發(fā)布時(shí)間：2017-03-20 19:06

  本文關(guān)鍵詞：10個(gè)先天性眼球震顫家系致病基因研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的先天性眼球震顫(Congenital Nystagmus,CN)具有遺傳異質(zhì)性,可表現(xiàn)為常染色體顯性、常染色體隱性和X連鎖三種遺傳模式。目前為止,位于Xq26.2的FRMD7基因是唯一發(fā)現(xiàn)與X連鎖先天性特發(fā)性眼球震顫(Congenital Idiopathic Nystagmus,CIN)有關(guān)的致病基因。本研究對(duì)10個(gè)CN家系和5名散發(fā)患者進(jìn)行FRMD7基因直接測序,旨在篩查患者的致病性突變,分析FRMD7基因突變對(duì)蛋白結(jié)構(gòu)和功能造成的影響,構(gòu)建攜有FRMD7基因突變的永生化細(xì)胞系以利致病基因的功能研究。方法1、收集2013年6月至2014年6月于天津市眼科醫(yī)院斜視與小兒眼科就診的CN家系和散發(fā)患者,對(duì)CN患者及其直系親屬進(jìn)行臨床表型分析。2、從患者及正常人的外周血中提取基因組DNA,使用PCR儀擴(kuò)增FRMD7基因的12個(gè)外顯子片段,純化和回收目的片段后,應(yīng)用ABI 3130-avant全自動(dòng)遺傳分析儀進(jìn)行FRMD7基因篩查,DNAstar 5.01軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。3、分析FRMD7基因新發(fā)現(xiàn)的突變對(duì)蛋白的影響,應(yīng)用生物醫(yī)學(xué)軟件預(yù)測HSF剪切突變對(duì)FRMD7蛋白結(jié)構(gòu)和功能的破壞程度。4、建立攜有FRMD7基因突變的細(xì)胞系:使用淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化法建立永生化B淋巴細(xì)胞系;DispaseⅡ酶消化法建立皮膚成纖維細(xì)胞系。結(jié)果1、本研究共篩查出6個(gè)FRMD7基因突變,分別為c.57+2TC、c.58-3TA、c.685CT、c.910CT、c.980_983del ATTAc.986CA、c.1860_1861del AG,而在100例正常人的FRMD7基因中未發(fā)現(xiàn)相同改變。2、c.57+2TC、c.58-3TA、c.1860_1861del AG是新發(fā)現(xiàn)的FRMD7基因突變:c.1860_1861del AG可能生成一個(gè)含有647個(gè)氨基酸的截短蛋白;應(yīng)用Human Splicing Finder-version 2.4.1軟件預(yù)測c.57+2TC可以造成野生型FRMD7基因剪切位點(diǎn)破壞,而58-3TA對(duì)FRMD7基因剪切影響很小。3、本研究中含有FRMD7基因突變的患者眼球震顫多表現(xiàn)為水平?jīng)_動(dòng)型,均不伴有異常眼位,3/6的患者伴有代償頭位;不含有FRMD7基因突變的患者,眼球震顫除水平外可合并垂直和旋轉(zhuǎn)成分,沖動(dòng)型和擺動(dòng)型均有,部分患者表現(xiàn)有點(diǎn)頭痙攣,3/9伴有異常眼位,4/9的患者伴有代償頭位,2/9眼位和頭位均正常。4、本研究中所有的患者均伴有不同程度的視力下降,合并有屈光不正和弱視;含有相同F(xiàn)RMD7基因突變的患者臨床表型存在差異。5、成功建立含有FRMD7基因突變的永生化B淋巴細(xì)胞系和皮膚成纖維細(xì)胞系,可無限傳代用于提取基因組DNA和研究FRMD7基因功能。