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突發(fā)性耳聾患者糖皮質(zhì)激素受體與激素敏感性關(guān)系的研究

發(fā)布時(shí)間:2019-12-05 01:01
【摘要】:目的:通過檢測突發(fā)性耳聾(SSNHL)志者外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cell, PBMC)中糖皮質(zhì)激素受體α(GRα)、糖皮質(zhì)激素受體β(GR(3)的相對表達(dá)以及GRα與GRβ之比,探討使用糖皮質(zhì)激素治療無效的突發(fā)性耳聾患者中是否存在糖皮質(zhì)激素抵抗及其發(fā)生原因。 方法:選擇SSNHL患者30例,根據(jù)聽力圖型分為平坦型、中高頻型和低中頻型,每型又根據(jù)療效分為治療無效組和治療敏感組,對照組為我科10例鼻中隔偏曲患者。應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法檢測各組外周血單個(gè)核細(xì)胞中GRamRNA、GRβmRNA的相對表達(dá)水平以及GRa/GRβ比例與SSHNL糖皮質(zhì)激素敏感性的關(guān)系。 結(jié)果 (1)、三型中治療無效組、治療敏感組與對照組之間均有GRa和GRβ表達(dá),治療無效組GRα與治療敏感組相比,差異無顯著性,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與對照組相比,其表達(dá)差異也無顯著性,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05) (2)、三型中治療無效組GRβ水平與治療敏感組相比顯著升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與對照組相比顯著升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05); (3)、三型中治療無效組GRa/GRβ與治療敏感組相比比值降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05):與正常對照組GRa/GRβ的比值降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論:在突發(fā)性耳聾患者中,GR亞型在PBMC中表達(dá)的強(qiáng)弱與GC治療療效密切相關(guān)。GRβ表達(dá)越強(qiáng),GRa/GRβ比例越低,導(dǎo)致療效不敏感。
【圖文】:

蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)


圖IGR蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)(氨基端的免疫原反應(yīng)區(qū)(immimoes-genicdomain,ID)為非保守區(qū)域,是GR的免疫原性所在部位;中間nNA結(jié)合區(qū)(DNA一bindingdomain,nBn)為高度保守,與糖皮質(zhì)激素反應(yīng)元件(glueoeortieoidresponelement,G既)結(jié)合,位于oR蛋白質(zhì)的中部:梭基端為激素結(jié)合(hormone一bindingdomain,HBo),為高保守,結(jié)合糖皮質(zhì)激素及與熱休克蛋白等伴侶分子結(jié)合以維持GR的配體親和力和穩(wěn)定性,,同時(shí)與DBD參GR二聚體的形成。)

凝膠電泳,鑒定儀,純度測定,比值


12000gX巧min,棄上清,管底可見少許白色沉淀5%乙醇1ml,充分洗滌RNA沉淀,4oC離心l0,靜置10分鐘,使之干燥,加30川無RNase水量和純度檢測,余下一20oC保存。物的鑒定儀檢測(RNA濃度、純度測定):用0.1%DEA樣品,用1%川0.1%DEPC水稀釋50倍后,28Onm,按以下公式計(jì)算RNA濃度和純度。(林g/卜l)=OD260nmX50x40OD260nnl了OD280tun,比值接近或大于1.8,說的殘余;比值小于1.6,說明RNA樣品中有蛋白
【學(xué)位授予單位】:南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2011
【分類號(hào)】:R764

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