發(fā)布時(shí)間：2020-05-18 06:10

【摘要】：目的先天性小耳畸形位列十大出生缺陷之一,病因復(fù)雜尚未明確。研究小耳畸形的致病因素和發(fā)病機(jī)制至關(guān)重要,對(duì)該病的早期干預(yù)有著不可忽視的作用。本研究主要著重于外界環(huán)境刺激對(duì)機(jī)體發(fā)病學(xué)的貢獻(xiàn),有如下兩方面:一是通過調(diào)查圍孕期環(huán)境危險(xiǎn)因素的暴露對(duì)不同分型間的小耳畸形的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的影響是否存在差別,探究環(huán)境危險(xiǎn)因素在小耳畸形發(fā)病學(xué)中影響;二是通過基于殘耳軟骨組織的非靶向代謝組學(xué)研究,從小分子水平找尋差異代謝物和可能發(fā)生紊亂的代謝通路,從這一全新的角度探究小耳畸形的發(fā)病機(jī)制。方法1.以2017年9月至2018年2月來自全國(guó)各地的因先天性小耳畸形在我院就診的患者為研究對(duì)象,根據(jù)納入排除標(biāo)準(zhǔn)納入患者63例。結(jié)合國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)和臨床中發(fā)現(xiàn)的影響因素設(shè)計(jì)問卷,向研究對(duì)象的父母親發(fā)放問卷。問卷內(nèi)容基于患者母親圍孕期間的情況進(jìn)行,包含患者一般信息、居住地環(huán)境情況、患者父親的生活習(xí)慣和母親的生活習(xí)慣。收集全部數(shù)據(jù)整理后,導(dǎo)入SPSS20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,以研究對(duì)象的畸形程度進(jìn)行分組,分析不同分型間小耳畸形和環(huán)境危險(xiǎn)因素之間的聯(lián)系有無差別。2.在基于醫(yī)院的研究中選取2017年6月至2018年1月間的單純性小耳畸形患者作為研究對(duì)象,同時(shí)期行手術(shù)治療的具有正常耳軟骨組織的患者(正常治療過程中包括需要采取耳軟骨者)作為對(duì)照進(jìn)行病例對(duì)照實(shí)驗(yàn)。手術(shù)時(shí)采集以上兩組人群的耳軟骨組織進(jìn)行分組編號(hào),病例組為小耳畸形患者的殘耳軟骨組織,共18例;對(duì)照組為正常耳軟骨組織,共18例。將樣本預(yù)處理后進(jìn)行基于氣相色譜飛行時(shí)間質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(GC-TOFMS)的代謝組學(xué)研究,使用XploreMET軟件進(jìn)行多維和單維數(shù)據(jù)分析,篩選得出差異性代謝物和可能發(fā)生紊亂的代謝通路。結(jié)果1.根據(jù)畸形程度分成三組,其中Ⅰ型18例(男11例,女7例),Ⅱ型39例(男27例,女12例),Ⅲ型6例(男4例,女2例)。利用單因素分析得出:表明居住地附近的危險(xiǎn)因素(周圍環(huán)境污染情況、空氣質(zhì)量情況、粉塵情況以及家庭裝修狀況)對(duì)不同分型間的小耳畸形的影響沒有差別,p值0.05,統(tǒng)計(jì)學(xué)無意義;父親在圍孕期吸煙、飲酒或飲茶對(duì)不同分型的小耳畸形的影響沒有差別,p值0.05,統(tǒng)計(jì)學(xué)無意義;母親在圍孕期間暴露于環(huán)境危險(xiǎn)因素下(飲食喜好、飲茶、飲酒、粉塵、寵物接觸、主動(dòng)或被動(dòng)吸煙)對(duì)不同分型的小耳畸形的影響沒有差別,p值0.05,統(tǒng)計(jì)學(xué)無意義。2.當(dāng)根據(jù)小耳畸形殘耳軟剩余量的多少,Ⅰ型為一組,將Ⅱ型和Ⅲ型歸為一組,共分為兩組,成為二分類變量時(shí),采用二元logistics回歸分析。數(shù)據(jù)分析得出結(jié)果,居住地環(huán)境污染對(duì)不同畸形程度的小耳畸形的影響具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,即p0.05,exp(B)值0.531,說明環(huán)境污染對(duì)兩組間的致畸影響存在差異。而其他指標(biāo)仍無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.基于軟骨組織的GC-TOFMS代謝組學(xué)研究中,病例組(小耳畸形殘耳軟骨組織)18例,其中男性8例,源自右耳11例;對(duì)照組(正常耳軟骨組織)18例,其中男性11例,源自右耳11例。根據(jù)多維統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)小耳畸形患者的殘耳軟骨組織和正常耳形態(tài)人群的耳軟骨組織中的代謝產(chǎn)物具有差異。進(jìn)行單維統(tǒng)計(jì)分析驗(yàn)證后得出了 26個(gè)差異代謝物,其中14個(gè)差異代謝物具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,其p值0.05。相對(duì)于對(duì)照組,表達(dá)上調(diào)的差異代謝物有18種,表達(dá)下調(diào)者8種。根據(jù)代謝通路富集分析(MPEA)得出了與之最為相關(guān)的可能發(fā)生改變的5條代謝通路:精氨酸合成途徑、牛磺酸和亞�；撬岽x途徑、維生素B5和輔酶A合成途徑、β-丙氨酸合成途徑、甘油磷脂合成途徑。其中,前三條通路顯著相關(guān),其p值0.05。結(jié)論1.本研究得出圍孕期暴露于已發(fā)現(xiàn)的環(huán)境危險(xiǎn)因素時(shí),不同分型的小耳畸形間的致畸影響基本上無差別,即雖然環(huán)境危險(xiǎn)因素對(duì)小耳畸形的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)存在意義,但是畸形的嚴(yán)重程度與暴露在某種環(huán)境因素下并不相關(guān)。這一點(diǎn)應(yīng)加大樣本量進(jìn)行進(jìn)一步的驗(yàn)證。2.本研究從基于軟骨組織的非靶向代謝組學(xué)研究成功篩選出了表達(dá)異常的差異性代謝產(chǎn)物和相應(yīng)地發(fā)生改變的代謝通路,發(fā)現(xiàn)精氨酸、牛磺酸、L-半胱氨酸和泛酸的合成途徑和小耳畸形的發(fā)生可能存在關(guān)聯(lián)。我們因此推測(cè),先天性小耳畸形的發(fā)病機(jī)制有如下可能性:一是可能與膠原蛋白的含量和分布情況相關(guān),二是可能與胚胎時(shí)期發(fā)生了某種局部的炎癥反應(yīng)相關(guān),三是可能與妊娠期婦女圍孕期對(duì)維生素B5的補(bǔ)充量不足相關(guān)。本研究證明了從小分子水平上進(jìn)行代謝機(jī)制研究小耳畸形的發(fā)病機(jī)制是可行的,差異代謝物的發(fā)現(xiàn)為其早期干預(yù)提供了可能,需要靶向代謝組學(xué)的進(jìn)一步驗(yàn)證。
【圖文】：

