目的:研究C57BL/6J小鼠激光誘導(dǎo)脈絡(luò)膜新生血管（CNV）形成過(guò)程中CD11b、P2X7、NLRP3/Caspase-1炎癥小體和IL-1β的變化,探討視網(wǎng)膜小膠質(zhì)細(xì)胞通過(guò)P2X7-NLRP3/Caspase-1炎癥小體通路介導(dǎo)的在CNV發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制,為濕性AMD新的防治方法提供科學(xué)依據(jù)。方法:40只C57BL/6J小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組和CNV激光模型組。采用氪紅激光照射（激光參數(shù):波長(zhǎng)647nm,能量200mW,光斑直徑80um,照射時(shí)間100ms）視網(wǎng)膜,每只眼圍繞視盤在其周圍距離1個(gè)視盤直徑的血管間光凝5個(gè)點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)各組于激光照射后第4天取材,應(yīng)用眼底熒光素血管造影（FFA）和光相干斷層掃描（OCT）一體機(jī)以及蘇木精-伊紅染色（HE）觀察激光照射處CNV是否形成;應(yīng)用免疫熒光檢測(cè)視網(wǎng)膜冰凍切片P2X7和NLRP3/Caspase-1炎癥小體和IL-1β的表達(dá)情況;Western Blot檢測(cè)CD11b、P2X7、NLRP3炎癥小體、Caspase-1和IL-1β蛋白含量的表達(dá);實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)CD11b、P2X7、NLRP3炎癥小體、Caspase-1和IL-1... 

【文章來(lái)源】：武漢大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：50 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．?１視網(wǎng)膜小膠質(zhì)細(xì)胞通過(guò)Ｐ２Ｘ７－ＮＬＲＰ３／Ｃａｓｐａｓｅ－１炎癥小體通路對(duì)ＲＰＥ細(xì)胞和脈絡(luò)膜血管??內(nèi)皮細(xì)胞的作用機(jī)制示意圖??

斑區(qū)早期可見(jiàn)強(qiáng)熒光改變，晚期熒光素滲漏擴(kuò)大，呈邊界模糊的高熒光區(qū)，??證明ＣＮＶ形成。ＯＣＴ示：正常對(duì)照組小鼠視網(wǎng)膜各層結(jié)果清晰，ＲＰＥ層連續(xù)；??模型組小鼠視網(wǎng)膜ＲＰＥ層不連續(xù)，可見(jiàn)梭性隆起的高信號(hào)（圖３．１）。??Ｎｏｍａｌ?Ｌａｓｅｒ??臓??ｍａｍ??ＭＭ??圖３．１?ＦＦＡ示：正常對(duì)照組視網(wǎng)膜的血管以視盤為中心呈放射狀改變，脈絡(luò)膜血管呈網(wǎng)狀分布，視網(wǎng)膜血??管充盈良好，未見(jiàn)異常熒光素滲漏；激光造模組激光斑區(qū)早期可見(jiàn)強(qiáng)熒光改變，晚期熒光素滲漏擴(kuò)大，呈??邊界模糊的高熒光區(qū)，證明ＣＮＶ形成。ＯＣＴ示：正常對(duì)照組小鼠視網(wǎng)膜各層結(jié)果清晰，ＲＰＥ層連續(xù)；模型組小??鼠視網(wǎng)膜ＲＰＥ層不連續(xù)，可見(jiàn)梭性隆起的高信號(hào)。??１４??

?■■■??圖３．?４視網(wǎng)膜冰凍切片ＣＤ１１ｂ和Ｐ２Ｘ７染色。Ｍｅｒｇｅ圖中激光斑處黃色箭頭所指為兩種抗體共標(biāo)的陽(yáng)性細(xì)胞。??（ＧＣＬ：神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層；１ＮＬ：內(nèi)核層；ＯＮＬ：外核層）ＩＦ＊２００??１６??


本文編號(hào)：2937195