【摘要】：目的:膜迷路積水是梅尼埃病的病理基礎(chǔ),能由醛固酮誘導(dǎo)產(chǎn)生,但其機(jī)制尚不清楚。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)研究組蛋白H3K79甲基化轉(zhuǎn)移酶Dot1l在豚鼠耳蝸中的表達(dá)模式及醛固酮對(duì)Dot1l在豚鼠耳蝸中表達(dá)的調(diào)控,探討Dot1l在膜迷路積水中的作用及機(jī)理,以期為梅尼埃病發(fā)病機(jī)制和治療的研究提供新的線索。方法:將6只經(jīng)ABR檢測(cè)聽(tīng)力正常的豚鼠耳蝸切片,以免疫組織化學(xué)(IHC)檢測(cè)Dot1l在豚鼠耳蝸中的表達(dá)模式。將28只經(jīng)ABR檢測(cè)聽(tīng)力正常的豚鼠隨機(jī)分為對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組。實(shí)驗(yàn)組豚鼠腹腔注射醛固酮(1mg.kg-1.d-1),對(duì)照組腹腔注射生理鹽水20ul,各7天。1月后再次以ABR檢測(cè)兩組豚鼠聽(tīng)閾后處死,應(yīng)用HE染色檢測(cè)豚鼠耳蝸形態(tài)學(xué),以免疫組織化學(xué)(IHC)、Western blot檢測(cè)Dot1l表達(dá)。結(jié)果:Dot1l表達(dá)于正常豚鼠耳蝸的血管紋、螺旋韌帶、前庭膜、螺旋神經(jīng)節(jié)、Corti器、螺旋緣、外螺旋溝根細(xì)胞,在螺旋韌帶的表達(dá)由底轉(zhuǎn)向頂轉(zhuǎn)減少(P0.01),在螺旋神經(jīng)節(jié)中的表達(dá)由底轉(zhuǎn)向頂轉(zhuǎn)逐漸增多(P0.05)。醛固酮作用后實(shí)驗(yàn)組聽(tīng)閾(18.57±6.02dBSPL)與對(duì)照組(20.71±4.74dBSPL)差異不具有顯著性(P0.05)。實(shí)驗(yàn)組豚鼠耳蝸膜迷路積水率達(dá)到75%,對(duì)照組未觀察到內(nèi)淋巴積水。Western blot顯示實(shí)驗(yàn)組耳蝸Dot1l表達(dá)明顯低于對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。IHC顯示醛固酮降低Dot11在血管紋、前庭膜、螺旋緣、柯蒂器、螺旋韌帶等部位的表達(dá)。結(jié)論:豚鼠耳蝸中存在組蛋白H3K79甲基化轉(zhuǎn)移酶Dot11。醛固酮可能通過(guò)抑制其表達(dá)引起膜迷路積水。
【圖文】：

按前庭膜向前庭階膨隆程度可將膜迷路積水分為輕、中、重度。正常豚鼠切逡逑片發(fā)現(xiàn)前庭膜未向前庭階膨隆，蝸管面積由頂轉(zhuǎn)到底轉(zhuǎn)逐漸變�。▓D１）。造模完逡逑成后，對(duì)照組豚鼠耳蝸底轉(zhuǎn)未見(jiàn)積水形成（圖２ａ），實(shí)驗(yàn)組取１２只耳蝸進(jìn)行觀察，逡逑有９只出現(xiàn)輕度積水（圖２ｂ），主要表現(xiàn)在底轉(zhuǎn)，造模成功率７５％。逡逑ｍｍ逡逑圖１正常豚鼠耳蝸切片ＨＥ染色逡逑Ｆｉｇ．邋１．邋Ｔｈｅ邋Ｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ－Ｅｏｓｉｎ邋ｓｔａｉｎｉｎｇ邋ｏｆ邋ｎｏｒｍａｌ邋ｇｕｉｎｅａ邋ｐｉｇ邋ｃｏｃｈｌｃａｓ邋ｓｅｃｔｉｏｎｓ（邋ＨＥ邋ｘｌＯＯ）逡逑ｍｌ逡逑圖２豚鼠耳蝸ＨＥ染色（ａ：對(duì)照組ｂ：實(shí)驗(yàn)組ＨＥ邋ｘｉ00）逡逑Ｆｉｇ．邋２．邋Ｔｈｅ邋Ｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ－Ｅｏｓｉｎ邋ｓｔａｉｎｉｎｇ邋ｏｆ邋ｇｕｉｎｅａ邋ｐｉｇ邋ｃｏｃｈｌｅａｓ邋ｓｅｃｔｉｏｎｓ（ａ：邋ｃｏｎｔｒｏｌ邋ｇｒｏｕｐ邋ｂ：逡逑ｔｒｅａｔｍｅｎｔ邋ｇｒｏｕｐ邋ＨＥｘｌ00）逡逑１４逡逑

