發(fā)布時(shí)間：2020-04-16 08:18

【摘要】：前言:阻塞性睡眠呼吸暫停綜合征(obstructive sleep apnea syndrome,OSAS)是一種由睡眠呼吸障礙引起低氧血癥,并導(dǎo)致一系列臨床癥狀的疾病,慢性間歇低氧(chronic intermittent hypoxia,CIH)是發(fā)病機(jī)制的關(guān)鍵。近年來(lái),我們發(fā)現(xiàn)此疾病的患病率居高不下,并可以引起其他系統(tǒng)的多種并發(fā)癥,其中以心血管疾病最多見(jiàn)。大量研究發(fā)現(xiàn),炎性反應(yīng)及氧化應(yīng)激反應(yīng)在OSAS合并高血壓的發(fā)生、發(fā)展中舉足輕重:間歇低氧(intermittenthypoxia,IH)刺激機(jī)體引發(fā)系統(tǒng)性炎癥、氧化應(yīng)激、內(nèi)皮功能損傷、經(jīng)常性覺(jué)醒導(dǎo)致的交感神經(jīng)激活等反應(yīng),從而導(dǎo)致高血壓。目前研究表明,OSAS患者的CIH合并高血壓的狀態(tài),會(huì)引起體內(nèi)炎性反應(yīng)、氧化應(yīng)激反應(yīng)的增強(qiáng),標(biāo)志炎癥因子及氧化應(yīng)激反應(yīng)的細(xì)胞因子如:IL-6、TNF-α CRP、NO、NOS等水平也隨之變化,但很少有研究關(guān)注不同人群其炎癥反應(yīng)及氧化應(yīng)激反應(yīng)的程度及相關(guān)因子的水平�？图胰耸菑V州地區(qū)具有代表性的原住居民,由于文化傳統(tǒng)及飲食習(xí)慣具有獨(dú)特性及地域性,對(duì)其與非客家人群炎性及氧化應(yīng)激指標(biāo)的研究可以反映相同地域罹患相同疾病的不同人群之間的差異。那么動(dòng)物實(shí)驗(yàn)不可或缺,本實(shí)驗(yàn)通過(guò)大鼠造模來(lái)模擬CIH誘發(fā)高血壓的過(guò)程,并通過(guò)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組大鼠體內(nèi)炎性因子和氧化應(yīng)激反應(yīng)部分標(biāo)志物的水平,來(lái)研究炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激反應(yīng)的程度;再以細(xì)胞水平進(jìn)一步研究,得出結(jié)論。第一部分阻塞性睡眠呼吸暫停合并高血壓炎癥反應(yīng)及氧化應(yīng)激反應(yīng)變化的研究研究背景與研究目的:隨著醫(yī)學(xué)的發(fā)展,有研究發(fā)現(xiàn)近年來(lái)OSAS合并高血壓的患病率高于往年。目前很少針對(duì)罹患OSAS合并高血壓的不同人群的炎癥反應(yīng)及氧化應(yīng)激反應(yīng)進(jìn)行相關(guān)研究,鑒于客家人有較為獨(dú)特的生活和飲食習(xí)慣,具有地域代表性,可以反映相同地域罹患相同疾病的不同人群之間的差異。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)客家與非客家人群的臨床資料、炎性因子、氧化應(yīng)激因子的比較,探討不同人群合并高血壓的OSAS患者的炎癥反應(yīng)及氧化應(yīng)激反應(yīng)的差異性。通過(guò)對(duì)炎性因子水平的監(jiān)測(cè)就可以為評(píng)估患者病情嚴(yán)重程度和預(yù)后提供有效途徑;為OSAS合并高血壓的預(yù)防、治療提供理論依據(jù)。研究方法:應(yīng)用ELISA方法對(duì)客家人與非客家人群合并高血壓的OSAS患者血清中IL-6、TNF-α、CRP及NO、NOS水平進(jìn)行檢測(cè),通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)方法得出結(jié)果、結(jié)論。結(jié)果:非客家人群患者的平均SAP相對(duì)高于客家人群患者,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);而DAP、MAP和HR的平均水平與客家人群組沒(méi)有明顯的差異;從炎性反應(yīng)和氧化應(yīng)激反應(yīng)方面分析,非客家人群患者的IL-6和TNF-α的平均血清水平相對(duì)高于客家人群患者,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);而CRP的平均血清水平略高于客家人群患者,差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;非客家人群患者的血清NO平均水平明顯低于客家人群,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);而血清NOS平均水平略低于客家人群,但是差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:在非客家人群中,患有OSAS合并高血壓的患者,其SAP相對(duì)較高,而客家人群OSAS合并高血壓患者的SAP相對(duì)較低,這可能與客家人健康的生活方式及獨(dú)特的飲食文化有關(guān)。炎癥因子水平和代表氧化應(yīng)激水平指標(biāo)的高低,直接反映機(jī)體炎癥及氧化應(yīng)激反應(yīng)嚴(yán)重程度,這就表明,非客家人群患者罹患OSAS合并高血壓時(shí),體內(nèi)誘發(fā)的炎性反應(yīng)和氧化應(yīng)激反應(yīng)相對(duì)比客家人群患者更為嚴(yán)重。但兩種反應(yīng)與細(xì)胞因子之間的相關(guān)性如何,需要第二部分實(shí)驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證。第二部分慢性間歇低氧誘導(dǎo)大鼠高血壓與炎性反應(yīng)、氧化應(yīng)激反應(yīng)的關(guān)系研究研究背景與研究目的:OSAS患者的CIH狀態(tài)可以通過(guò)誘發(fā)體內(nèi)炎癥、氧化應(yīng)激、內(nèi)皮功能損傷等使患者同時(shí)罹患高血壓,故炎癥反應(yīng)及氧化應(yīng)激反應(yīng)也會(huì)較正常對(duì)照組人群增強(qiáng)。兩種反應(yīng)與細(xì)胞因子之間的相關(guān)性也是本實(shí)驗(yàn)研究的一個(gè)方面。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)不可或缺。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)動(dòng)物模型的構(gòu)建,檢測(cè)大鼠的血壓、心率、炎癥因子、氧化應(yīng)激反應(yīng)因子的水平,來(lái)探討CIH誘導(dǎo)后大鼠以上指標(biāo)水平的變化、炎性反應(yīng)的嚴(yán)重程度與炎癥因子水平的相關(guān)性和氧化應(yīng)激反應(yīng)程度與氧化應(yīng)激相關(guān)因子水平的相關(guān)性,為臨床研究OSAS合并高血壓發(fā)生機(jī)制提供理論依據(jù)。