本文關(guān)鍵詞：KGF-2對(duì)角膜基質(zhì)細(xì)胞的修復(fù)作用及其相關(guān)機(jī)制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：角質(zhì)化細(xì)胞生長(zhǎng)因子-2(KGF-2),也叫做成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子-10(FGF10),是成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子家族中的一員。KGF-2對(duì)角膜上皮組織具有高度特異性,加速上皮細(xì)胞的再生、遷移和角膜基質(zhì)纖維的修復(fù),從而促進(jìn)角膜的損傷修復(fù),并且不會(huì)出現(xiàn)過(guò)度增生而形成疤痕。角膜基質(zhì)細(xì)胞會(huì)分泌一定量的KGF-2,但是傷口的及時(shí)愈合需要補(bǔ)充外源性KGF-2,從而促進(jìn)角膜細(xì)胞的增值和遷移。因此,角膜基質(zhì)細(xì)胞作為上皮細(xì)胞的支架,研究KGF-2對(duì)角膜基質(zhì)細(xì)胞的作用及其機(jī)制,對(duì)于拓展KGF-2的促角膜損傷修復(fù)作用及其臨床應(yīng)用具有重大意義。 本研究通過(guò)體外原代培養(yǎng)了人角膜基質(zhì)細(xì)胞,MTT法檢測(cè)了KGF-2促角膜基質(zhì)細(xì)胞增殖的作用,用Western Blot法檢測(cè)了ERK1/2和p38的磷酸化蛋白表達(dá)水平,通過(guò)大鼠角膜堿燒傷模型研究了KGF-2體內(nèi)促角膜損傷修復(fù)的作用及其機(jī)制。MTT結(jié)果表明KGF-2對(duì)角膜基質(zhì)細(xì)胞的增值有明顯的促進(jìn)作用且呈劑量-效應(yīng)依賴(lài)性,且濃度為100ug/m1時(shí)達(dá)到最優(yōu)增值效應(yīng)。Western Blot結(jié)果顯示在200ug/ml肝素介導(dǎo)下,100ug/ml KGF-2作用角膜基質(zhì)細(xì)胞5min時(shí),ERK1/2和p38的磷酸化程度表現(xiàn)出最強(qiáng),隨后磷酸化程度逐漸減弱,并且ERK1/2和p38具有一定的協(xié)同作用。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,分別選用12.5、25、50ug/ml的KGF-2治療后,7d時(shí)角膜損傷程度較對(duì)照組相比明顯減輕,角膜厚度降低,炎癥程度明顯減輕,基質(zhì)層纖維排列疏松;14d時(shí)無(wú)炎癥復(fù)發(fā),基質(zhì)層纖維排列疏松、整齊,與正常角膜無(wú)明顯差別,而bFGF用藥組則出現(xiàn)基質(zhì)層細(xì)胞過(guò)度增生,上皮表現(xiàn)波浪狀、凹凸不平。總之,在細(xì)胞水平,KGF-2表現(xiàn)出促進(jìn)角膜基質(zhì)細(xì)胞的增值和遷移；在分子水平,KGF-2通過(guò)ERK1/2和p38信號(hào)通路協(xié)調(diào)促進(jìn)細(xì)胞的增值和遷移；在動(dòng)物水平,KGF-2表現(xiàn)出加速角膜上皮的再生與修復(fù)和角膜基質(zhì)纖維的修復(fù),抑制角膜基質(zhì)細(xì)胞的過(guò)度增生和炎癥發(fā)生,從而利于角膜損傷修復(fù)。 本課題是關(guān)于KGF-2促角膜損傷修復(fù)機(jī)制的研究,為KGF-2在眼科臨床試驗(yàn)的應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：KGF-2 ERK1/2 p38 細(xì)胞增值 細(xì)胞遷移
【學(xué)位授予單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類(lèi)號(hào)】：R772.2
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-6
• 符號(hào)說(shuō)明6-7
• 目錄7-8
• 第一章 前言8-16
• 1.1 角質(zhì)化細(xì)胞生長(zhǎng)因子-2的研究進(jìn)展8-10
• 1.2 角膜損傷修復(fù)的研究進(jìn)展10-12
• 1.3 MAPK信號(hào)通路的概述12-15
• 1.4 研究的價(jià)值與意義15
• 1.5 實(shí)驗(yàn)路線設(shè)計(jì)15-16
• 第二章 材料與方法16-26
• 2.1 材料與試劑16-19
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法19-26
• 第三章 結(jié)果與分析26-38
• 3.1 KGF-2凍干粉活性的測(cè)定26-27
• 3.2 人角膜基質(zhì)細(xì)胞的原代培養(yǎng)27-28
• 3.3 KGF-2 mRNA在人角膜基質(zhì)細(xì)胞中的表達(dá)28
• 3.4 KGF-2對(duì)人角膜基質(zhì)細(xì)胞的促增值作用28-29
• 3.5 KGF-2對(duì)人角膜基質(zhì)細(xì)胞的促遷移作用29
• 3.6 Western Blot檢測(cè)KGF-2作用不同情況下ERK1/2的磷酸化29-31
• 3.7 KGF-2對(duì)人角膜基質(zhì)細(xì)胞中p38磷酸化的影響31-32
• 3.8 KGF-2作用人角膜基質(zhì)細(xì)胞下ERK1/2和p38途徑的協(xié)同作用32-33
• 3.9 用大鼠角膜堿燒傷模型研究KGF-2的促角膜損傷修復(fù)作用33-38
• 第四章 討論38-40
• 4.1 細(xì)胞水平的研究38
• 4.2 分子水平的研究38-39
• 4.3 動(dòng)物水平的研究39-40
• 結(jié)論40-41
• 參考文獻(xiàn)41-46
• 致謝46-47
• 作者簡(jiǎn)歷47

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：258227