２．３耳蝸形態(tài)學(xué)檢測(cè)結(jié)果（ＨＥ染色）逡逑按前庭膜向前庭階膨隆程度可將膜迷路積水分為輕、中、重度。正常豚鼠切逡逑片發(fā)現(xiàn)前庭膜未向前庭階膨隆，蝸管面積由頂轉(zhuǎn)到底轉(zhuǎn)逐漸變�。▓D１）。造模完逡逑成后，，對(duì)照組豚鼠耳蝸底轉(zhuǎn)未見(jiàn)積水形成（圖２ａ），實(shí)驗(yàn)組�。保仓欢佭M(jìn)行觀察，逡逑有９只出現(xiàn)輕度積水（圖２ｂ），主要表現(xiàn)在底轉(zhuǎn)，造模成功率７５％。逡逑ｍｍ逡逑圖１正常豚鼠耳蝸切片ＨＥ染色逡逑Ｆｉｇ．邋１．邋Ｔｈｅ邋Ｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ－Ｅｏｓｉｎ邋ｓｔａｉｎｉｎｇ邋ｏｆ邋ｎｏｒｍａｌ邋ｇｕｉｎｅａ邋ｐｉｇ邋ｃｏｃｈｌｃａｓ邋ｓｅｃｔｉｏｎｓ（邋ＨＥ邋ｘｌＯＯ）逡逑ｍｌ逡逑圖２豚鼠耳蝸ＨＥ染色（ａ：對(duì)照組ｂ：實(shí)驗(yàn)組ＨＥ邋ｘｉ00）逡逑Ｆｉｇ．邋２．邋Ｔｈｅ邋Ｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ－Ｅｏｓｉｎ邋ｓｔａｉｎｉｎｇ邋ｏｆ邋ｇｕｉｎｅａ邋ｐｉｇ邋ｃｏｃｈｌｅａｓ邋ｓｅｃｔｉｏｎｓ（ａ：邋ｃｏｎｔｒｏｌ邋ｇｒｏｕｐ邋ｂ：逡逑ｔｒｅａｔｍｅｎｔ邋ｇｒｏｕｐ邋ＨＥｘｌ00）逡逑１４逡逑
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R764

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 蔣子棟;高帆;孫程成;;不同方法構(gòu)建豚鼠膜迷路積水模型的對(duì)比研究[J];中華耳科學(xué)雜志;2015年04期

2 許慶慶;郭維維;翟所強(qiáng);楊仕明;;耳蝸血管紋細(xì)胞離子轉(zhuǎn)運(yùn)的研究進(jìn)展[J];中華耳科學(xué)雜志;2015年01期

3 溫雅;鐘時(shí)勛;;去氨加壓素對(duì)耳蝸功能及上皮鈉通道表達(dá)的調(diào)節(jié)作用[J];中華耳科學(xué)雜志;2014年03期

4 蔣子棟,張連山;醛固酮誘發(fā)豚鼠雙耳膜迷路積水[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào);2002年05期

本文編號(hào)：2626400