結(jié)論1、5個(gè)CN家系和1名散發(fā)患者篩查出FRMD7基因突變,共6個(gè)基因突變,其中包括3個(gè)新突變和3個(gè)已知突變,對(duì)擴(kuò)充FRMD7基因突變譜系、探索FRMD7導(dǎo)致XL-CIN發(fā)生的致病機(jī)制具有重要研究價(jià)值。2、FRMD7基因不同突變?cè)斐傻谋磉_(dá)缺陷直接與臨床表型相關(guān)。含有相同F(xiàn)RMD7基因突變的CN患者,無論祖先來源是否相同,臨床表型均存在差異。對(duì)攜有FRMD7基因突變的CN患者來說,基因型和臨床表型的關(guān)系不能確定,仍需要大樣本的臨床資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。3、5個(gè)CN家系和4名散發(fā)患者未篩查出FRMD7基因突變,患者臨床表型較含有FRMD7基因突變的患者復(fù)雜,這些患者的遺傳性致病基因仍有待于研究。4、成功為含有FRMD7基因新突變和未篩查出FRMD7基因突變的CN家系及散發(fā)患者構(gòu)建永生化細(xì)胞系,為進(jìn)一步研究FRMD7基因功能和發(fā)現(xiàn)新的CN致病基因奠定物質(zhì)基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：先天性眼球震顫 FRMD7基因 突變篩查 永生化B淋巴細(xì)胞系 皮膚成纖維細(xì)胞 原代培養(yǎng)
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R77
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-11
• 縮略語11-12
• 前言12-14
• 研究現(xiàn)狀、成果12-13
• 研究目的、方法13-14
• 一、X連鎖先天性眼球震顫患者致病基因研究14-27
• 1.1 對(duì)象和方法14-19
• 1.1.1 研究對(duì)象14-15
• 1.1.2 儀器設(shè)備及試劑耗材15-16
• 1.1.3 基因組DNA提取16-17
• 1.1.4 FRMD7基因的突變篩查17-18
• 1.1.5 DNA測序分析18-19
• 1.2 結(jié)果19-23
• 1.2.1 FRMD7基因突變篩查結(jié)果19-20
• 1.2.2 預(yù)測新發(fā)現(xiàn)的FRMD7基因突變20-21
• 1.2.3 FRMD7基因突變患者的臨床表型21-23
• 1.3 討論23-26
• 1.3.1 與CN有關(guān)的遺傳位點(diǎn)23-24
• 1.3.2 FRMD7基因突變匯總24-25
• 1.3.3 含有FRMD7基因突變患者基因型與臨床表型25-26
• 1.4 小結(jié)26-27
• 二、建立含有先天性眼球震顫致病性突變的永生化細(xì)胞系27-34
• 2.1.材料與方法27-29
• 2.1.1 材料27
• 2.1.2 儀器設(shè)備及試劑耗材27-28
• 2.1.3 永生化B淋巴細(xì)胞系建立方法28-29
• 2.1.4 皮膚成纖維細(xì)胞系建立方法29
• 2.2 結(jié)果29-31
• 2.2.1 永生化B淋巴細(xì)胞系29-30
• 2.2.2 皮膚成纖維細(xì)胞系30-31
• 2.3 討論31-33
• 2.3.1 建系原理31-32
• 2.3.2 建系成功的技術(shù)要點(diǎn)及復(fù)蘇注意事項(xiàng)32
• 2.3.3 建系意義32-33
• 2.4 小結(jié)33-34
• 結(jié)論34-35
• 參考文獻(xiàn)35-40
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明40-41
• 附錄41-48
• 綜述48-56
• 綜述參考文獻(xiàn)52-56
• 致謝56

