Mincle在大鼠角膜上皮抗煙曲霉菌感染固有免疫階段作用的研究
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【摘要】:目的:觀察巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)型C型凝集素因子(monocyte-inducible C-type lectin, mincle)在大鼠角膜上皮抗煙曲霉菌固有免疫階段的表達(dá)情況,探討其在真菌性角膜炎固有免疫中的作用。 方法:清潔級(jí)Wistar大鼠72只,隨機(jī)分為煙曲霉菌感染組,陰性對(duì)照組,空白對(duì)照組,取右眼為實(shí)驗(yàn)眼,在刮除大鼠角膜上皮后涂以煙曲霉菌菌絲并覆蓋自制的角膜接觸鏡,建立大鼠角膜真菌感染模型,分別于4、8、16、24小時(shí)觀察大鼠角膜變化情況。采用HE染色觀察角膜組織學(xué)變化,分別采用Real-time RT-PCR技術(shù)免疫組織化學(xué)及免疫熒光方法檢測(cè)角膜上皮mincle受體及炎性因子mRNA及蛋白表達(dá)情況。 結(jié)果:造模后4小時(shí)角膜輕度水腫,隨著時(shí)間的延長,角膜病變逐漸加重,24小時(shí)形成潰瘍。Mincle mRNA在正常對(duì)照組、損傷各組均有表達(dá),在曲霉菌感染組mincle的表達(dá)量明顯上升,在16h達(dá)到高峰,各時(shí)間點(diǎn)比較差距具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。TNF-a、IL-1β、IL-6、IL-10、CCL2、CCL3、CXCL1、CXCL2在正常組及曲霉菌組均有表達(dá),差距具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。mincle與TNF-a、IL-1β、il-10、ccl3的表達(dá)含量有顯著相關(guān)性(p0.05)。 結(jié)論:1、組織病理學(xué)觀察和真菌培養(yǎng)證實(shí)大鼠煙曲霉菌性角膜炎模型建立成功。2. mincle受體在正常大鼠角膜上皮中存在,煙曲霉菌刺激后可引起表達(dá)上調(diào)。3.TNF-a、IL-1β、IL-6、IL-10、CCL2、CCL3、CXCL1、CXCL2在大鼠角膜上皮中存在,且煙曲霉菌刺激后表達(dá)上調(diào)。4.mincle與TNF-a、IL-1β、IL-10、CCL3司存在明顯相關(guān),mincle可能作為模式識(shí)別受體參與大鼠真菌性角膜炎的固有免疫階段。
【關(guān)鍵詞】:mincle 固有免疫 角膜上皮 曲霉菌
【學(xué)位授予單位】:青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R772.21
【目錄】:
- 摘要2-3
- Abstract3-6
- 引言6-7
- 第1章 材料與方法7-14
- 1.1 實(shí)驗(yàn)材料7-8
- 1.1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象7
- 1.1.2 實(shí)驗(yàn)主要儀器與設(shè)備7
- 1.1.3 實(shí)驗(yàn)主要耗材及試劑7-8
- 1.2 實(shí)驗(yàn)方法8-13
- 1.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組8-9
- 1.2.2 真菌懸液制備9
- 1.2.3 角膜接觸鏡的制備9
- 1.2.4 動(dòng)物模型的制備9
- 1.2.5 組織病理學(xué)觀察9-10
- 1.2.6 免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)方法10
- 1.2.7 免疫熒光化學(xué)實(shí)驗(yàn)方法10-11
- 1.2.8 Real-time RT-PCR實(shí)驗(yàn)方法11-13
- 1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法13-14
- 第2章 結(jié)果14-17
- 2.1 動(dòng)物模型形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果14
- 2.2 HE染色結(jié)果14
- 2.3 免疫組織化學(xué)結(jié)果14
- 2.4 免疫熒光化學(xué)觀察結(jié)果14
- 2.5 Real-time RT-PCR結(jié)果14-17
- 第3章 討論17-20
- 結(jié)論20-21
- 參考文獻(xiàn)21-23
- 綜述23-34
- 參考文獻(xiàn)30-34
- 攻讀學(xué)位期間的研究成果34-35
- 附錄35-41
- 致謝41-42
【參考文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條
1 杜兆東;梁濤;趙桂秋;劉建偉;張麗娜;張振華;;真菌性角膜炎病原菌的流行病學(xué)調(diào)查[J];青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2007年02期
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,本文編號(hào):706589
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