【摘要】：[目的]通過建立間歇性低氧(Intermittent Hypoxia,IH)模型,模擬人類阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征(obstructive sleep apnea hypopnea syndrome,OSAHS),觀察Tempol抗氧化干預(yù)后大鼠血清葡萄糖(glucose)、胰島素(insulin)和胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)水平的變化,外周血中腫瘤標(biāo)記物(TNF-α)、白介素6(IL-6)、白介素1β(IL-1β)炎癥因子及大鼠胰腺組織勻漿中c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p-JNK、胞漿及胞核中核轉(zhuǎn)錄因子 kB p65(Nuclear factor-KB,NF-kB p65)轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)水平的變化,探討抗氧化劑對胰腺組織局部炎癥和氧化應(yīng)激反應(yīng)損害的干預(yù)及抑制作用。[方法]1.采用SPF級成年雄性Wistar大鼠24只,體重:200-220g。將所有實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分為為4組。即間歇低氧組(IH組)、抗氧化劑干預(yù)組(IH+Tempol組)、正常抗氧化劑對照組(NC+Tempol組)、正常對照組(NC組),每一處理組實(shí)驗(yàn)大鼠為6只,分別置于2個氧艙,每個氧艙中3只。每日間歇低氧暴露時間為9Am-5Pm,總時長為12周。第13周第1天對各處理組大鼠進(jìn)行麻醉,采用放血處死法后取一部分外周血及胰腺組織待用。2.大鼠間歇性低氧暴露12周后:(l)測量血清中g(shù)lucose、insulin及HOMA-IR水平的變化;(2)采用ELISA法檢測各處理組外周血中TNF-α、IL-6和IL-1β水平的變化;(3)各組胰腺組織做病理切片,觀察抗氧化后IH大鼠胰腺組織的病理改變;(4)Western blot檢測各組胰腺組織中轉(zhuǎn)錄因子JNK、p-JNK、胞漿及胞核中NF-kB p65的表達(dá)水平變化;[結(jié)果]1.各組動物血清中空腹glucose,insulin及HOMA-IR的水平的測定:(1)與NC組比較,IH組、IH+tempol組大鼠血清中葡萄糖含量明顯升高,NC+tempol組無明顯改變,IH+tempol組較IH組有所降低,各組間比較有顯著差異性(F=8.235,P=0.000),IH 組與 IH+tempol 組、NC+tempol 組以及 NC 組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值0.01),其余組間兩兩比較無差異;(2)與NC組比較,IH組、IH+tempol組大鼠血清中胰島素含量明顯升高,NC+tempol組無明顯改變,IH+tempol組較IH組有所降低,各組間比較有顯著差異性(F=66.672,P=0.000),除NC+tempol組與NC組比較無差異,其余各組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值0.01);(3)與NC組比較,IH組、IH+tempol組胰島素抵抗指數(shù)明顯升高,NC+tempol組無明顯差距,IH+tempol組較IH組有所降低,各組間比較有顯著差異性(F=76.172,P=0.000),除NC+tempol組與NC組比較無差異,其余各組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值0.01);2.各組動物血清中TNF-α、IL-6、IL-lβ相關(guān)炎性指標(biāo)的水平(1)與NC組比較,IH組、IH+tempol組TNF-α水平明顯升高,NC+tempol組無明顯改變,IH+tempol組較IH組有所降低,各組間比較有顯著差異性(F=115.006,P=0.000),IH 組與 IH+tempol 組、NC+tempol 組以及 NC 組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值0.01),其余組間兩兩比較無差異;(2)與NC組比較,IH組、IH+tempol組IL-6水平明顯升高,NC+tempol組無明顯改變,IH+tempol組較IH組有所降低,各組間比較有顯著差異性(F=39.988,P=0.000),除NC+tempol組與NC組比較無差異,其余各組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P 