【摘要】：目的 1、對(duì)比活體真菌性角膜炎和真菌培養(yǎng)菌落中的菌絲和孢子的形態(tài)在共焦顯微鏡下是否一致,探討共焦顯微鏡在真菌性角膜炎診斷中的診斷效果； 2、通過對(duì)比真菌性角膜炎角膜刮片前后的共焦顯微鏡圖像變化,確定共聚焦顯微鏡最佳檢查時(shí)間； 3、聯(lián)合共焦顯微鏡檢查,探討暗視野顯微鏡在真菌性角膜炎早期診斷中的臨床應(yīng)用價(jià)值； 4、聯(lián)合上述研究結(jié)果,探討提高真菌性角膜炎的檢出水平的方法。 方法 1、對(duì)34例(34只眼)典型真菌性角膜炎患者進(jìn)行活體共焦顯微鏡檢查,然后行角膜刮片后行真菌培養(yǎng),得陽性結(jié)果后,將培養(yǎng)的菌落涂片行共焦顯微鏡檢查,對(duì)比活體狀態(tài)下及培養(yǎng)菌落的共焦顯微鏡圖像。 2、對(duì)45例(45只眼)典型的真菌性角膜炎患者行共聚焦顯微鏡檢查,發(fā)現(xiàn)真菌絲或孢子后,行角膜刮片,然后給患者做第二次活體共聚焦檢查,對(duì)比刮片前后共聚焦顯微鏡圖像。 3、對(duì)23例(23只眼)非典型的真菌性角膜炎進(jìn)行活體共聚焦顯微鏡檢查,再行角膜刮片涂片,先用普通顯微鏡查找真菌菌絲及孢子,發(fā)現(xiàn)可疑菌絲或孢子,再在暗視野顯微鏡下進(jìn)行觀察,對(duì)比普通顯微鏡及暗視野顯微鏡圖像特征。 結(jié)果 1、活體真菌性角膜炎病灶和培養(yǎng)涂片中的菌絲、孢子在共焦顯微鏡下的形態(tài)基本一致。 2、在真菌性角膜炎刮片取材前,病灶中的菌絲在活體角膜共焦顯微鏡中結(jié)構(gòu)完整、成像清晰。刮片取材后,病灶中的菌絲在共焦顯微鏡中結(jié)構(gòu)不完整、成像較模糊,菌絲有斷裂。 3、非典型真菌性角膜炎病灶中的菌絲在共焦顯微鏡中結(jié)構(gòu)不完整、成像不清晰；在常規(guī)鏡檢下,成像不清甚至難以成像,不能對(duì)其進(jìn)行確診；但采用暗場(chǎng)顯微鏡檢查能發(fā)現(xiàn)清晰的真菌菌絲。 結(jié)論 1、共聚焦顯微鏡檢查活體真菌性角膜炎的菌絲、孢子與涂片培養(yǎng)的效果基本一致,其在真菌性角膜炎的研究和臨床診斷方面具有重要的意義。 2、對(duì)真菌性角膜炎進(jìn)行活體共焦顯微鏡的最佳檢查時(shí)間應(yīng)在角膜刮片前進(jìn)行,以提高共焦顯微鏡對(duì)真菌性角膜炎的檢出水平。 3、暗視野顯微鏡對(duì)于觀察角膜刮片涂片中的菌絲是一種有效的檢查方法,具有臨床應(yīng)用價(jià)值。 4、暗視野顯微鏡觀察非典型真菌性角膜炎有著獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn),該方法聯(lián)合常規(guī)涂片鏡檢及共焦顯微鏡檢查能提高對(duì)非典型真菌性角膜炎的檢出水平。
【圖文】：

圖1一3臨床共焦顯微鏡掃描原理示意圖(二)共焦顯微鏡在真菌性角膜炎中的應(yīng)用現(xiàn)狀上個(gè)世紀(jì)末有學(xué)者提出，真菌菌絲在角膜組織中呈高折光性的、非平行的線性結(jié)構(gòu)，直徑約為6pm，在角膜全層均可發(fā)現(xiàn)，伴有分支狀和交叉狀特征[32]。還有學(xué)者認(rèn)為真菌菌絲不易和角膜基質(zhì)層中的結(jié)晶體相區(qū)別，而在感染期，不管是真菌性角膜炎或細(xì)菌性角膜炎，在角膜基質(zhì)內(nèi)都有大量的結(jié)晶體的沉積[33]。因此，如果在感染早期和治療后期發(fā)現(xiàn)真菌菌絲才可能有臨床意義。此外，真菌性角膜炎的共焦顯微鏡檢查的陽性率高[29l。自共焦顯微鏡應(yīng)用于真菌性角膜炎的臨床診斷以來，相關(guān)的研究逐漸增多。采用共焦顯微鏡可見真菌的菌絲分支結(jié)構(gòu)、隔膜、雙重壁等，對(duì)診斷角膜深層真菌感染具有重要意

瓜暈⒕盜，

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