背景:糖尿病視網(wǎng)膜病變是糖尿病微血管病變中最重要的表現(xiàn),是世界范圍內(nèi)致盲的主要原因,由于其發(fā)病機(jī)制尚不完全清楚,因而缺乏科學(xué)有效的防治方案。近期研究發(fā)現(xiàn)ROS-inflammasome通路在糖尿病的發(fā)生發(fā)展中扮演著重要的角色。硫化氫是繼一氧化氮和一氧化碳之后發(fā)現(xiàn)的第三種氣體信號分子。研究表明硫化氫在各種系統(tǒng)疾病的病理生理過程中起著重要作用,發(fā)揮著廣泛的生物學(xué)效應(yīng)。目的:本研究旨在探討硫化氫對高糖誘導(dǎo)的ARPE-19細(xì)胞氧化應(yīng)激及炎癥反應(yīng)的影響。方法:將ARPE-19細(xì)胞在低糖及高糖環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng),用NAC、NLRP3 siRNA、NaHS預(yù)處理高糖環(huán)境中的ARPE-19細(xì)胞。利用CCK-8檢測細(xì)胞活力;流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生的ROS;Rt-PCR檢測NLRP3,ASC,Caspase-1,IL-1β和IL-18的mRNA轉(zhuǎn)錄水平;ELISA法檢測IL-1β和IL-18的蛋白表達(dá)。結(jié)果:與低糖組相比,高糖組ARPE-19細(xì)胞活性明顯降低,炎癥因子IL-1β和IL-18 mRNA表達(dá)和蛋白產(chǎn)量增加。高糖環(huán)境下ARPE-19細(xì)胞中NLRP3炎癥小體活化,NLRP3,ACS和caspase-... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：44 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

高糖處理后各組ARPE-19細(xì)胞活性及IL-1β和IL-18mRNA及蛋白表達(dá)分析

3.3 NAC 抑制了 ARPE-19 細(xì)胞中高糖誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)為了驗證 ROS 在炎癥因子產(chǎn)生和炎癥小體激活中的作用，我們按之前分組在高糖環(huán)境下的 ARPE-19 細(xì)胞中加入 25mM 的 NAC 培養(yǎng) 48 小時。結(jié)果顯示 NAC可顯著減弱高糖誘導(dǎo)的 IL-1β和 IL-18 mRNA 及蛋白水平的表達(dá)（P <0.01）（如圖

高糖處理后各組ARPE-19細(xì)胞內(nèi)NLRP3、ASC及caspase-1mRNA表達(dá)分析

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]自噬抑制劑3-MA對高糖誘導(dǎo)的人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞增生的抑制作用[J]. 侯文文,石煥琦,張真,張曉梅.  中華實驗眼科雜志. 2017 (01)
[2]腫瘤壞死因子-α對RF/6A細(xì)胞自噬促進(jìn)細(xì)胞增殖、遷移和管腔形成的影響[J]. 李蓉,杜軍輝,常遠(yuǎn).  眼科新進(jìn)展. 2015(12)
[3]自噬抑制劑3-MA抑制高糖條件下猴脈絡(luò)膜視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞血管形成[J]. 杜軍輝,劉佳麗,馬樂,李蓉,張中,李俊琪,成靜.  臨床眼科雜志. 2015(05)
[4]糖尿病視網(wǎng)膜病變:一種非可控性炎癥[J]. 劉巨平,李筱榮.  中華實驗眼科雜志. 2014 (01)
[5]高糖誘導(dǎo)牛視網(wǎng)膜微血管周細(xì)胞凋亡及與整合蛋白連接酶表達(dá)的關(guān)系[J]. 李養(yǎng)軍,王雨生,惠延年.  眼科研究. 2007(10)
[6]氧化應(yīng)激與糖尿病視網(wǎng)膜病變[J]. 廖宇潔,徐格致.  眼科研究. 2007(09)
[7]血清中血管內(nèi)皮生長因子、白細(xì)胞介素-2及腫瘤壞死因子α在糖尿病視網(wǎng)膜病變中的作用[J]. 孟憲民,龐嫵燕.  中華實驗眼科雜志. 2011 (09)
[8]炎癥反應(yīng)和炎性因子與糖尿病視網(wǎng)膜病變的研究進(jìn)展[J]. 馬燕,姜燕榮.  中華實驗眼科雜志. 2013 (01)



本文編號：3555422