研究方法:建立大鼠CIH誘導(dǎo)高血壓模型,應(yīng)用ELISA方法對(duì)CIH組和對(duì)照組大鼠血清中IL-6、TNF-α、CRP及NO、NOS水平進(jìn)行檢測(cè),通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)方法得出結(jié)果、結(jié)論。結(jié)果:CIH組的大鼠的心率、血壓、體內(nèi)的炎性因子IL-6、TNF-α和CRP的水平較對(duì)照組明顯升高;差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);而體重增長(zhǎng)速度、氧化應(yīng)激反應(yīng)相關(guān)因子NO和NOS的水平較對(duì)照組降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);CIH誘導(dǎo)的大鼠體內(nèi)IL-6、TNF-α和CRP水平與血壓、心率呈正相關(guān),而NO、NOS與血壓、心率呈負(fù)相關(guān)。結(jié)論:CIH的誘導(dǎo)能夠減緩大鼠體重的增長(zhǎng)速度,可以誘導(dǎo)大鼠罹患高血壓,引起大鼠體內(nèi)炎性反應(yīng)和氧化應(yīng)激反應(yīng)的增加。炎性反應(yīng)與炎性因子呈正相關(guān),氧化應(yīng)激反應(yīng)與NO、NOS水平呈負(fù)相關(guān),并且大鼠體內(nèi)炎性反應(yīng)和氧化應(yīng)激反應(yīng)會(huì)隨著病程的延長(zhǎng)而逐漸加重。第三部分慢性間歇低氧誘導(dǎo)高血壓大鼠淋巴細(xì)胞炎癥與氧化應(yīng)激水平的變化研究背景與研究目的:OSAS與心血管疾病密切相關(guān),同時(shí)OSAS是心血管疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。由文獻(xiàn)中得知淋巴細(xì)胞與機(jī)體的多種免疫應(yīng)激反應(yīng)相關(guān)。在以往的動(dòng)物試驗(yàn)中,也證實(shí)了高血壓大鼠存在大量淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞的激活。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)分離CIH誘導(dǎo)高血壓大鼠和對(duì)照組大鼠的淋巴細(xì)胞,并檢測(cè)對(duì)比淋巴細(xì)胞內(nèi)IL-6、TNF-α、CRP、NO和iNOS水平的變化,來(lái)探討CIH誘導(dǎo)高血壓對(duì)大鼠淋巴細(xì)胞炎性反應(yīng)和氧化應(yīng)激反應(yīng)水平的影響。研究方法:從在第二部分已經(jīng)成功建立的CIH誘導(dǎo)高血壓的大鼠模型上提取淋巴細(xì)胞,用WB方法對(duì)細(xì)胞中IL-6、TNF-α、CRP及NO、iNOS水平進(jìn)行檢測(cè),通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)方法得出結(jié)果、結(jié)論。結(jié)果:CIH組大鼠淋巴細(xì)胞的活力、純度普遍底于對(duì)照組,而凋亡度明顯高于對(duì)照組;CIH合并高血壓組大鼠淋巴細(xì)胞的IL-6、TNF-α、CRP、NO及iNOS的水平都明顯高于對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:CIH狀態(tài)不僅能誘導(dǎo)大鼠罹患高血壓,也能夠降低淋巴細(xì)胞的活力、純度,并能提高CIH組淋巴細(xì)胞的凋亡度;CIH誘導(dǎo)可以加重淋巴細(xì)胞內(nèi)炎癥反應(yīng)的強(qiáng)度和氧化應(yīng)激反應(yīng)的強(qiáng)度。第四部分慢性間歇低氧誘導(dǎo)高血壓大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞炎癥與氧化應(yīng)激水平的變化及與淋巴細(xì)胞炎癥與氧化應(yīng)激的相關(guān)作用研究背景與研究目的:CIH的誘導(dǎo)能夠促進(jìn)OSAS患者血管內(nèi)皮細(xì)胞與炎癥細(xì)胞相互作用,血管內(nèi)皮細(xì)胞是炎性相關(guān)因子的靶細(xì)胞,同時(shí)也是淋巴細(xì)胞毒性攻擊的靶細(xì)胞,通過(guò)檢測(cè)CIH誘導(dǎo)高血壓大鼠的血管內(nèi)皮細(xì)胞中IL-6、TNF-α、CRP、及NO、iNOS、eNOS的水平,探討CIH條件下,血管內(nèi)皮細(xì)胞中的炎性反應(yīng)和氧化應(yīng)激反應(yīng)的程度;通過(guò)大鼠的淋巴細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞共培養(yǎng),探討淋巴細(xì)胞對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的炎性反應(yīng)和氧化應(yīng)激反應(yīng)程度的影響。研究方法:對(duì)由第二部分對(duì)照組大鼠身上提取得來(lái)的淋巴細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞,進(jìn)行不同時(shí)間的CIH誘導(dǎo),先用WB方法測(cè)定CIH誘導(dǎo)下內(nèi)皮細(xì)胞中的IL-6、TNF-α、CRP及NO、iNOS、eNOS水平;再與常氧下淋巴細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行共培養(yǎng),用ELISA方法對(duì)培養(yǎng)液中的IL-6、TNF-α、CRP及NO、iNOS、eNOS水平進(jìn)行檢測(cè),通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)方法得出結(jié)果、結(jié)論。結(jié)果:當(dāng)大鼠內(nèi)皮細(xì)胞處于CIH環(huán)境中時(shí),細(xì)胞內(nèi)的炎性相關(guān)因子IL-6、TNF-α和CRP、iNOS水平會(huì)上升,NO、eNOS呈現(xiàn)下降的趨勢(shì)；當(dāng)CIH大鼠的淋巴細(xì)胞與CIH大鼠內(nèi)皮細(xì)胞共培養(yǎng)時(shí),共培養(yǎng)上清中的炎性反應(yīng)相關(guān)因子IL-6、TNF-α和CRP均有所升高,而氧化應(yīng)激反應(yīng)相關(guān)因子NO和NOS水平則有所降低。結(jié)論:CIH誘導(dǎo)高血壓大鼠內(nèi)皮細(xì)胞的炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激反應(yīng)程度上升,CIH誘導(dǎo)下大鼠的淋巴細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞的炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激反應(yīng)會(huì)產(chǎn)生相互影響。
【圖文】：

