本文關鍵詞：胚胎干細胞移植治療視網(wǎng)膜色素變性的相關研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的： 視網(wǎng)膜色素變性（Retinitis pigmentosa，RP）是一種遺傳性進行性光感受器細胞喪失并最終導致視網(wǎng)膜變性萎縮為特征的一組疾病，目前RP還缺乏有效的治療方法。本研究旨在通過腹腔注射碘酸鈉（NaIO_3）造成RP小鼠模型，以探討胚胎干細胞移植術對RP小鼠的治療作用。 材料與方法： 健康C57BL/6小鼠60只，隨機取出40只小鼠腹腔注射NaIO_3致小鼠雙眼RP模型，其余20只小鼠腔腹注入等量生理鹽水。建模后第7天，將所有RP模型小鼠的左眼于視網(wǎng)膜下腔注射綠色熒光小鼠胚胎干細胞（Green fluorescentmouse embryonic stem cells，GFP-mESCs），此組簡稱為GFP-mESCs治療組；右眼于視網(wǎng)膜下腔注射等量DMEM/F12，此組稱為RP模型組；腹腔注入等量生理鹽水的小鼠視網(wǎng)膜下腔注射等量DMEM/F12，此組稱為正常對照組。第4周末處死所有小鼠，取小鼠眼球分別行HE染色檢測視網(wǎng)膜全層厚度和感光細胞層厚度，免疫組化染色及蛋白質(zhì)印跡法檢測S-Opsin及β-Tubulin蛋白表達量。 結果： 1、用碘酸鈉腹腔注射法成功地建立了C57BL/6小鼠雙眼RP動物模型。 2、從視網(wǎng)膜組織形態(tài)學方面看，GFP-mESCs治療后視網(wǎng)膜結構仍出現(xiàn)視網(wǎng)膜損傷表現(xiàn)，但損傷程度較未經(jīng)治療的RP模型組輕。 3、從視網(wǎng)膜相關蛋白表達量看，GFP-mESCs治療后S-Opsin及β-Tubulin蛋白表達量較正常對照組減少，卻高于RP模型組。 結論： 從視網(wǎng)膜組織從視網(wǎng)膜組織形態(tài)學及視網(wǎng)膜相關蛋白表達量的變化方面，可以證實視網(wǎng)膜下腔胚胎干細胞移植治療可以在一定程度上緩解RP的發(fā)生發(fā)展，為臨床治療RP提供幫助
【關鍵詞】：RP GFP-mESCs 移植治療 NaIO_3
【學位授予單位】：南昌大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R774.1
【目錄】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-9
• 第1章 前言9-12
• 1.1 概述9
• 1.2 國內(nèi)外的研究現(xiàn)狀與存在的問題9-12
• 1.2.1 視網(wǎng)膜色素變性的研究現(xiàn)狀9-10
• 1.2.2 本研究提出的假說和驗證方法10-12
• 第2章 材料與方法12-23
• 2.1 實驗動物、材料和設備12-14
• 2.1.1 實驗動物12
• 2.1.2 實驗試劑12-13
• 2.1.3 實驗設備13-14
• 2.2 實驗方法14-22
• 2.2.1 造模、實驗分組和實驗取材14-15
• 2.2.2 GFP-mESCs 的移植15-16
• 2.2.3 蘇木素-伊紅（HE）染色及免疫組織化學（IHC）染色16-18
• 2.2.4 蛋白質(zhì)印跡法試驗18-22
• 2.3 統(tǒng)計學處理22-23
• 第3章 結果23-34
• 3.1 小鼠成活率23-24
• 3.2 視網(wǎng)膜組織形態(tài)學觀察24-26
• 3.2.1 HE 染色結果判定24-25
• 3.2.2 免疫組化染色結果判定25-26
• 3.3 視網(wǎng)膜的體視學分析26-30
• 3.3.1 各組視網(wǎng)膜厚度檢測26-28
• 3.3.2 各組的免疫組化分析28-30
• 3.4 蛋白質(zhì)印跡法檢測蛋白30-34
• 3.4.1 S-Opsin 的蛋白相對表達量（%）30-31
• 3.4.2 β-Tubulin 的蛋白相對表達量（%）31-34
• 第4章 討論34-39
• 4.1 RP 的發(fā)病機制與目前的治療方案34
• 4.2 關于 NaIO_3建立 C57bl/6 小鼠雙眼 RP 模型與胚胎干細胞的運用34-35
• 4.3 視網(wǎng)膜下腔注射 GFP-mESCs 的可行性因素35-37
• 4.3.1 視網(wǎng)膜的特殊結構利于移植細胞的存活35-36
• 4.3.2 視網(wǎng)膜的損傷利于移植細胞的遷移分化36
• 4.3.3 經(jīng)玻璃體-視網(wǎng)膜途徑的內(nèi)路法移植細胞是安全可靠的36-37
• 4.4 GFP-mESCs 視網(wǎng)膜下腔移植術后 C57bl/6 小鼠視網(wǎng)膜組織的保護作用2937-39
• 4.4.1 GFP-mESCs 移植術后視網(wǎng)膜形態(tài)學研究37
• 4.4.2 GFP-mESCs 移植術后視網(wǎng)膜相關蛋白表達量研究37-39
• 第5章 結論與展望39-40
• 5.1 結論39
• 5.2 展望39-40
• 致謝40-41
• 參考文獻41-44
• 攻讀學位期間的研究成果44-45
• 綜述45-54
• 參考文獻51-54

【參考文獻】

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本文編號：408521