目的:探索TGF-β1/Smad信號通路在早產兒視網膜病變（Retinopathy of prematurity,ROP）一期血管生長延遲中的變化及作用,為早期干預ROP提供新思路。方法:1、建立大鼠50/10氧誘導視網膜病變（Oxygen-induced retinopathy,OIR）模型,應用免疫組化法比較OIR組與對照組第二天（D2）、D4、D6、D10及D14的視網膜中TGF-β1的表達量和分布差異;2、體外培養(yǎng)人臍靜脈內皮細胞（Human umbilical vein endothelial cells,HUVEC）,對實驗組進行高氧/低氧循環(huán)刺激,觀察其形態(tài)學變化,并進行細胞功能學檢測（劃痕實驗及Transwell實驗）;分別提取RNA進行RT-qPCR檢測TGF-β1的mRNA相對表達量,Western blotting檢測細胞總蛋白中pSmad2/3的表達量。結果:1、視網膜免疫組化結果顯示,在D2和D4,OIR組的TGF-β1表達量均高于對照組;在D6,兩組的表達量差異不明顯;D10和D14,OIR組的表達量始終低于常氧對照組。且TGF-β1的表達主要集中于視網膜淺... 

【文章來源】：東南大學江蘇省211工程院校985工程院校教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

TGF-p超家族特異性受體及配體

TGF-p超家族的信號轉導通路

生育齡的大鼠按雌雄比 3:1 將其合籠，晨起見陰道栓子判斷為懷孕。后將孕大鼠單獨飼養(yǎng)，給予充足的水分和食物，必要時給予雞蛋進行營養(yǎng)補充，照明采用 12：12 明暗交替光照。孕大鼠生育后，隨機將乳大鼠及新生鼠隨機分配為 OIR 組及常氧組。將 OIR 組于分娩后迅速置入自控式氧氣箱中，常氧組仍在常氧環(huán)境下飼養(yǎng)。2) OIR 模型制備將新生鼠于生后第一天即放置于自控式氧氣箱中，接上氧氣，設置目標氧濃度為 50%，打開氧氣閥，維持氧濃度始于 50%并定時監(jiān)測、適時調整、及時更換，以保證濃度準確和穩(wěn)定。24 小時后，更換氧氣濃度為 10%，首先關閉純氧閥門，置換為純氮，將氧氣箱濃度設置為 10%，緩慢通入氮氣，過程中密切觀察鼠的表現(xiàn)，一旦乳大鼠有煩躁不安等情況出現(xiàn)，應調小或關閉氮氣閥門，待其耐受后，再緩慢將氧氣濃度降至 10%，切勿使氧濃度降低過快。維持箱內氧濃度在 10%持續(xù) 24 小時，期間密切觀察，保證氧濃度。以上為高氧/低氧誘導的第一個循環(huán)。共完成七個循環(huán)至新生大鼠出生后第十四天。（如圖 3）

【參考文獻】：
期刊論文
[1]早產兒視網膜病變研究進展[J]. 底煜,陸巖,王愛媛,楊飏,楊宏偉,陳曉隆.  國際眼科雜志. 2011(07)
[2]早產兒視網膜病變研究現(xiàn)狀與進展——第三屆世界早產兒視網膜病變大會紀要[J]. 費萍,趙培泉.  中華眼底病雜志. 2013 (01)

博士論文
[1]ROP的流行病學調查及Wnt信號通路相關基因研究[D]. 許宇.上海交通大學 2014



本文編號：3622079