３．結(jié)果逡逑３．１客家人和非客家與對(duì)照組人群的臨床資料分析逡逑表１和圖１數(shù)據(jù)結(jié)果顯示了客家和非客家人群的ＯＳＡＳ合并高血壓患者及對(duì)逡逑照組的臨床數(shù)據(jù)對(duì)比。逡逑結(jié)果顯示：實(shí)驗(yàn)組人群與對(duì)照組的平均年齡無(wú)顯著差異；實(shí)驗(yàn)組非客家人群逡逑患者的平均年齡低于客家人群，非客家人群患者的男性比例稍高于客家人群且有逡逑ＩＩ型糖尿病史的患者也稍高于客家人群，以上指標(biāo)Ｐ＜0．0５，有顯著性差異；非逡逑客家人群中有吸煙史的患者稍低于客家人群，但是差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。逡逑３．２客家和非客家與對(duì)照組人群的心率、血壓的數(shù)據(jù)分析逡逑表１和圖１數(shù)據(jù)結(jié)果顯示了客家和非客家人群的ＯＳＡＳ合并高血壓患者及對(duì)逡逑照組的血流動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)對(duì)比。逡逑在實(shí)驗(yàn)組中，非客家人群患者的平均ＳＡＰ相對(duì)高于客家人群，差異具有統(tǒng)逡逑計(jì)學(xué)意義（Ｐ＜0．0５）；而ＤＡＰ、ＭＡＰ和ＨＲ的平均水平與客家人群組沒(méi)有明顯逡逑的差異。這些結(jié)果說(shuō)明，在非客家人群中，患有ＯＳＡＳ合并高血壓的患者，其逡逑ＳＡＰ升高的程度較客家人群ＯＳＡＳ合并高血壓患者嚴(yán)重。逡逑３．３客家和非客家與對(duì)照組人群的炎性因子水平分析逡逑表１和圖１的數(shù)據(jù)結(jié)果顯示了實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組血清ＩＬ－６、ＴＮＦ－ａ和ＣＲＰ水逡逑平。逡逑在實(shí)驗(yàn)組人群中，非客家人群患者的ＩＬ＊６和ＴＮＦ－ａ的平均血清水平相對(duì)高逡逑于客家人群患者，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Ｐ＜0．0５）；而ＣＲＰ的平均血清水平略逡逑高月客家人群患者

