【摘要】：目的:研究micro RNA142(miR-142)在體外細胞中如何影響其表達,分析驗證AKT2與miR-142之間的關(guān)系,實驗研究其與角膜血管新生的關(guān)系,初步找到相關(guān)基礎(chǔ)機制。方法:本研究設(shè)置空白對照組、陰性對照組、過表達miR-142組以及干擾miR-142組。分別利用miR-142模擬物(mimic)和抑制物(inhibitor)過表達和干擾miR-142;CCK-8增殖實驗檢測miR-142對HUVECs增殖能力的影響;雙熒光素酶報告基因驗證AKT2是否為miR-142的直接靶基因;qPCR和Western blot實驗檢測miR-142對AKT2表達水平的影響。結(jié)果:CCK-8增殖實驗結(jié)果顯示空白對照組、陰性對照組和過表達miR-142組在96h的吸光度均值分別為872.21±44.20、842.16±49.54和1407.91±16.58,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(F=102.8,P=0.000);干擾miR-142后HUVECs增殖能力明顯減弱(空白對照組=919.69±25.46,陰性對照組=856.76±36.22,干擾miR-142組=602.77±25.62;F=72.8,P=0.000);雙熒光素酶報告基因結(jié)果發(fā)現(xiàn)過表達miR-142后AKT2表達水平?jīng)]有明顯變化(對照組=0.36,過表達miR-142組=0.46,P=0.147);qPCR結(jié)果顯示過表達miR-142(0.408±0.046)后AKT2表達水平較陰性對照組(0.173±0.022)升高(P=0.018),干擾miR-142組(0.16±0.02)較陰性對照組(0.362±0.068)明顯降低(P=0.037),差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義;Western blot實驗進一步驗證了miR-142對AKT2基因的調(diào)控作用;進一步研究發(fā)現(xiàn),shRNA干擾AKT2后miR-142促進HUVECs增殖的作用消失,對照組、過表達miR-142組、過表達miR-142+sh RNA-AKT2組和shRNA-AKT2組的96 h吸光度值分別為981.80±75.40、1357.81±47.56、806.39±49.70和921.59±40.38,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(F=40.97,P=0.000)。結(jié)論:miR-142通過上調(diào)AKT2的表達促進HUVECs增殖,從而促進角膜血管新生。
【圖文】：

miR-142促進HUVECs增殖
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R772.2

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9 徐t，

本文編號：2615139