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槲皮素對(duì)糖尿病大鼠晶狀體上皮細(xì)胞凋亡的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-05-20 12:26

  本文關(guān)鍵詞:槲皮素對(duì)糖尿病大鼠晶狀體上皮細(xì)胞凋亡的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察槲皮素(QUE)對(duì)鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)的糖尿病性白內(nèi)障大鼠晶狀體上皮細(xì)胞(LECs)凋亡及其凋亡調(diào)控基因bcl-2、bax表達(dá)的影響,探討槲皮素對(duì)糖尿病大鼠晶狀體的保護(hù)作用。方法:1、體重150g-180g雄性SD大鼠60只,經(jīng)裂隙燈顯微鏡檢查排除雙眼晶狀體病變及其它眼部疾病。適應(yīng)性喂養(yǎng)7d后禁食12h,不禁飲,隨機(jī)抽取40只予以腹腔注射1%鏈脲佐菌素,剩余20只大鼠則設(shè)置為正常對(duì)照組(對(duì)照組),腹腔注射等體積0.1mol/L檸檬酸鹽緩沖液。72h后尾靜脈取血,測(cè)得空腹血糖≥16.7mmol/L為造模成功。2、將糖尿病大鼠隨機(jī)分為糖尿病模型組(糖尿病組)和槲皮素干預(yù)組(槲皮素組)。自造模成功第二天起,槲皮素組每日給予槲皮素50mg/kg灌胃,糖尿病組和對(duì)照組每天給予等體積0.5%羧甲基纖維素(CMC)灌胃。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中對(duì)大鼠飲食、飲水、尿量、精神等一般情況進(jìn)行每日觀察及記錄,每周稱(chēng)量體重1次并記錄,每2周檢測(cè)血糖1次。3、使用復(fù)方托吡卡胺滴眼液給以大鼠雙眼充分散瞳,采用數(shù)碼裂隙燈顯微鏡每周1次對(duì)各組晶狀體混濁程度進(jìn)行觀察并記錄。分別于STZ注射后4周、8周處死各組大鼠5只,12周時(shí)處死各組剩余大鼠。摘除眼球,分離晶狀體,每組各時(shí)間點(diǎn)取5只晶狀體用于固定包埋,制備石蠟切片用于HE染色及免疫組織化學(xué)法檢測(cè)晶狀體上皮細(xì)胞中bcl-2和bax的表達(dá)情況。各組剩余晶狀體用于制備細(xì)胞懸液檢測(cè)細(xì)胞凋亡。結(jié)果:1、一般情況:對(duì)照組大鼠生長(zhǎng)狀況良好;采用STZ腹腔注射誘導(dǎo)糖尿病大鼠模型,40只大鼠均造模成功并納入實(shí)驗(yàn),所有模型大鼠均出現(xiàn)“多飲、多食、多尿”的典型糖尿病表現(xiàn)。2、血糖:在實(shí)驗(yàn)4周、8周、12周,糖尿病組和槲皮素組血糖均高于對(duì)照組(P0.05),但糖尿病組與槲皮素組比較差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3、晶狀體混濁情況:在實(shí)驗(yàn)研究過(guò)程中,對(duì)照組大鼠晶狀體始終保持透明,隨著實(shí)驗(yàn)進(jìn)展,4周時(shí)糖尿病組、槲皮素組大鼠晶狀體均開(kāi)始出現(xiàn)不同程度混濁。4周、8周和12周時(shí)糖尿病組、槲皮素組晶狀體混濁程度均比對(duì)照組重(P0.05),糖尿病組晶狀體混濁程度比槲皮素組更重(P0.05)。4、HE染色:對(duì)照組晶狀體上皮細(xì)胞為單層立方上皮,細(xì)胞形態(tài)規(guī)則,分布均勻,外包繞晶狀體囊膜,晶狀體纖維細(xì)胞未見(jiàn)異常。糖尿病組、槲皮素組晶狀體上皮細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則,多呈扁平狀或柱狀,胞質(zhì)疏松染色淡,可見(jiàn)空泡,赤道至后囊區(qū)域內(nèi)晶狀體纖維細(xì)胞內(nèi)可見(jiàn)大量未被降解的細(xì)胞器,但槲皮素組較糖尿病組少。5、免疫組化:bcl-2在三組均呈陽(yáng)性表達(dá),在4周、8周、12周時(shí)對(duì)照組與糖尿病組、槲皮素組之間表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),而隨著實(shí)驗(yàn)進(jìn)展,糖尿病組、槲皮素組表達(dá)逐漸減少,且糖尿病組弱于槲皮素組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);bax在各組則均呈陽(yáng)性表達(dá),在4周、8周、12周時(shí)對(duì)照組與糖尿病組、槲皮素組之間表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),隨著實(shí)驗(yàn)進(jìn)展,糖尿病組、槲皮素組表達(dá)均逐漸增強(qiáng),且糖尿病組bax的表達(dá)強(qiáng)于槲皮素組(P0.05)。6、細(xì)胞凋亡:STZ注射后4周、8周、12周時(shí)糖尿病組大鼠晶狀體上皮細(xì)胞的凋亡率顯著高于對(duì)照組,槲皮素組晶狀體上皮細(xì)胞凋亡率較糖尿病組顯著降低,但仍高于對(duì)照組。各時(shí)間點(diǎn)三組之間兩兩比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1、槲皮素對(duì)糖尿病大鼠晶狀體上皮細(xì)胞凋亡有抑制作用。2、槲皮素可能通過(guò)增強(qiáng)bcl-2的表達(dá)與降低bax的表達(dá)來(lái)對(duì)抗糖尿病大鼠晶狀體上皮細(xì)胞的凋亡,抑制晶狀體混濁。3、槲皮素可能通過(guò)抑制晶狀體上皮細(xì)胞凋亡與晶狀體纖維細(xì)胞中細(xì)胞器的異常降解來(lái)延緩糖尿病大鼠白內(nèi)障的形成。
【關(guān)鍵詞】:槲皮素 細(xì)胞凋亡 晶狀體上皮細(xì)胞 糖尿病性白內(nèi)障 bcl-2 bax
【學(xué)位授予單位】:四川醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類(lèi)號(hào)】:R776.1
【目錄】:
  • 中文摘要3-5
  • 英文摘要5-9
  • 前言9-11
  • 材料與方法11-20
  • 結(jié)果20-29
  • 討論29-37
  • 結(jié)論37-38
  • 參考文獻(xiàn)38-44
  • 中英文縮略詞對(duì)照表44-45
  • 致謝45-46
  • 綜述 槲皮素對(duì)晶狀體保護(hù)作用研究進(jìn)展46-58
  • 參考文獻(xiàn)52-58

