本文關(guān)鍵詞：糖尿病視網(wǎng)膜病變外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量及功能的變化，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景及目的 血管內(nèi)皮功能障礙是糖尿病視網(wǎng)膜病變發(fā)生及發(fā)展的始動因素之一。內(nèi)皮祖細(xì)胞(Endothelial Progenitor Cell, EPC)可參與出生后血管再生和血管內(nèi)皮損傷后修復(fù)。本實驗通過提取糖尿病視網(wǎng)膜病變(Diabetic Retinopathy, DR)患者、單純糖尿病(Diabetes Mellitus, DM)患者及無糖尿病對照者外周血中內(nèi)皮祖細(xì)胞,進(jìn)行體外培養(yǎng)后對各組細(xì)胞進(jìn)行流式細(xì)胞儀計數(shù),并分別比較遷移、粘附、增殖等功能變化,探討EPC在糖尿病視網(wǎng)膜病變發(fā)病機制中的作用,旨在為早期防治糖尿病視網(wǎng)膜病變提供理論依據(jù),為臨床治療糖尿病視網(wǎng)膜病變開拓思路、提供參考。 方法 本文隨機選取糖尿病視網(wǎng)膜病變患者12例(DR組)、單純糖尿病患者18例(DM組)和無糖尿病的單純老年性白內(nèi)障患者15例作為對照組,采用Ficoll密度梯度離心法收集外周血單個核細(xì)胞(Mononucl ear cell, MN C),采用體外培養(yǎng)技術(shù)成功分離、培養(yǎng)外周血EPC,觀察EPC生長情況,并利用免疫熒光技術(shù)鑒定及分析EPC具有分化為內(nèi)皮細(xì)胞的特性。體外培養(yǎng)10天后,應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)鑒定CD34/CD133陽性細(xì)胞百分比,并分別對各組細(xì)胞采用二苯基四氮唑嗅鹽(MTT)比色法、粘附能力測定實驗和Transwell實驗檢測EPC的增殖、粘附和遷移能力,進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。 結(jié)果 1.EPC培養(yǎng)：新分離的外周血單核細(xì)胞呈圓形,透亮,懸浮于培養(yǎng)基,臺盼藍(lán)染色活細(xì)胞99%。體外培養(yǎng)第3天可見貼壁細(xì)胞體積增大,梭形細(xì)胞增加。第7天可見貼壁細(xì)胞呈集落樣生長,培養(yǎng)至第10天貼壁細(xì)胞大多呈梭形,并可見條索狀結(jié)構(gòu),培養(yǎng)至第20天可見貼壁細(xì)胞呈鋪路石樣。 2.EPC鑒定：細(xì)胞培養(yǎng)第10天,熒光染色后在熒光顯微鏡下觀察。顯示紅色熒光的為Dil-ac-LDL陽性細(xì)胞,顯示綠色熒光的為FITC-UEA-1陽性細(xì)胞,顯示橙色熒光為Dil-ac-LDL與FITC-UEA-1雙陽性細(xì)胞,倒置熒光顯微鏡下記數(shù)雙陽性細(xì)胞95%。 3.EPC表型檢測：流式細(xì)胞儀鑒定第10天的貼壁細(xì)胞CD34、CD133陽性率為對照組(45.192±1.287)%,DM組(30.131±3.245)%,DR組(37.375±2.501)%。DM組及DR組與對照組相比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),并且DR組EPC陽性率高于DM組,二者差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 4.EPC增殖能力(OD值)比較：對照組0.330±0.047,DM組0.225±0.042,DR組0.120±0.029。DM組及DR組與對照組相比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),并且DR組EPC陽性率高于DM組,二者差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 5.EPC粘附能力(細(xì)胞數(shù)/×200視野)比較：對照組76.400±7.503,DM組51.167±6.646,DR組26.500±7.853。DM組及DR組與對照組相比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),并且DR組EPC陽性率高于DM組,二者差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 6.EPC遷移能力(細(xì)胞數(shù)/×200視野)比較：對照組23.600±6.504,DM組20.833±4.491,DR組12.000±2.944。對照組雖略高于DM組,但是差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),DR組與對照組相比,二者有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05),DR組與DM組相比,二者有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。 結(jié)論 1.外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)后,糖尿病視網(wǎng)膜病變組和糖尿病組內(nèi)皮祖細(xì)胞陽性率較對照者減少,而糖尿病視網(wǎng)膜病變組內(nèi)皮祖細(xì)胞陽性率較糖尿病組增高。糖尿病視網(wǎng)膜病變組內(nèi)皮祖細(xì)胞的增殖、粘附和遷移能力受損。 2.外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量減低和功能受損可能是糖尿病視網(wǎng)膜病變發(fā)生和發(fā)展的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。 3.改善外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞功能及數(shù)量可能成為糖尿病視網(wǎng)膜病變預(yù)防與治療的一個新靶點,為糖尿病視網(wǎng)膜病變的預(yù)防與治療提供了新思路。
【關(guān)鍵詞】：內(nèi)皮祖細(xì)胞 糖尿病視網(wǎng)膜病變 外周血 細(xì)胞培養(yǎng) 功能測定
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R774.1
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 縮略語/符號說明9-10
• 前言10-13
• 研究現(xiàn)狀、成果10-12
• 研究目的、方法12-13
• 對象和方法13-20
• 1 研究對象13-14
• 2 實驗儀器及試劑14-15
• 3 實驗方案15-19
• 4 統(tǒng)計學(xué)處理19-20
• 結(jié)果20-31
• 1 一般資料分析20-21
• 2 眼科檢查結(jié)果21-24
• 3 EPG培養(yǎng)及鑒定24-27
• 4 內(nèi)皮祖細(xì)胞功能測定27-31
• 討論31-40
• 1. EPC的生物學(xué)特性31-32
• 2. EPC的分離32-33
• 3. EPC的培養(yǎng)33-34
• 4. EPG的鑒定34-35
• 5. EPC數(shù)量的變化及意義35-37
• 6. EPG功能的變化及意義37-38
• 7.展望38-40
• 結(jié)論40-41
• 參考文獻(xiàn)41-46
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明46-47
• 綜述47-55
• 綜述參考文獻(xiàn)51-55
• 致謝55

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前9條

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本文編號：421946