目的:研究C57BL/6J小鼠激光誘導脈絡膜新生血管（CNV）形成過程中CD11b、P2X7、NLRP3/Caspase-1炎癥小體和IL-1β的變化,探討視網(wǎng)膜小膠質(zhì)細胞通過P2X7-NLRP3/Caspase-1炎癥小體通路介導的在CNV發(fā)生發(fā)展中的作用機制,為濕性AMD新的防治方法提供科學依據(jù)。方法:40只C57BL/6J小鼠隨機分為正常對照組和CNV激光模型組。采用氪紅激光照射（激光參數(shù):波長647nm,能量200mW,光斑直徑80um,照射時間100ms）視網(wǎng)膜,每只眼圍繞視盤在其周圍距離1個視盤直徑的血管間光凝5個點。實驗各組于激光照射后第4天取材,應用眼底熒光素血管造影（FFA）和光相干斷層掃描（OCT）一體機以及蘇木精-伊紅染色（HE）觀察激光照射處CNV是否形成;應用免疫熒光檢測視網(wǎng)膜冰凍切片P2X7和NLRP3/Caspase-1炎癥小體和IL-1β的表達情況;Western Blot檢測CD11b、P2X7、NLRP3炎癥小體、Caspase-1和IL-1β蛋白含量的表達;實時熒光定量PCR檢測CD11b、P2X7、NLRP3炎癥小體、Caspase-1和IL-1... 

【文章來源】：武漢大學湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．?１視網(wǎng)膜小膠質(zhì)細胞通過Ｐ２Ｘ７－ＮＬＲＰ３／Ｃａｓｐａｓｅ－１炎癥小體通路對ＲＰＥ細胞和脈絡膜血管??內(nèi)皮細胞的作用機制示意圖??

斑區(qū)早期可見強熒光改變，晚期熒光素滲漏擴大，呈邊界模糊的高熒光區(qū)，??證明ＣＮＶ形成。ＯＣＴ示：正常對照組小鼠視網(wǎng)膜各層結(jié)果清晰，ＲＰＥ層連續(xù)；??模型組小鼠視網(wǎng)膜ＲＰＥ層不連續(xù)，可見梭性隆起的高信號（圖３．１）。??Ｎｏｍａｌ?Ｌａｓｅｒ??臓??ｍａｍ??ＭＭ??圖３．１?ＦＦＡ示：正常對照組視網(wǎng)膜的血管以視盤為中心呈放射狀改變，脈絡膜血管呈網(wǎng)狀分布，視網(wǎng)膜血??管充盈良好，未見異常熒光素滲漏；激光造模組激光斑區(qū)早期可見強熒光改變，晚期熒光素滲漏擴大，呈??邊界模糊的高熒光區(qū)，證明ＣＮＶ形成。ＯＣＴ示：正常對照組小鼠視網(wǎng)膜各層結(jié)果清晰，ＲＰＥ層連續(xù)；模型組小??鼠視網(wǎng)膜ＲＰＥ層不連續(xù)，可見梭性隆起的高信號。??１４??

?■■■??圖３．?４視網(wǎng)膜冰凍切片ＣＤ１１ｂ和Ｐ２Ｘ７染色。Ｍｅｒｇｅ圖中激光斑處黃色箭頭所指為兩種抗體共標的陽性細胞。??（ＧＣＬ：神經(jīng)節(jié)細胞層；１ＮＬ：內(nèi)核層；ＯＮＬ：外核層）ＩＦ＊２００??１６??


本文編號：2937195