本文關鍵詞：KGF-2對角膜基質細胞的修復作用及其相關機制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：角質化細胞生長因子-2(KGF-2),也叫做成纖維細胞生長因子-10(FGF10),是成纖維細胞生長因子家族中的一員。KGF-2對角膜上皮組織具有高度特異性,加速上皮細胞的再生、遷移和角膜基質纖維的修復,從而促進角膜的損傷修復,并且不會出現過度增生而形成疤痕。角膜基質細胞會分泌一定量的KGF-2,但是傷口的及時愈合需要補充外源性KGF-2,從而促進角膜細胞的增值和遷移。因此,角膜基質細胞作為上皮細胞的支架,研究KGF-2對角膜基質細胞的作用及其機制,對于拓展KGF-2的促角膜損傷修復作用及其臨床應用具有重大意義。 本研究通過體外原代培養(yǎng)了人角膜基質細胞,MTT法檢測了KGF-2促角膜基質細胞增殖的作用,用Western Blot法檢測了ERK1/2和p38的磷酸化蛋白表達水平,通過大鼠角膜堿燒傷模型研究了KGF-2體內促角膜損傷修復的作用及其機制。MTT結果表明KGF-2對角膜基質細胞的增值有明顯的促進作用且呈劑量-效應依賴性,且濃度為100ug/m1時達到最優(yōu)增值效應。Western Blot結果顯示在200ug/ml肝素介導下,100ug/ml KGF-2作用角膜基質細胞5min時,ERK1/2和p38的磷酸化程度表現出最強,隨后磷酸化程度逐漸減弱,并且ERK1/2和p38具有一定的協(xié)同作用。動物實驗結果顯示,分別選用12.5、25、50ug/ml的KGF-2治療后,7d時角膜損傷程度較對照組相比明顯減輕,角膜厚度降低,炎癥程度明顯減輕,基質層纖維排列疏松;14d時無炎癥復發(fā),基質層纖維排列疏松、整齊,與正常角膜無明顯差別,而bFGF用藥組則出現基質層細胞過度增生,上皮表現波浪狀、凹凸不平。總之,在細胞水平,KGF-2表現出促進角膜基質細胞的增值和遷移；在分子水平,KGF-2通過ERK1/2和p38信號通路協(xié)調促進細胞的增值和遷移；在動物水平,KGF-2表現出加速角膜上皮的再生與修復和角膜基質纖維的修復,抑制角膜基質細胞的過度增生和炎癥發(fā)生,從而利于角膜損傷修復。 本課題是關于KGF-2促角膜損傷修復機制的研究,為KGF-2在眼科臨床試驗的應用奠定了基礎。
【關鍵詞】：KGF-2 ERK1/2 p38 細胞增值 細胞遷移
【學位授予單位】：吉林農業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R772.2
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-6
• 符號說明6-7
• 目錄7-8
• 第一章 前言8-16
• 1.1 角質化細胞生長因子-2的研究進展8-10
• 1.2 角膜損傷修復的研究進展10-12
• 1.3 MAPK信號通路的概述12-15
• 1.4 研究的價值與意義15
• 1.5 實驗路線設計15-16
• 第二章 材料與方法16-26
• 2.1 材料與試劑16-19
• 2.2 實驗方法19-26
• 第三章 結果與分析26-38
• 3.1 KGF-2凍干粉活性的測定26-27
• 3.2 人角膜基質細胞的原代培養(yǎng)27-28
• 3.3 KGF-2 mRNA在人角膜基質細胞中的表達28
• 3.4 KGF-2對人角膜基質細胞的促增值作用28-29
• 3.5 KGF-2對人角膜基質細胞的促遷移作用29
• 3.6 Western Blot檢測KGF-2作用不同情況下ERK1/2的磷酸化29-31
• 3.7 KGF-2對人角膜基質細胞中p38磷酸化的影響31-32
• 3.8 KGF-2作用人角膜基質細胞下ERK1/2和p38途徑的協(xié)同作用32-33
• 3.9 用大鼠角膜堿燒傷模型研究KGF-2的促角膜損傷修復作用33-38
• 第四章 討論38-40
• 4.1 細胞水平的研究38
• 4.2 分子水平的研究38-39
• 4.3 動物水平的研究39-40
• 結論40-41
• 參考文獻41-46
• 致謝46-47
• 作者簡歷47

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前6條

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  本文關鍵詞：KGF-2對角膜基質細胞的修復作用及其相關機制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：258227