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CIK細(xì)胞在鼻咽癌治療的研究及其TLR的表達(dá)情況

發(fā)布時(shí)間:2017-07-29 23:15

  本文關(guān)鍵詞:CIK細(xì)胞在鼻咽癌治療的研究及其TLR的表達(dá)情況


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【摘要】:目的:本實(shí)驗(yàn)觀察采用CIK細(xì)胞治療鼻咽癌的近期臨床療效,并研究CIK細(xì)胞中Toll樣受體mRNA(TLR1~TLR10)的表達(dá)情況,進(jìn)一步闡述CIK細(xì)胞的抗瘤機(jī)制,評(píng)價(jià)CIK細(xì)胞臨床過繼免疫治療的可行性。 方法: 1.選取符合條件的確診中晚期初治鼻咽癌患者20例,以年齡、性別和治療方法將他們隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組(放療+化療+CIK治療)和對(duì)照組(放療+化療)。通過觀察兩組患者不同方法治療后的生活質(zhì)量、身體狀況(飲食、睡眠及體重)及應(yīng)用SDS、SAS對(duì)兩組患者進(jìn)行治療前后的心理狀況評(píng)價(jià),,同時(shí)觀察患者對(duì)CIK細(xì)胞回輸后的臨床反應(yīng)。計(jì)量資料用χ±s表示,采用配對(duì)t檢驗(yàn)。 2.抽取健康志愿者靜脈血,采用Ficoll淋巴分離液密度離心法分出PBMC,參考文獻(xiàn)報(bào)道標(biāo)準(zhǔn)的CIK細(xì)胞培養(yǎng)方法培養(yǎng)CIK細(xì)胞生成。 3.分別于第3天、6天、9天、12天、15天用細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法計(jì)算CIK增殖細(xì)胞數(shù)量,于第15天用流式細(xì)胞儀檢測(cè)CIK細(xì)胞表面CD3、CD56分子的表達(dá)情況,用RT-PCR法分別檢測(cè)PBMC和CIK細(xì)胞第9天、12天、15天TLR1~TLR10的mRNA表達(dá)情況。 結(jié)果 1、鼻咽癌患者經(jīng)CIK細(xì)胞回輸后,與單純放化療對(duì)照組相比,實(shí)驗(yàn)組的生活質(zhì)量、身體狀況及精神、心理狀況明顯改善。 2、PBMC經(jīng)多種細(xì)胞因子(INF-γ、IL-2、IL-1β、MabCD3等)刺激后,第6天開始明顯增殖,第15天左右細(xì)胞增殖達(dá)高峰,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞表面CD3、CD56顯示成功培養(yǎng)成CIK細(xì)胞。 3、CIK細(xì)胞與對(duì)照組外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)相比,TLR1~TLR10的表達(dá)存在差異:PBMC中TLR均有不同程度的表達(dá);在CIK細(xì)胞中TLR1的表達(dá)增強(qiáng),TLR4的表達(dá)減弱;TLR9在兩種細(xì)胞均有較高的表達(dá)。 結(jié)論 1.CIK細(xì)胞能夠提高鼻咽癌患者的生活質(zhì)量、身體狀況及精神、心理狀態(tài),無明顯不良反應(yīng)。進(jìn)一步證明CIK細(xì)胞過繼免疫治療對(duì)提高腫瘤患者生活質(zhì)量、精神狀態(tài)及免疫力方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),可作為腫瘤放化療的輔助治療方案。 2.TLR在PBMC及CIK細(xì)胞中的表達(dá)具有選擇性,CIK細(xì)胞的殺瘤活性可能與TLR的表達(dá)相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】:CIK TLR 鼻咽癌 過繼免疫
【學(xué)位授予單位】:廣東藥學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R739.63
【目錄】:
  • 摘要6-8
  • Abstract8-10
  • 前言10-14
  • 第一部分 CIK 細(xì)胞在鼻咽癌治療的研究14-25
  • 引言14-15
  • 材料與方法15-21
  • 2.1 材料15
  • 2.1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象15
  • 2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器及試劑15
  • 2.2 方法15-16
  • 2.2.1 設(shè)計(jì)方案15
  • 2.2.2 觀察于記錄15-16
  • 2.2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理16
  • 2.3 結(jié)果16-18
  • 2.3.1 入選患者一般情況16
  • 2.3.2 生活質(zhì)量、身體狀況(飲食、睡眠及體重)改善情況16-17
  • 2.3.3 心理狀況評(píng)價(jià)17-18
  • 2.4 討論18-21
  • 參考文獻(xiàn)21-25
  • 第二部分 CIK 細(xì)胞中 TLR 的表達(dá)情況25-40
  • 引言25-26
  • 材料與方法26-37
  • 1.1. 材料26-27
  • 1.1.1 實(shí)驗(yàn)樣本26
  • 1.1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器26-27
  • 1.1.3 主要實(shí)驗(yàn)試劑及生產(chǎn)廠家27
  • 1.2 方法27-30
  • 1.2.1 實(shí)驗(yàn)樣本收集27-28
  • 1.2.2 CIK 細(xì)胞28-29
  • 1.2.3 RNA 提取29
  • 1.2.4 RT-PCR 反應(yīng)29-30
  • 1.3 結(jié)果30-34
  • 1.3.1 外周血分離出 PBMC 及第 3 天、6 天、9 天、12 天、15 天 CIK 細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果30-31
  • 1.3.2 流式細(xì)胞儀測(cè)定 CIK 細(xì)胞培養(yǎng)前后細(xì)胞免疫表型31-32
  • 1.3.3 健康人外周 PBMC 及 CIK 細(xì)胞第 9 天、12 天、15 天的 TLR 表達(dá)情況32-34
  • 1.4 討論34-37
  • 參考文獻(xiàn)37-40
  • 全文小結(jié)與建議40-42
  • 綜述42-50
  • 參考文獻(xiàn)46-50
  • 附錄一 英文縮略詞表50-51
  • 附錄二 SAS、SDS 表51-53
  • 附錄三 引物列表53-54
  • 致謝54

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李淑艷;邢淑賢;;CIK細(xì)胞的特點(diǎn)及其在腫瘤生物治療中的作用[J];癌變.畸變.突變;2007年05期

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3 楊妤;楊新輝;周光華;;鼻咽癌患者自體細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞體外增殖及殺瘤活性[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2012年04期

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5 施玲燕;劉繼斌;劉曉玲;徐鳴;;CIK細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究及治療腫瘤的臨床療效觀察[J];腫瘤基礎(chǔ)與臨床;2009年02期

6 李慧敏;王燕青;楊志紅;;背景音樂改善腫瘤熱療患者焦慮和抑郁的效果[J];解放軍護(hù)理雜志;2007年15期

7 張樹儉;鄒作君;;Toll樣受體與腎臟疾病研究進(jìn)展[J];中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志;2007年10期

8 鄧海峰;陸明洋;徐斌;鄭曉;李敏;劉檢;周怡;孫青;石紅兵;吳昌平;蔣敬庭;;自體CIK過繼免疫治療惡性腫瘤的最佳輸注時(shí)間[J];臨床檢驗(yàn)雜志;2011年09期

9 林蕓;蔡鵬威;;CIK細(xì)胞在慢性乙型肝炎患者外周血中表達(dá)及臨床意義[J];免疫學(xué)雜志;2008年06期

10 方慧云;程偉民;李曉玲;季明芳;;放化療同步CIK治療對(duì)鼻咽癌患者免疫功能的影響[J];檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床;2012年15期



本文編號(hào):591539

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