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miR-200c調(diào)控PIN1對喉癌Hep-2細(xì)胞生物學(xué)行為的影響

發(fā)布時間:2021-05-16 06:06
  前言:喉癌是頭頸部常見惡性腫瘤之一,約95%為鱗狀細(xì)胞癌,主要起源于喉粘膜上皮組織,喉鱗狀細(xì)胞癌具有較高的死亡率和預(yù)后不良。目前,喉癌的發(fā)生發(fā)展及預(yù)后的眾多分子機(jī)制尚不完全清楚。因此,探究喉癌發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制,尋找其診斷及預(yù)后的生物分子標(biāo)記物至關(guān)重要。miRNAs(microRNAs)是近年來發(fā)現(xiàn)的一類長度約為22個核苷酸的單鏈非編碼RNA,通過特異性地結(jié)合靶基因mRNA的3’UTR而發(fā)揮作用。研究表明,mi RNA既可以作為癌基因下調(diào)抑癌基因的活性,也可以作為抑癌基因下調(diào)癌基因的活性。miR-200c是miR-200家族(miR-200a、miR-200b、miR-200c、miR-429和miR-141)成員之一,位于12號染色體上。研究表明,miR-200c在多種類型的癌中對上皮-間充質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化、細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移、增殖、凋亡、自噬和抗治療過程都起到?jīng)Q定性的作用,而且在不同腫瘤中發(fā)揮不同的作用。目前,miR-200c是否參與喉癌的發(fā)生和發(fā)展尚不明確。前期工作中,我們發(fā)現(xiàn)過表達(dá)PIN1加劇了中心體擴(kuò)增、細(xì)胞異常分裂和細(xì)胞遷移。通過Targetscan等軟件預(yù)測發(fā)現(xiàn),PIN1是miR-... 

【文章來源】:中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】:54 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 細(xì)胞系
        2.1.2 組織標(biāo)本
        2.1.3 主要試劑
        2.1.4 主要儀器
        2.1.5 生物信息學(xué)網(wǎng)址和計算機(jī)分析軟件
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.2 質(zhì)粒提取
        2.2.3 基因的瞬時轉(zhuǎn)染
        2.2.4 Real-timePCR檢測
        2.2.5 WesternBlot
        2.2.6 PIN1基因3'-非翻譯區(qū)-熒光素酶表達(dá)載體構(gòu)建及活性分析
        2.2.7 CCK8檢測
        2.2.8 Transwell實(shí)驗(yàn)
        2.2.9 免疫熒光實(shí)驗(yàn)
        2.2.10 細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)
        2.2.11 統(tǒng)計學(xué)數(shù)據(jù)分析
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 miR-200c參與喉癌的發(fā)生和發(fā)展
    3.2 miR-200c 抑制喉癌 Hep-2 細(xì)胞遷移、減弱中心體異常擴(kuò)增
    3.3 miR-200c靶基因的預(yù)測和鑒定
    3.4 miR-200c 通過調(diào)控 PIN1 抑制喉癌 Hep-2 細(xì)胞的遷移和中心體異常擴(kuò)增
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
在學(xué)期間科研成績
致謝
個人簡介


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]miR-200及其作用機(jī)制[J]. 蘇娟,張慶瑜.  國際腫瘤學(xué)雜志. 2011 (07)



本文編號:3189127

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