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第二代雜交捕獲法與多重熒光PCR在口咽癌中對高危型HPV的檢測比較

發(fā)布時間:2020-06-22 09:01
【摘要】:目的:本文旨在通過對比第二代雜交捕獲法(HC2)和多重熒光聚合酶鏈反應(PCR)在口咽鱗癌患者中對高危型人乳頭狀瘤病毒(HPV)的檢測結(jié)果,比較兩種檢測方法的優(yōu)缺點并驗證HC2技術(shù)對高危型HPV檢測的可行性。方法:2015年1月至2016年9月間,在青島大學醫(yī)學院附屬醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科及口腔頜面外科就診的經(jīng)病理證實的口咽鱗狀細胞癌31例。采用HC2和多重熒光PCR檢測31例口咽癌患者中高危型HPV感染情況,并應用SPSS17.0統(tǒng)計軟件對其結(jié)果進行分析。通過對比兩種實驗方法測得的結(jié)果計算一致性指數(shù)(Kappa指數(shù)),如Kappa指數(shù)在0.4-0.75之間說明一致性好,如Kappa指數(shù)≥0.75說明一致性極好。結(jié)果:31例標本中通過HC2檢測出高危型HPV陽性7例,陰性24例,陽性檢出率為22.58%,其中有1例陽性患者經(jīng)PCR檢測為陰性。多重熒光PCR檢測出高危型HPV陽性8例,陰性23例,陽性檢出率為25.81%,其中有2例陽性患者經(jīng)HC2檢測為陰性。31例標本中有6例經(jīng)2種方法檢測為陽性符合,占總檢測數(shù)的19.35%,22例為陰性符合,占總檢測數(shù)的70.97%,總符合率為90.32%,總一致性指數(shù)(Kappa指數(shù))為0.7364。HC2和多重熒光PCR兩種方法檢測高危型HPV的一致性較好。結(jié)論:本研究的檢測結(jié)果中,HC2可同時檢測到多種高危型HPV亞型,并與多重熒光PCR比較也具有較好的一致性,對于口咽癌患者使用HC2分析高危型HPV的感染結(jié)果有可行性,在有嚴格質(zhì)量管理的情況下可作為臨床口咽癌患者HPV DNA篩查的有效手段。
【學位授予單位】:青島大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2018
【分類號】:R739.63
【圖文】:

分子結(jié)構(gòu)圖,病毒,雙鏈,主要衣殼蛋白


對高危型 HPV 的檢測比較研究內(nèi)容背景知識1 HPV 分子結(jié)構(gòu)特征及分型HPV 為雙鏈閉合環(huán)狀結(jié)構(gòu)的 20 面體,自身具有立體對稱的形狀,屬于乳多泡病毒科 A 亞群內(nèi)的一組 DNA 病毒,此 DNA 病毒直徑約 55nm,無包膜,顆衣殼蛋白和核酸構(gòu)成(圖 1)。HPV 的雙鏈閉環(huán)基因組分早期區(qū)(Early region)、晚期區(qū)(Laterregion,L)和長控區(qū)(Long control region,LCR)。E 區(qū)主要碼病毒與其和宿主細胞轉(zhuǎn)化的 El、E2、E4、E5、E6、E7 等早期蛋白[12],其 E7 是主要的致癌區(qū),負責參與病毒 DNA 的復制、轉(zhuǎn)錄、翻譯、調(diào)控、以及宿主的轉(zhuǎn)化;L 區(qū)負責對病毒的主要衣殼蛋白 L1 和次要衣蛋白 L2 的編碼;LCR 則擔調(diào)控病毒 DNA 的復制和轉(zhuǎn)錄功能[13]。

圖例,感染率,亞型分類,口咽癌


青島大學碩士學位論文結(jié) 果1 口咽癌患者中的 HPV 感染率及亞型分布31 例標本行多重熒光 PCR 檢測提示 HPV 陽性者 8 例,感染率為 25.81%,其亞型分類為:HPV-16(5 例)、HPV-18(2 例)、HPV-31(1 例)。其中 HPV 陽性患者中 HPV-16 的感染率為 62.5%(圖 2);HVP-18 的感染率為 25%;HPV-31 感染率為 12.5%(表 2)。

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本文編號:2725503

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