 1.2.7 免疫熒光化學實驗方法10-11
  • 1.2.8 Real-time RT-PCR實驗方法11-13
  • 1.3 統計學方法13-14
  • 第2章 結果14-17
  • 2.1 動物模型形態(tài)學觀察結果14
  • 2.2 HE染色結果14
  • 2.3 免疫組織化學結果14
  • 2.4 免疫熒光化學觀察結果14
  • 2.5 Real-time RT-PCR結果14-17
  • 第3章 討論17-20
  • 結論20-21
  • 參考文獻21-23
  • 綜述23-34
  • 參考文獻30-34
  • 攻讀學位期間的研究成果34-35
  • 附錄35-41
  • 致謝41-42

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前4條

1 杜兆東;梁濤;趙桂秋;劉建偉;張麗娜;張振華;;真菌性角膜炎病原菌的流行病學調查[J];青島大學醫(yī)學院學報;2007年02期

2 ;Effects of COX-2 inhibitor NS-398 on IL-10 expression in rat fungal keratitis[J];International Journal of Ophthalmology(English Edition);2011年02期

3 ;The roles of surfactant protein D during Aspergillus fumigatus infection in human corneal epithelial cells[J];International Journal of Ophthalmology(English Edition);2012年01期

4 ;Nucleotide oligomerization domain 2 contributes to the innate immune response in THCE cells stimulated by Aspergillus fumigatus conidia[J];International Journal of Ophthalmology(English Edition);2012年04期



本文編號:706589

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