逡逑經(jīng)過(guò)分離的大鼠淋巴細(xì)胞的狀態(tài)如圖５。圖５－Ａ為１００倍鏡下健康大鼠的淋逡逑巴細(xì)胞；圖５－Ｂ為１００倍鏡下ＣＩＨ大鼠的淋巴細(xì)胞。從圖中對(duì)比可知，健康大逡逑鼠的淋巴細(xì)胞（圖５－Ａ）呈現(xiàn)透亮的梭型，僅少數(shù)細(xì)胞呈現(xiàn)圓形；而ＣＩＨ大鼠的逡逑淋巴細(xì)胞（圖５－Ｂ）少部分呈現(xiàn)透亮的梭型，大部分細(xì)胞呈現(xiàn)圓形，并開(kāi)始走向逡逑凋亡。這個(gè)現(xiàn)象說(shuō)明，ＣＩＨ誘導(dǎo)合并高血壓的大鼠，其淋巴細(xì)胞受到影響，出現(xiàn)逡逑凋亡的現(xiàn)象，提示ＣＩＨ合并高血壓能夠誘導(dǎo)大鼠淋巴細(xì)胞凋亡，因此我們進(jìn)行逡逑了淋巴細(xì)胞的活力、純度和凋亡率檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。逡逑ＢＩＢＢＢ逡逑Ａ．邋Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ邋ｏｔ邋ｒａｔ邋ｉｎ邋Ｃｏｎｔｒｏｌ邋ｇｒｏｕｐ（ｌＯＯＸ）邐Ｂ．邋Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ邋ｏｔ邋ｒａｔ邋ｉｎ邋ＣＩＨ邋ｇｒｏｕｐ（Ｋ）ＯＸ）逡逑圖５．對(duì)照組和ＣＩＨ合并高血壓大鼠的淋巴細(xì)胞逡逑（Ａ．對(duì)照組大鼠的淋巴細(xì)胞（１０0ｘ）邋；邋Ｂ．ＣＩＨ組大鼠的淋巴細(xì)胞（１０0ｘ）邋；邋ＣＩＨ，逡逑ｃｈｒｏｎｉｃ邋ｉｎｔｅｒｍｉｔｔｅｎｔ邋ｈｙｐｏｘｉａ，，慢性間歇低氧）逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋５．邋Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ邋ｏｆ邋ｒａｔ邋ｉｎ邋Ｃｏｎｔｒｏｌ邋ｇｒｏｕｐ邋ｏｒ邋ＣＩＨ邋＆邋ＨＴＮ邋ｇｒｏｕｐ逡逑（Ａ．邋Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ邋ｏｆ邋ｒａｔ邋ｉｎ邋Ｃｏｎｔｒｏｌ邋ｇｒｏｕｐ邋（１０0ｘ）；邋Ｂ．邋Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ邋ｏｆ邋ｒａｔ邋ｉｎ邋ＣＩＨ逡逑ｇｒｏｕｐ邋（１０0ｘ）；邋ＣＩＨ
【學(xué)位授予單位】：武漢大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：R766;R544.1

