【摘要】：背景與目的:葡萄膜黑色素瘤(uveal melanoma,UM)是成人最常見的眼內(nèi)原發(fā)性惡性腫瘤,其惡性程度高,轉(zhuǎn)移早。放射治療是多年來葡萄膜黑色素瘤最常用的方法之一,但輻射抗性和受照部位正常組織的損傷是長期困擾UM放療的問題。本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用放射線可調(diào)控的HtrA2基因聯(lián)合療法,探討其對(duì)UM的抑制作用。方法:含Egr1啟動(dòng)子的pIRES-Egr1-Omi/HtrA2(pEgr1-HtrA2)質(zhì)粒體外轉(zhuǎn)染入OCM-1細(xì)胞,轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞暴露于不同劑量的放射線中。將移植瘤模型小鼠分為對(duì)照組、放射組、基因組和基因放射組,每組10只。應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR(qRT-PCR)和蛋白質(zhì)印跡法(Western blot)檢測HtrA2基因的mRNA表達(dá)和蛋白表達(dá)。流式細(xì)胞儀檢測聯(lián)合處理后的OCM-1細(xì)胞凋亡情況。通過克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測HtrA2基因?qū)Ψ派涿舾行缘挠绊�。在�?dòng)物實(shí)驗(yàn)中測量聯(lián)合治療后腫瘤體積。結(jié)果:轉(zhuǎn)染pEgr1-HtrA2質(zhì)粒后,放射組HtrA2 mRNA表達(dá)在8 Gy達(dá)到高峰,且HtrA2蛋白表達(dá)較放射前明顯增加(P0.05),OCM-1細(xì)胞凋亡顯著增加�？寺⌒纬蓪�(shí)驗(yàn)顯示,HtrA2基因可增強(qiáng)OCM-1細(xì)胞放射敏感性。與對(duì)照組相比,基因放射組腫瘤生長被顯著抑制(P0.05)。結(jié)論:轉(zhuǎn)染pEgr1-HtrA2質(zhì)粒后可在放射線調(diào)控下增加HtrA2基因表達(dá),并能增強(qiáng)OCM-1細(xì)胞對(duì)放射的敏感性,抑制腫瘤細(xì)胞生長。

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2554116