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阿托伐他汀預(yù)處理大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療糖尿病大鼠視網(wǎng)膜病變的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2022-02-12 12:55
  目的:應(yīng)用阿托伐他汀(atorvastatin,ATV)預(yù)處理大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells BMSCs),將其注射至糖尿病大鼠體的玻璃體腔,觀察預(yù)處理的BMSCs能否改善糖尿病大鼠的視網(wǎng)膜微血管病變,并探討B(tài)MSCs對(duì)糖尿病視網(wǎng)膜病變(diabetic retinopathy,DR)的治療機(jī)制。方法:1.原代提取BMSCs、培養(yǎng)、傳代,鑒定獲取BMSCs的免疫表型。2.利用不同濃度的ATV處理BMSCs,通過免疫熒光法、免疫印跡法(western-blotting)、實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)(real time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR)法檢測 BMSCs 中 CXC 趨化因子 4(CXC chemokine receptor 4,CXCR4)基因表達(dá)的情況;利用MTS細(xì)胞增殖法檢測ATV預(yù)處理后BMSCs的增殖能力,觀察其增殖情況。利用transwell小室法,在基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-l(stromal cell-derived factor... 

【文章來源】:天津醫(yī)科大學(xué)天津市211工程院校

【文章頁數(shù)】:91 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

阿托伐他汀預(yù)處理大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療糖尿病大鼠視網(wǎng)膜病變的實(shí)驗(yàn)研究


圖1體外實(shí)驗(yàn)操作流程??

流程圖,體外實(shí)驗(yàn),操作流程,炎癥因子


圖2體外實(shí)驗(yàn)操作流程??

代時(shí),光鏡,形態(tài),細(xì)胞


部分細(xì)胞呈貼壁生長趨勢,形態(tài)為短梭形,分布稀疏,未貼壁生長的細(xì)胞呈圓??形。換液頻率為3天,細(xì)胞呈快速增殖趨勢,5到7天后發(fā)現(xiàn)細(xì)胞形態(tài)為長梭形,??幾乎全部融合,大小及形態(tài)均勻,生長形態(tài)為漩渦樣(圖1)。??圖1第4代時(shí)BMSCs光鏡下觀察(100x)。細(xì)胞呈長梭形,80-90%融合,形態(tài)相對(duì)均一,星漩??渦狀生長。??1.2.?2?BMSCs免疫表型的檢測??利用免疫熒光進(jìn)行鑒定,傳代后高純度的BMSCs,表達(dá)CD44,不表達(dá)CD11??15??

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1/CXC趨化因子受體4通路在間充質(zhì)干細(xì)胞治療糖尿病視網(wǎng)膜病變中的作用研究[J]. 王健,陳松.  中華眼底病雜志. 2016 (06)
[2]葛根芩連湯聯(lián)合人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療糖尿病早期視網(wǎng)膜病變[J]. 劉亮,王金梁.  中國組織工程研究. 2016(19)
[3]間充質(zhì)干細(xì)胞在視網(wǎng)膜疾病應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 段紅濤,陳松.  中國實(shí)用眼科雜志. 2015 (03)
[4]糖尿病視網(wǎng)膜病變神經(jīng)損傷的發(fā)病機(jī)制和保護(hù)防治研究進(jìn)展[J]. 王月欣,陳松.  中華眼底病雜志. 2014 (02)
[5]辛伐他汀對(duì)高糖高脂誘導(dǎo)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞凋亡的影響[J]. 趙婕,李華青,李晶,薛國芳,陳彥,齊凱,董敏,王惠珍,牛勃.  中國組織工程研究與臨床康復(fù). 2011(23)
[6]普伐他汀對(duì)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖分化及分泌功能的影響[J]. 林海泓,施海明,肖萍,朱軍,羅心平.  中國組織工程研究與臨床康復(fù). 2008(34)



本文編號(hào):3621758

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