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前8條

1 陳源漢;李志蓮;史偉;;從慢性腎臟病飲食管理角度看廣東客家人飲食習(xí)俗[J];廣東醫(yī)學(xué);2015年12期

2 Izolde Bouloukaki;Charalampos Mermigkis;Eleftherios M Kallergis;Violeta Moniaki;Eleni Mauroudi;Sophia E Schiza;;Obstructive sleep apnea syndrome and cardiovascular disease: The influence of C-reactive protein[J];World Journal of Experimental Medicine;2015年02期

3 詹堅(jiān)固;;廣東客家人分布狀況及其對(duì)客家文化發(fā)展的影響[J];探求;2012年04期

4 李業(yè)梅;俞小衛(wèi);王韜;;OSAS合并高血壓患者IL-6及IL-8水平的研究[J];臨床肺科雜志;2012年02期

5 葉亮;李慶云;李敏;;慢性間歇低氧與交感神經(jīng)異常興奮的研究進(jìn)展[J];中國(guó)呼吸與危重監(jiān)護(hù)雜志;2009年06期

6 趙海燕;陳寶元;曹潔;馮靖;郭美南;;阻塞性睡眠呼吸暫停模式間歇低氧對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中內(nèi)皮素-1、一氧化氮及一氧化氮合酶的影響[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2007年31期

7 孔強(qiáng);;山珍咸香的客家飲食[J];東方食療與保健;2006年06期

8 吳松弟;客家南宋源流說(shuō)[J];復(fù)旦學(xué)報(bào)(社會(huì)科學(xué)版);1995年05期

本文編號(hào)：2629580