【摘要】：目的:探討姜黃素(curcumin)對(duì)脂多糖(LPS)誘導(dǎo)視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞(RPE)炎癥反應(yīng)的抑制作用。方法:體外培養(yǎng)人RPE細(xì)胞株ARPE-19,CCK-8測定不同濃度姜黃素(5、10、20、30、40μmol/L)或不同濃度姜黃素和脂多糖(5μg/mL)刺激后細(xì)胞的活性,以此確定姜黃素的最適作用濃度。實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(qPCR)檢測白細(xì)胞介素-8(IL-8)和白細(xì)胞介素-6(IL-6)的mRNA表達(dá)變化,酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)測定IL-6和IL-8的蛋白表達(dá)水平,蛋白質(zhì)免疫印跡(WB)檢測IκB-α、p-IκB-α蛋白表達(dá)變化。結(jié)果:CCK-8:不同濃度姜黃素對(duì)ARPE-19細(xì)胞活性無影響,預(yù)先作用不同濃度的姜黃素對(duì)細(xì)胞活性有保護(hù)作用,20μmol/L保護(hù)作用明顯;qPCR:姜黃素預(yù)處理明顯降低了IL-6和IL-8的mRNA表達(dá)水平;ELISA:姜黃素預(yù)處理明顯降低了IL-6和IL-8蛋白表達(dá)水平;WB:姜黃素預(yù)處理后p-IκB-α蛋白的表達(dá)水平降低。結(jié)論:姜黃素通過抑制NF-κB活性抑制了脂多糖誘導(dǎo)視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞的炎癥反應(yīng),保護(hù)視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞,為視網(wǎng)膜炎癥引起的眼科疾病提供更多的防治策略。
【圖文】：

CCK-8檢測細(xì)胞活性

圖 2. qPCR 檢測姜黃素對(duì) LPS 誘導(dǎo) ARPE-19 細(xì)胞中 IL-6 和 IL-8 的 mRNA 表達(dá)水平的影響。(*p<0.05, **p<0.01, ***p<0.001)。Fig2. qPCR measured the effect of curcumin on IL-8 and IL-6 mRNAexpression level inLPS-stimulatedARPE-19 cells. (*p<0.05, **p<0.01, ***p<0.001).
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R587.2;R774.1

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本文編號(hào)：2606055