目的:探索TGF-β1/Smad信號(hào)通路在早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變（Retinopathy of prematurity,ROP）一期血管生長(zhǎng)延遲中的變化及作用,為早期干預(yù)ROP提供新思路。方法:1、建立大鼠50/10氧誘導(dǎo)視網(wǎng)膜病變（Oxygen-induced retinopathy,OIR）模型,應(yīng)用免疫組化法比較OIR組與對(duì)照組第二天（D2）、D4、D6、D10及D14的視網(wǎng)膜中TGF-β1的表達(dá)量和分布差異;2、體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（Human umbilical vein endothelial cells,HUVEC）,對(duì)實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行高氧/低氧循環(huán)刺激,觀察其形態(tài)學(xué)變化,并進(jìn)行細(xì)胞功能學(xué)檢測(cè)（劃痕實(shí)驗(yàn)及Transwell實(shí)驗(yàn)）;分別提取RNA進(jìn)行RT-qPCR檢測(cè)TGF-β1的mRNA相對(duì)表達(dá)量,Western blotting檢測(cè)細(xì)胞總蛋白中pSmad2/3的表達(dá)量。結(jié)果:1、視網(wǎng)膜免疫組化結(jié)果顯示,在D2和D4,OIR組的TGF-β1表達(dá)量均高于對(duì)照組;在D6,兩組的表達(dá)量差異不明顯;D10和D14,OIR組的表達(dá)量始終低于常氧對(duì)照組。且TGF-β1的表達(dá)主要集中于視網(wǎng)膜淺... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

TGF-p超家族特異性受體及配體

TGF-p超家族的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路

生育齡的大鼠按雌雄比 3:1 將其合籠，晨起見(jiàn)陰道栓子判斷為懷孕。后將孕大鼠單獨(dú)飼養(yǎng)，給予充足的水分和食物，必要時(shí)給予雞蛋進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充，照明采用 12：12 明暗交替光照。孕大鼠生育后，隨機(jī)將乳大鼠及新生鼠隨機(jī)分配為 OIR 組及常氧組。將 OIR 組于分娩后迅速置入自控式氧氣箱中，常氧組仍在常氧環(huán)境下飼養(yǎng)。2) OIR 模型制備將新生鼠于生后第一天即放置于自控式氧氣箱中，接上氧氣，設(shè)置目標(biāo)氧濃度為 50%，打開(kāi)氧氣閥，維持氧濃度始于 50%并定時(shí)監(jiān)測(cè)、適時(shí)調(diào)整、及時(shí)更換，以保證濃度準(zhǔn)確和穩(wěn)定。24 小時(shí)后，更換氧氣濃度為 10%，首先關(guān)閉純氧閥門(mén)，置換為純氮，將氧氣箱濃度設(shè)置為 10%，緩慢通入氮?dú)�，過(guò)程中密切觀察鼠的表現(xiàn)，一旦乳大鼠有煩躁不安等情況出現(xiàn)，應(yīng)調(diào)小或關(guān)閉氮?dú)忾y門(mén)，待其耐受后，再緩慢將氧氣濃度降至 10%，切勿使氧濃度降低過(guò)快。維持箱內(nèi)氧濃度在 10%持續(xù) 24 小時(shí)，期間密切觀察，保證氧濃度。以上為高氧/低氧誘導(dǎo)的第一個(gè)循環(huán)。共完成七個(gè)循環(huán)至新生大鼠出生后第十四天。（如圖 3）

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變研究進(jìn)展[J]. 底煜,陸巖,王愛(ài)媛,楊飏,楊宏偉,陳曉隆.  國(guó)際眼科雜志. 2011(07)
[2]早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變研究現(xiàn)狀與進(jìn)展——第三屆世界早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變大會(huì)紀(jì)要[J]. 費(fèi)萍,趙培泉.  中華眼底病雜志. 2013 (01)

博士論文
[1]ROP的流行病學(xué)調(diào)查及Wnt信號(hào)通路相關(guān)基因研究[D]. 許宇.上海交通大學(xué) 2014



本文編號(hào)：3622079