．所有患者均為２０１７年６月至２０１８年１月來我院進(jìn)行手術(shù)治療的患者，且手術(shù)逡逑治療本身需要采集耳廓軟骨。其中，病例組（Ｂ組）１８例，對(duì)照組（Ａ組）１８例。逡逑研宄對(duì)象的一般信息具體見下表２－２。逡逑表２－２樣本的基本信息逡逑Ｔａｂｌｅ邋２－２邋Ｄｅｍｏｇｒａｐｈｉｃ邋Ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ邋ｏｆ邋Ｓｕｂｊｅｃｔｓ邋ｉｎ邋ｔｈｅ邋Ｓｔｕｄｙ逡逑基本信息邐病例組（Ｂ組）邐對(duì)照組（Ａ組）逡逑樣本數(shù)邐１８邐１８逡逑男性邐８邋（４４＿４４％）邐１１邋（６１．１１％）逡逑采集部位為右耳者邐１１邋（６１．１１％）邐１１邋（６１．１１％）逡逑２．樣本質(zhì)量控制逡逑從圖１的樣本質(zhì)量圖（Ｃｏｎｔｒｏｌ邋Ｃｈａｒｔ）可以看出，所有的樣本均通過樣本質(zhì)量控逡逑制，沒有發(fā)現(xiàn)異常的代謝譜（離群樣本＞３ＳＤ）。逡逑？邋ＱＣ邋＊邋Ｓａｍｐｌｅ逡逑

Ｆｉｇ邋２．邋Ｏｖｅｒｖｉｅｗ邋ｏｆ邋ｍｅｔａｂｏｌｉｃ邋ｐｒｏｆｉｌｅｓ邋ｏｆ邋ｅａｃｈ邋ｓｕｂｇｒｏｕｐ邋ｕｓｉｎｇ邋ＰＣＡ邋ｓｃｏｒｅｓ邋ｐｌｏｔ逡逑４．偏最小二乘法判別分析（ＰＬＳ－ＤＡ）結(jié)果逡逑使用ＰＬＳ－ＤＡ分析，可從圖３中明顯的看出，在二維（Ａ）和三維圖（Ｂ）中對(duì)逡逑照組與病例組之間的代謝譜的聚類情況。逡逑？邐９邐＾邐７邐？邐？邐０逡逑＼邋ｙ邐，，邐－ｓ逡逑—１°－邋，邋，0逡逑￣Ｔｏ邐０邐Ｔｏ邐２０邐＊１０邐－
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R764.9

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2669282