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉志蓉;先天性眼球震顫的遺傳方式及其基因定位[J];國外醫(yī)學(xué)(神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)分冊(cè));2003年03期

2 謝繼峰;先天性眼球震顫1家系[J];中國中醫(yī)眼科雜志;2003年01期

3 梁劍虹;先天性眼球震顫一家系[J];眼科研究;2005年03期

4 叢日昌,林寧寧;X鏈顯性遺傳先天性眼球震顫一家系[J];眼科新進(jìn)展;2005年05期

5 姜嚴(yán)明;張樂;竇宏亮;;常染色體顯性遺傳先天性眼球震顫一家系[J];眼科;2006年06期

6 李娜;王曉莉;;三棱鏡在先天性眼球震顫的應(yīng)用[J];四川醫(yī)學(xué);2007年02期

7 王永強(qiáng);嚴(yán)宏;;先天性眼球震顫二家系[J];國際眼科雜志;2007年02期

8 焦貴昕;;先天性眼球震顫合并斜視的臨床分析[J];中國當(dāng)代醫(yī)藥;2011年07期

9 陳正躍;先天性眼球震顫的新療法[J];眼科新進(jìn)展;1981年02期

10 楊景存;先天性眼球震顫的手術(shù)治療[J];眼外傷與職業(yè)性眼病雜志.附眼科手術(shù);1986年04期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 王永強(qiáng);嚴(yán)宏;;先天性眼球震顫二家系[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二屆全國眼科學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2007年

2 詹雪梅;;手術(shù)治療兒童先天性眼球震顫的護(hù)理體會(huì)[A];全國五官科護(hù)理學(xué)術(shù)交流暨專題講座會(huì)議論文匯編[C];2010年

3 詹雪梅;;手術(shù)治療兒童先天性眼球震顫的護(hù)理體會(huì)[A];中華護(hù)理學(xué)會(huì)第2屆護(hù)理學(xué)術(shù)年會(huì)暨“醫(yī)改新政下護(hù)理改革之路”系列研討會(huì)(六)暨全國護(hù)理新理論、新方法、新技術(shù)研討會(huì)暨全國自然災(zāi)害護(hù)理研討會(huì)論文集[C];2010年

4 曹桂蓮;;兒童眼球震顫矯正術(shù)的立體視覺研究[A];新世紀(jì) 新機(jī)遇 新挑戰(zhàn)——知識(shí)創(chuàng)新和高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)發(fā)展（下冊(cè)）[C];2001年

5 岳以英;;先天性眼球震顫代償頭位手術(shù)治療[A];第十一次全省中、西醫(yī)眼科學(xué)術(shù)交流會(huì)學(xué)術(shù)論文集[C];2012年

6 彭園園;孟巖;王錚;秦梅;李曉僑;佃艷;黃尚志;;X連鎖先天性眼球震顫一家系中GPR143基因的重復(fù)突變[A];第八次全國醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議(中華醫(yī)學(xué)會(huì)2009年醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)年會(huì))論文摘要匯編[C];2009年

7 金凌珍;徐新萌;;壓貼膜狀三棱鏡的臨床應(yīng)用范圍及療效觀察[A];2008年浙江省眼科學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2008年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 時(shí)仲省 高思敏 劉春陽;河南完成先天性眼球震顫病因研究[N];中國醫(yī)藥報(bào);2001年

2 李巧嫻;先天性眼球震顫可治[N];健康報(bào);2007年

3 北京大學(xué)第一醫(yī)院小兒眼科 主任醫(yī)師 李巧嫻;先天性眼球震顫怎么治？[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2007年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 高勇;粘脂累積病和先天性眼球震顫相關(guān)致病基因突變分析及功能研究[D];華中科技大學(xué);2012年

2 陳霞;先天性眼球震顫患者視頻眼動(dòng)圖的分析和眼外肌超微結(jié)構(gòu)的觀察[D];天津醫(yī)科大學(xué);2010年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 王冬杰;10個(gè)先天性眼球震顫家系致病基因研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2015年

2 馬鴻娟;先天性眼球震顫治療的臨床研究[D];山東大學(xué);2008年

3 崔小妞;一個(gè)CIN伴聽覺障礙家系致病基因的定位及突變分析[D];華中科技大學(xué);2009年

4 李乾;四個(gè)先天性眼球震顫家系致病基因的定位與克隆[D];中南大學(xué);2007年

5 胡s

本文編號(hào)：258285