研究背景及目的成年弱視目前被視為眼科的“絕癥”,無特效療法,其根本原因在于人或動物成熟后其中樞神經(jīng)系統(tǒng)失去可塑性。最近,人們發(fā)現(xiàn)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的某些神經(jīng)元突觸可塑性可以被抗抑郁藥氟西汀(fluoxetine)重新激活,從而為成年視皮層可塑性重啟的研究提供了啟示,為成年弱視治療開辟新的途徑。本研究中我們以大鼠為研究對象,以眼優(yōu)勢可塑性為切入點,采用視覺電生理的方法研究氟西汀對成年大鼠視皮層眼優(yōu)勢可塑性的逆轉(zhuǎn)作用,從而從功能上探討氟西汀對成年大鼠視皮層的“去成熟化”作用;采用組織化學(xué)、免疫熒光及免疫印跡的方法對視皮層相關(guān)結(jié)構(gòu)及功能性因子進(jìn)行檢測,從而為氟西汀“去成熟化”視皮層提供結(jié)構(gòu)和形態(tài)學(xué)證據(jù),以初步探尋氟西汀“去成熟化”成年大鼠視皮層作用的可能機(jī)制;同時,我們建立成年大鼠弱視模型,初步探討氟西汀聯(lián)合遮蓋治療對成年大鼠弱視的治療效果。實驗方法:1、采用圖形視覺誘發(fā)電位(PVEP)的方法研究氟西汀給藥時間與成年大鼠視皮層眼優(yōu)勢(OD)可塑性逆轉(zhuǎn)的關(guān)系,比較氟西汀與雙眼形覺剝奪(BFD)逆轉(zhuǎn)成年大鼠OD可塑性的效果。2、采用免疫熒光及免疫印跡法研究硫酸軟骨素多糖(CSPGs)及Nogo受體的發(fā)育學(xué)變化以及氟西汀對成年大鼠視皮層CSPGs和Nogo受體的影響。3、利用免疫熒光、Western blot等方法檢測氟西汀對成年大鼠視皮層神經(jīng)元周圍網(wǎng)(PNNs)及白細(xì)胞共同抗原相關(guān)性磷酸酶受體(LAR)表達(dá)的影響。4、采用免疫熒光及免疫印跡法研究鈣結(jié)合小清蛋白(PV)陽性神經(jīng)元的發(fā)育學(xué)及PNN/PV的共表達(dá)變化;以及氟西汀和BFD對成年大鼠視皮層PNN及PV的影響。5、建立大鼠成年(P70)弱視模型,研究氟西汀口服配合傳統(tǒng)遮蓋治療對成年大鼠弱視的治療效果。實驗結(jié)果:1、20%氟西汀水溶液喂養(yǎng)成年大鼠4周可重新激活成年大鼠的OD可塑性,延長給藥時間與4周相當(dāng);氟西汀對視覺可塑性重塑的主要作用機(jī)制是抑制形覺剝奪眼反應(yīng),與BFD既抑制形覺剝奪眼反應(yīng)同時促進(jìn)非形覺剝奪眼反應(yīng)不同。2、CSPGs及Nogo受體在視皮層的表達(dá)呈視覺經(jīng)驗依賴性;氟西汀可使成年大鼠視皮層CSPGs及Nogo受體的表達(dá)回復(fù)到幼年狀態(tài),且其效果與BFD相當(dāng)。3、LAR及PNNs在視皮層共表達(dá)并呈相同的變化規(guī)律;LAR在視皮層的表達(dá)呈視覺經(jīng)驗依賴性,隨大鼠發(fā)育周齡增加,LAR呈逐漸增加;成年大鼠LAR高表達(dá),氟西汀可顯著降低LAR陽性細(xì)胞的數(shù)量,氟西汀對視皮層PNNs及LAR具有“去成熟化”作用。4、PV陽性神經(jīng)元及PNNs呈視覺經(jīng)驗依賴性,作為GABA能中間神經(jīng)元的最重要亞型,絕大部分PV陽性神經(jīng)元被PNNs包繞,隨大鼠視皮層的逐漸發(fā)育,被PNNs包繞的PV陽性細(xì)胞呈逐漸增多,至關(guān)鍵期結(jié)束達(dá)到成年水平;氟西汀喂養(yǎng)4周、BFD及二者聯(lián)合均可顯著降低視皮層PNN及PV陽性神經(jīng)元的密度;氟西汀喂養(yǎng)4周、BFD及二者聯(lián)合均可顯著降低PNN+/PV+/總PV+的比值,但二者聯(lián)合組降低幅度更明顯,表現(xiàn)出二者存協(xié)同作用。5、20%氟西汀水溶液口服4周配合非弱視眼遮蓋對成年大鼠弱視具有治療作用。結(jié)論:本研究發(fā)現(xiàn)氟西汀口服不論在功能還是結(jié)構(gòu)上,對成年大鼠視皮層均表現(xiàn)為顯著的“去成熟化”作用。在功能上,氟西汀口服可以逆轉(zhuǎn)成年大鼠視皮層眼優(yōu)勢可塑性;在結(jié)構(gòu)上,典型表現(xiàn)為視皮層內(nèi)的神經(jīng)元周圍網(wǎng)PNNs、CSPGs、Nogo受體、LAR在氟西汀的作用下出現(xiàn)顯著的“幼年化”改變。而在氟西汀對成年大鼠視皮層“去成熟化”的過程中,伴發(fā)PV陽性的GABA能中間神經(jīng)元特征性的改變,表現(xiàn)為被PNNs包繞的PV陽性細(xì)胞在氟西汀的作用下發(fā)生顯著下調(diào)。最后,氟西汀口服配合經(jīng)典的弱視遮蓋法對成年大鼠的弱視具有顯著的治療效果。
【學(xué)位單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R777.44
【部分圖文】：

10后 Flx 各組 C/I 比值變化 與各自的 MD 前值比較，aP＜0.01，bP＜0.05（配對 t 檢EP：視覺誘發(fā)電位；C/I：對側(cè)眼/同側(cè)眼比值；MD：單眼形覺剝奪；Flx：氟西

成年大鼠MD前后PVEP波形變化Flx：氟西�。籅FD：雙眼形覺剝奪；MD：單眼形覺剝奪

氟西汀不同給藥時間MD前后C/I值（MD前vsMD后，Pairedttest，*：P＜0.05，**：P＜0.01）

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前5條

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本文編號：2808909