【摘要】：目的:通過制備中重度真菌性角膜炎動物模型,探討結膜瓣角膜全覆蓋對治療中重度真菌性角膜炎的療效。方法:選用2-3kg不限雌雄的成年日本大耳白兔37只,按照完全隨機設計分為模型組a組(n=35只),模型對照組b組(n=2只);均將右眼作為實驗眼;用麥氏濁度儀調整黃曲霉菌濃度至10~8集落形成單位(colony forming unit,CUF),一個麥氏濁度單位(1號管)等于3*10~8CUF/ml。預實驗接種方法采用層間注射法,正式實驗選用角膜層間注射法聯(lián)合角膜劃痕法進行造模;將一個麥氏濁度單位再稀釋3倍,用BD一次性使用無菌胰島素注射器在右眼10點鐘方位瞳孔旁中心基質層給予1U濃度為1*10~8CUF/ml的黃曲霉菌(1U=0.01ml)菌液。再用15°側切刀片刮除右眼角膜中央直徑約3-4mm范圍的上皮組織,針頭在角膜表面做井字劃痕,深度約至淺基質層,將含黃曲霉菌菌絲液滴在角膜表面,術畢球結膜下注射1萬單位慶大霉素注射液(0.5ml),對照組b組(n=2只)右眼作為對照眼除層間注射等量生理鹽水及不涂抹真菌菌落外,其余過程同實驗組。48小時后裂隙燈檢查,隨訪觀察待模型建造成功后行10%KOH涂片并乳酸酚棉藍染色、真菌培養(yǎng)進一步進行實驗確認。制備濃度為2.0%的伏立康唑液(瑞輝制藥有限公司)~([1]),選用符合標準的動物模型,均等分為A、B、C三組各11只并加以標記以及實驗對照組D組(n=2只)。A組給予2.0%結膜下注射伏立康唑0.5ml,B組給予結膜瓣角膜全覆蓋,C組給予結膜瓣角膜全覆蓋聯(lián)合結膜下注射2.0%伏立康唑0.5ml的干預,實驗對照D組(2只)給予等量生理鹽水進行干預。給藥頻率:7天前1次/天,7天后1次/2天,14天后1次/3天。干預后在裂隙燈顯微鏡下觀察角膜潰瘍的愈合情況,連續(xù)觀察3個月了解愈合及有無復發(fā)情況。采用spss 17.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學分析,定量數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標準差分析,定量資料采用單樣本t檢驗及方差分析(ANOVA)進行組間分析,定量資料組間兩兩比較用SNK法分析,定性資料組間比較采用卡方檢驗,P0.05差異有統(tǒng)計學意義。結果:預實驗結膜瓣角膜全覆蓋最終結果均為結膜瓣對合處縫線松脫,結膜瓣對合不良且分離,角膜上皮光滑,角膜水腫。正式實驗使用層間注射聯(lián)合角膜劃痕法能成功建立模擬真菌性角膜炎結果,模型a組:其中2只為輕度真菌性角膜炎,其中15只為中度真菌性角膜潰瘍以及18只屬于重度真菌性角膜潰瘍。模型對照b組:無感染。排除不適合本實驗入選標準的2只兔子,造模成功率為94.29%。經(jīng)過對真菌性角膜炎三種不同的干預方式后得出:經(jīng)過比較A組(伏立康唑)、B組(結膜瓣覆蓋術)以及C組(伏立康唑+結膜瓣覆蓋術)后得出,C組愈合時間最短與A、B組比較有統(tǒng)計學意義(p0.05),A組效率高于B組差異具有統(tǒng)計學意義。結論:結膜瓣角膜覆蓋法并不適用于無淺層角膜損傷的真菌性角膜炎。使用層間注射聯(lián)合角膜劃痕法能成功建立模擬真菌性角膜炎的動物模型,成功率較高。三種不同的干預方法中,伏立康唑聯(lián)合結膜瓣角膜全覆蓋治療真菌性角膜炎的總有效率最高,達到治愈時間最短;單純伏立康唑的有效率明顯優(yōu)于單純結膜瓣角膜全覆蓋。
【學位授予單位】：西南醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R779.6
【圖文】：

圖 17不同干預法治療中、重度真菌性角膜炎在不同時間的療Treatment of moderate and severe fungal keratitis with diffention methods at different times

圖 3

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本文編號：2730046