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 孟德勝,汪士良;槲皮素及其苷類(lèi)研究進(jìn)展[J];中國(guó)藥房;2000年05期

2 王劭妤,杜宗良,李瑞霞,吳大誠(chéng),邰源臨;槲皮素在無(wú)水乙醇中溶解度的實(shí)驗(yàn)測(cè)定與關(guān)聯(lián)[J];國(guó)際沙棘研究與開(kāi)發(fā);2004年03期

3 張學(xué)武,關(guān)麗萍,李天洙;反相高效液相色譜法測(cè)定珍珠梅中槲皮素的含量[J];時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥;2005年09期

4 許進(jìn)軍;何東初;;槲皮素研究進(jìn)展[J];實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué);2006年04期

5 薛王君;李鳳儀;;中草藥中槲皮素測(cè)定方法的研究[J];江西化工;2006年04期

6 趙文彬;樊蓮蓮;劉桂花;劉金榮;;精制槲皮素的制備及其含量測(cè)定方法研究[J];時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥;2006年12期

7 嚴(yán)軍;劉忠芳;劉紹璞;;汞(Ⅱ)-槲皮素螯合物共振瑞利散射光譜法測(cè)定槲皮素[J];分析化學(xué);2007年01期

8 薛s,

本文編號(hào):381644


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