【摘要】： 外傷性視神經(jīng)病變(Traumatic optic neuropathy, TON)是眼眶、顱腦及面部外傷的嚴(yán)重并發(fā)癥,往往導(dǎo)致不可治愈的原發(fā)性或繼發(fā)性盲目。長期以來,關(guān)于外傷性視神經(jīng)病變的治療一直存在著爭議。理論上講,最終解決這一問題的唯一途徑就是使受損的視神經(jīng)重新再生。視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(Retina ganglion cells, RGCs)的存活和其軸突再生有著密切的關(guān)系,因此對于視神經(jīng)損傷后如何保護(hù)和挽救RGCs存活和促進(jìn)其軸突再生已成為當(dāng)前國內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。 近年來,Leon和Fischer等研究發(fā)現(xiàn),大鼠晶狀體的損傷能極大地促進(jìn)視神經(jīng)損傷后RGCs的存活及大量軸突再生通過視神經(jīng)斷端。已有研究證實(shí)鼠類視網(wǎng)膜內(nèi)Muller細(xì)胞提取液(Murine Muller cells conditioned medium, MMG)可促進(jìn)離體培養(yǎng)的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞存活及軸突的生長,但是晶狀體損傷能否會(huì)使視神經(jīng)損傷大鼠的視網(wǎng)膜中Muller細(xì)胞的表達(dá)發(fā)生變化一直鮮見報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)采用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的方法進(jìn)行這方面的研究。 目的 研究Muller細(xì)胞在晶狀體損傷促進(jìn)視神經(jīng)橫斷傷后RGCs存活中的變化及作用。 方法 選用健康成年Wistar大鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,共40只。隨機(jī)分為3組：正常對照組8只,單純損傷組16只,聯(lián)合損傷組16只。正常對照組大鼠飼養(yǎng)7天后處死,其余2組分別在術(shù)后7天和14天各處死相應(yīng)的大鼠8只。HE染色觀察視網(wǎng)膜組織形態(tài)學(xué)的變化,通過免疫組化方法用神經(jīng)膠質(zhì)原纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)標(biāo)記視網(wǎng)膜內(nèi)Muller細(xì)胞,顯微鏡下觀察各組大鼠各時(shí)間點(diǎn)視網(wǎng)膜內(nèi)RGCs數(shù)量及GFAP陽性Muller細(xì)胞表達(dá)變化。 結(jié)果 1.正常大鼠視網(wǎng)膜各層次清晰,神經(jīng)纖維層排列規(guī)則,RGCs大多為單層排列,細(xì)胞間無炎癥細(xì)胞,細(xì)胞計(jì)數(shù)為52.98±1.90。 術(shù)后第7天,單純損傷組存活RGCs數(shù)為36.61±1.69,其丟失率為30.90%；聯(lián)合損傷組存活RGCs數(shù)為50.76±2.77,其丟失率為4.19%；3組中存活RGCs數(shù)量兩兩比較,除正常對照組和聯(lián)合損傷組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.053)外,其余兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)。術(shù)后第14天,單純損傷組存活RGCs數(shù)為22.67±1.94,其丟失率為57.22%；聯(lián)合損傷組存活RGCs數(shù)為35.69±1.80,其丟失率為32.62%；3組中存活RGCs數(shù)量兩兩比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)。 2.正常組視網(wǎng)膜中,Muller細(xì)胞胞體所在的內(nèi)核層GFAP著色不明顯,神經(jīng)纖維層見淺棕色斑點(diǎn)狀著色,RGCs的胞膜著色不明顯,內(nèi)叢狀層可見少量與視網(wǎng)膜垂直的細(xì)絲狀淺棕色著色。 術(shù)后第7天,單純損傷組視網(wǎng)膜內(nèi)核層可見陽性細(xì)胞,陽性細(xì)胞數(shù)為29.38±2.04,呈淺棕色,可見胞體和突起的肥大。神經(jīng)纖維層及RGCs胞膜亦可見斑點(diǎn)狀著色,內(nèi)叢狀層、外叢狀層、外核層及色素細(xì)胞層亦可見GFAP陽性著色。術(shù)后第7天,聯(lián)合損傷組視網(wǎng)膜內(nèi)核層中陽性細(xì)胞數(shù)為48.96±2.80,呈深棕色,且伴有陽性細(xì)胞胞體和突起的肥大。單純損傷組和聯(lián)合損傷組陽性細(xì)胞數(shù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)。 術(shù)后第14天,單純損傷組視網(wǎng)膜內(nèi)陽性細(xì)胞數(shù)為19.07±2.14,但未見胞體和突起的肥大。較同組7天時(shí)陽性細(xì)胞數(shù)量下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)。聯(lián)合損傷組術(shù)后第14天陽性細(xì)胞數(shù)為46.73±1.50,與同組第7天相比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.067),且都伴有陽性細(xì)胞胞體和突起的肥大。術(shù)后第14天,單純損傷組和聯(lián)合損傷組陽性細(xì)胞數(shù)差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)。 結(jié)論 1.視神經(jīng)橫斷傷后,隨著時(shí)間的推移RGCs進(jìn)行性丟失。 2.晶狀體損傷可顯著促進(jìn)視神經(jīng)橫斷傷后RGCs的存活,且這種保護(hù)作用在損傷的早期更強(qiáng)。 3.晶狀體損傷可顯著促進(jìn)視神經(jīng)損傷后視網(wǎng)膜內(nèi)Muller細(xì)胞GFAP的活化,且活化狀態(tài)穩(wěn)定。
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R774

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 李彬彬;CNTF/LIF在大鼠晶狀體損傷促進(jìn)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞再生中的實(shí)驗(yàn)研究[D];鄭州大學(xué);2011年

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本文編號(hào)：2569813