值0.05);(3)與NC組比較,IH組、IH+tempol組IL-1β水平明顯升高,NC+tempol組無明顯改變,IH+tempol組較IH組有所降低,各組間比較有顯著差異性(F=27.919,P=0.000),除NC+tempol組與NC組、IH+tempol組比較無差異,其余各組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值0.05);3.各處理組胰腺組織病理改變結(jié)果:IH組較NC組大鼠胰腺組織小葉結(jié)構(gòu)缺損甚至消失,腺泡組織呈不同程度萎縮,腺泡細(xì)胞排列紊亂,間隔增寬,外周炎性細(xì)胞明顯增多;IH+tempol組相對于IH組大鼠胰腺組織小葉結(jié)構(gòu)較完整,腺泡組織萎縮程度減少,周邊炎癥細(xì)胞數(shù)量減少,存在恢復(fù)正常的變化趨勢。4.胰腺組織內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子JNK、p-JNK、NF-kBp65及抗氧化劑干預(yù)后的表達(dá)水平:(1)與NC組比較,IH組、IH+tempol組p-JNK表達(dá)水平明顯升高,NC+tempol組無明顯區(qū)別,IH+tempol組較IH組有所降低,各組間比較有顯著差異性(F=43.878,P=0.000),不同處理組JNK蛋白相對表達(dá)量無明顯變化,組間比較無顯著差異性(F=2.129,P=0.129)。p-JNK蛋白相對表達(dá)量進(jìn)一步進(jìn)行組間比較IH組與IH+tempol組、NC+tempol組以及NC組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值0.05),其余組間兩兩比較無差異;(2)與NC組比較,IH組、IH+tempol組胞漿內(nèi)NF-kBp65相對表達(dá)量水平明顯降低,NC+tempol組無明顯區(qū)別,IH+tempol組較IH組有所升高,各組間比較有顯著差異性(F=50.176,P=0.000),除NC+tempol組與NC組比較無差異,其余各組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值0.01);(3)與NC組比較,IH組、IH+tempol組胞核內(nèi)NF-kB p65相對表達(dá)量水平明顯升高,NC+tempol組無明顯區(qū)別,IH+tempol組較IH組有所降低,各組間比較有顯著差異性(F=67.551,P=0.000),除NC+tempol組與NC組比較無差異,其余各組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值0.01);[結(jié)論]1.Tempol抗氧化劑通過干預(yù)和抑制IH降低血清葡萄糖、胰島素、胰島素抵抗水平;2.Tempol抗氧化劑可以降低由IH引發(fā)的氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)水平,但尚不能完全逆轉(zhuǎn);3.Tempol抗氧化劑通過干預(yù)和抑制IH減少受損胰腺組織周圍炎癥細(xì)胞浸潤,且胰腺組織小葉結(jié)構(gòu)存在恢復(fù)傾向;4.Tempol抗氧化劑通過干預(yù)和抑制IH引起的氧化應(yīng)激反應(yīng)使得胰腺組織的氧化應(yīng)激敏感的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路p-JNK及胞核內(nèi)NF-kB p65炎癥信號轉(zhuǎn)導(dǎo)表達(dá)的下降,胞漿內(nèi)NF-kB p65表達(dá)的升高;
【圖文】：

注：＊組與ＮＣ組比較（ＰＣ０．０１），邋▲組與ＮＣ＋Ｔｅｍｐｏｌ組比較（ＰＣ０．０１），S米橛搿劍齲裕澹恚穡熳殄義媳冉希ǎ校跡埃澹埃保�，其余组间翑嚜勅较测犾无统计学意义（ＰＧG埃澹埃擔(dān)╁義媳恚場⑼跡部煽闖霾煌磣櫬笫笱迤咸煙撬降謀浠耄危米楸冉�，，辶x希桑茸欏ⅲ桑齲簦澹恚穡錚熳櫬笫笱逯釁咸煙嗆棵饗隕擼危茫簦澹恚穡錚熳槲廾饗愿膩義媳�，Ｉ｝x簦澹恚穡錚熳榻希桑茸橛興檔停髯榧潯冉嫌邢災(zāi)鉅煨裕ǎ疲劍福玻常擔(dān)義希校劍埃澹埃埃埃

本文編號：2699914