發(fā)布時(shí)間：2017-07-14 16:09

  本文關(guān)鍵詞：GCaMP基因工程化的C17.2神經(jīng)干細(xì)胞的鈣離子成像研究

  更多相關(guān)文章： C.神經(jīng)干細(xì)胞 GCaMP GECI Fluo- AM

【摘要】：目的研究GCa MP(屬于基因編碼鈣指示劑/蛋白鈣指示劑)基因工程化的C17.2神經(jīng)干細(xì)胞的鈣離子成像。方法用慢病毒轉(zhuǎn)染C17.2細(xì)胞,獲得穩(wěn)定表達(dá)GCa MP基因的C17.2-GCa MP細(xì)胞。Real-time PCR定量檢測(cè)C17.2細(xì)胞及C17.2-GCa MP細(xì)胞中神經(jīng)干細(xì)胞標(biāo)志物巢蛋白(nestin)的表達(dá)情況。將C17.2細(xì)胞(Fluo-4 AM染色后)和C17.2-GCa MP細(xì)胞置于定制數(shù)字熒光顯微鏡下進(jìn)行鈣離子熒光檢測(cè)。結(jié)果 Real-time PCR檢測(cè)結(jié)果提示C17.2細(xì)胞及C17.2-GCa MP細(xì)胞中nestin表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。C17.2-GCa MP細(xì)胞較Fluo-4 AM染色C17.2細(xì)胞鈣離子熒光銳波(spike)波形持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)且相對(duì)熒光強(qiáng)度強(qiáng)(P0.05),在Fluo-4 AM染色C17.2細(xì)胞中能觀察到鈣離子熒光慢波(wave)波形,而C17.2-GCa MP wave波形不典型。結(jié)論 C17.2-GCa MP細(xì)胞在保持神經(jīng)干細(xì)胞干性的同時(shí)能夠監(jiān)測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈣離子變化,能夠運(yùn)用于神經(jīng)干細(xì)胞移植治療視網(wǎng)膜色素變性功能整合的研究。
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院全軍眼科中心視覺(jué)損傷與再生修復(fù)重慶市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： C.神經(jīng)干細(xì)胞 GCaMP GECI Fluo- AM
【基金】：國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃(973計(jì)劃,2013CB967002)~~
【分類號(hào)】：R774.13
【正文快照】： 慶市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室)視網(wǎng)膜色素變性是一類遺傳性致盲性眼病[1],藥物治療無(wú)效[2],干細(xì)胞移植治療具有良好前景。干細(xì)胞移植治療功能整合機(jī)制研究是干細(xì)胞移植治療視網(wǎng)膜變性疾病研究的重要方面。神經(jīng)元通過(guò)整合形成突觸功能連接,鈣離子在突觸功能信號(hào)傳遞中發(fā)揮重要作用[3]。GCa M

【共引文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：541728