發(fā)布時間：2017-05-20 20:19

  本文關(guān)鍵詞：白藜蘆醇對高糖誘導(dǎo)人視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響及其機(jī)制的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:糖尿病是一種代謝紊亂疾病,可以導(dǎo)致糖尿病特有的微血管并發(fā)癥(視網(wǎng)膜病變、腎病、神經(jīng)病變)和大血管并發(fā)癥(心血管疾病和中風(fēng)),最終導(dǎo)致壽命縮短。糖尿病視網(wǎng)膜病(diabetic retinopathy,DR)是糖尿病常見和嚴(yán)重的微血管并發(fā)癥之一,是成人后天性致盲的主要原因,在失明的患者中85%是由DR引起。DR的特點(diǎn)是新生血管形成,發(fā)病機(jī)制一般認(rèn)為是由于視網(wǎng)膜微血管系統(tǒng)受損所致,是多種因素相互作用導(dǎo)致,主要包括周細(xì)胞丟失、視神經(jīng)網(wǎng)膜異常和新生血管形成。而視網(wǎng)膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞增生是新生血管形成的前提。白藜蘆醇(Resveratrol,Res)是從紅酒內(nèi)提取的多酚類物質(zhì),它對眼部的主要作用包括:抗氧化應(yīng)激、抗細(xì)胞凋亡、抗腫瘤基因、抗炎、抗血管生成以及血管舒張�；谛卵苌墒翘悄虿⊙鄄“l(fā)生發(fā)展的病理機(jī)制之一,本研究觀察了Res對高糖環(huán)境下人視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞(HRCECs)增殖和細(xì)胞周期的干預(yù)作用,并對其分子機(jī)制進(jìn)行了探討,為Res在糖尿病眼病治療方面提供了新的實驗依據(jù)。方法:1細(xì)胞增殖活性的檢測將處于對數(shù)生長期的人視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞(HRCECs)接種于96孔板中,分為:高滲組(M)(25 mmol/L甘露醇),正常糖濃度組(N)(5.5 mmol/L葡萄糖),高糖組(H)(25 mmol/L葡萄糖),高糖+白藜蘆醇組(R)(R1、R2、R3、R4組分別為25mmol/L葡萄糖加入25、50、100、200μmol/L Res),作用24 h后用CCK-8法檢測細(xì)胞增殖活性。細(xì)胞計數(shù)檢測藥物作用24h后的HRCECs細(xì)胞增殖活性,處理條件同上。2細(xì)胞周期的檢測分為高滲組(M)(加入25 mmol/L甘露醇),正常糖濃度組(N)(5.5 mmol/L葡萄糖),高糖組(H)(25 mmol/L葡萄糖),高糖+白藜蘆醇組(R)(R2、R3組分別為25mmol/L葡萄糖加如50、100μmol/L Res),培養(yǎng)24h后,用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期分布情況。3分組情況同方法2,Western blot及real-time PCR法檢測細(xì)胞周期相關(guān)蛋白及其上游m RNA的表達(dá)情況。結(jié)果:1細(xì)胞增殖活性的檢測:與正常糖濃度組(N)相比,高滲組(M)細(xì)胞增殖活性無顯著性差異,而高糖組(H)細(xì)胞增殖活性則明顯增高(P0.05);不同濃度的Res處理24h后,R1、R2、R3、R4組細(xì)胞增殖活性較高糖組分別下降了4%、11%、16、47%,其中R2、R3、R4組與高糖組比較有顯著性差異(P0.05)(Fig.2A);細(xì)胞計數(shù)分析結(jié)果顯示,與正常糖濃度組(N)相比,高滲組(M)無顯著性差異,而高糖組(H)細(xì)胞計數(shù)則明顯增高(P0.05);用不同濃度的Res作用HRCECs細(xì)胞24 h后,細(xì)胞數(shù)目明顯減少,與H組相比,R1、R2、R3、R4組細(xì)胞數(shù)量分別減少了17%、41%、58%、75%(P均0.05)(Fig.2B,Fig.3)。2流式細(xì)胞學(xué)結(jié)果:高糖組(H)S期的細(xì)胞數(shù)目明顯減少(P0.05)。高糖環(huán)境下不同濃度Res(50、100μmol/L)處理24h后,可使處于S期的細(xì)胞數(shù)顯著增加(P0.05),抑制高糖環(huán)境下HRCECs細(xì)胞周期進(jìn)程(Fig.4,Table 1)。3 Western blot及Real-time PCR結(jié)果示:與正常糖濃度組(N)比較,高滲組(M)細(xì)胞的cyclin A1、CDK2、PCNA m RNA及蛋白的表達(dá)無顯著性差異,而高糖組(H)cyclin A1、CDK2、PCNA的表達(dá)增加,P21CIP1表達(dá)下降,P均0.05;Res(50、100μmol/L)處理24h可劑量依賴性地抑制高糖下HRCRCs細(xì)胞的cyclin A1、CDK2、PCNA的表達(dá),增加P21CIP1的表達(dá)量(P均0.05)(Fig.5-Fig.8,Table 2,Table 3)。結(jié)論:1高糖培養(yǎng)可能通過對細(xì)胞進(jìn)程的影響及上調(diào)cyclin A1、CDK2、PCNA的表達(dá),抑制P21CIP1表達(dá),從而增加HRCECs細(xì)胞的增殖活性;2 Res劑量依賴性地抑制高糖環(huán)境下HRCECs細(xì)胞的增殖活性與對細(xì)胞周期的調(diào)控,抑制cyclin A1、CDK2、PCNA表達(dá)及上調(diào)P21CIP1表達(dá)有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：白藜蘆醇 人視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞 HRCECs 周期相關(guān)蛋白 細(xì)胞周期
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R774.1
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-10
• 英文縮寫10-11
• 前言11-12
• 材料與方法12-16
• 結(jié)果16-18
• 附圖18-28
• 附表28-30
• 討論30-33
• 結(jié)論33
• 參考文獻(xiàn)33-35
• 綜述 白藜蘆醇對眼部的保護(hù)機(jī)制35-45
• 參考文獻(xiàn)40-45
• 致謝45-46
• 個人簡歷46

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 劉濤;鞏增鋒;尹浩;景玉宏;;白藜蘆醇改善糖尿病血管炎癥反應(yīng)及其與RAGE信號的相關(guān)性[J];中國糖尿病雜志;2012年06期

  本文關(guān)鍵詞：白藜蘆醇對高糖誘導(dǎo)人視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響及其機(jī)制的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：382729