【摘要】:目的觀察眼球周注射尼莫地平對兔慢性高眼壓視網(wǎng)膜視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的凋亡和Bcl-2、Bax表達(dá)的影響,以及對眶內(nèi)組織損傷的形態(tài)學(xué)觀察。方法選用新西蘭健康雄性大耳朵白兔54只,隨機(jī)分為正常對照組(A組)6只,實(shí)驗(yàn)組48只。正常對照(A組)不做任何處理,給予常規(guī)飼養(yǎng),一般條件與實(shí)驗(yàn)組均相同管理。實(shí)驗(yàn)組均在局麻下行前房注射復(fù)方卡波姆的方法,制造兔慢性高眼壓模型,均以右眼為實(shí)驗(yàn)眼,連續(xù)監(jiān)測眼壓均高于21.97mm Hg,且無手術(shù)并發(fā)癥的視為造模成功。實(shí)驗(yàn)組隨機(jī)分為4個(gè)亞組(B、C、D、E組),B組給予眼球局部注射等量生理鹽水,C、D、E組給予注射低(0.125 mg)、中(0.25mg)、高(0.5 mg)劑量尼莫地平注射液,每日一次。分別于第2、4w處死動(dòng)物,摘取眼球及眶內(nèi)組織,經(jīng)多聚甲醛固定,常規(guī)行石蠟包埋、切片。視網(wǎng)膜組織行免疫組化法檢測Bcl-2和Bax表達(dá),TUNEL法檢測視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)的細(xì)胞凋亡指數(shù)。眶內(nèi)組織行HE染色、Masson染色、VG染色,進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察,免疫組化法檢測Bcl-2和Bax陽性因子表達(dá),采用Image-Pro Plus 6.0光密度分析軟件,測平均光密度值。所得數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計(jì)軟件分析包SPSS 17.0進(jìn)行分析,比較各組之間的差異情況。結(jié)果視網(wǎng)膜組織HE染色可見模型組視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞水腫,細(xì)胞核固縮,新月形核。測量內(nèi)側(cè)視網(wǎng)膜厚度,統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)在2w和4w時(shí)B組厚度均低于C、D、E組(P0.05),其中D、E兩組之間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P0.05。視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞Bcl-2的表達(dá)在2w和4w時(shí)C、D、E三組均高于模型B組(P0.05),在C、D、E三組中,D、E兩組高于C組(P0.05),組內(nèi)比較C、D、E三組4w表達(dá)量高于2w(P0.05)。視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞Bax的表達(dá)在模型B組Bax表達(dá)在2w和4w兩個(gè)時(shí)間B組均高于C、D、E三組(P0.05),在C、D、E三組中,C組表達(dá)量高于D、E兩組(P0.05),而D、E兩組之間比較(P0.05),組內(nèi)比較C、D、E三組4w表達(dá)量高于2w(P0.05)。Bcl-2與Bax比值顯示D、E兩組均高于B、C兩組(P0.05),且D、E兩組之間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞TUNEL檢測法顯示,在2w和4w B組凋亡指數(shù)均明顯高于C、D、E組(P0.05),在C、D、E三組中,C組表達(dá)高于D、E兩組(P0.05),D、E兩組之間比較在2w時(shí)無明顯差異(P0.05),而在4w時(shí)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。眶內(nèi)組織形態(tài)學(xué)觀察示:球周注射部位眶內(nèi)軟組織可見膠原纖維增生。檢測眼外肌Bcl-2平均光密度值,B、C、D、E組明顯高于正常組(P0.05),而四組之間比較無明顯差異(P0.05)。檢測眼外肌Bax平均光密度值B、C、D、E組表達(dá)明顯高于正常組(P0.05),而四組之間比較無明顯差異(P0.05)。結(jié)論球周注射尼莫地平能夠上調(diào)兔慢性高眼壓RGC的Bcl-2表達(dá)和下調(diào)Bax表達(dá),維持RGC的正常形態(tài),抑制RGC凋亡指數(shù)。球周注射可引起眼外肌組織炎性反應(yīng)、膠原纖維增生,以及上調(diào)Bcl-2表達(dá)、下調(diào)Bax表達(dá)。中、高劑量尼莫地平效果更顯著。
【圖文】:
網(wǎng)膜神經(jīng)纖維層;IPL 內(nèi)叢狀層;INL:內(nèi)核層;ONL);ILM:內(nèi)界膜;MLM:中界膜;黑色豎線:內(nèi)側(cè)視圖 2 正常組 HE 染色(×400)Fig.2 Normal group HE(×400): 2w:RGC 及 RNFL 出現(xiàn)明顯的異常

圖 3 模型組 2w HE 染色(×400) 圖 4 模型組 4w HE 染色(×400)Fig.3 Model group 2w HE(×400) Fig.4 Model group 4w HE(×400)尼莫地平組視網(wǎng)膜形態(tài),在 2w:RGC 與 RNFL 異常程度較模型 B 組 2w 輕,可見少量胞核固縮。B 組與 D、E 兩組內(nèi)側(cè)視網(wǎng)膜厚度比較(P<0.05),而 C 組與
【學(xué)位授予單位】:華北理工大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號】:R775
【參考文獻(xiàn)】
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本文編號:
2706784
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