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慢性高眼壓大鼠視網(wǎng)膜形態(tài)學(xué)及Brn-3a表達變化

發(fā)布時間:2019-10-10 09:25
【摘要】:目的 觀察慢性高眼壓大鼠不同時期的眼壓、視網(wǎng)膜形態(tài)學(xué)及Brn-3a的表達變化。 方法 (1)SD雌性大鼠35只,隨機分為正常對照組、模型組,大鼠左眼為模型眼,右眼為對照眼,采用Shareef-Sharma模型,烙閉大鼠左眼3支上鞏膜靜脈,建立慢性高眼壓大鼠動物模型,分別于術(shù)前、術(shù)后30min、術(shù)后1d,3d,7d, 14d,28d,測量雙眼眼壓。 (2)分別于造模后1d、3d、5d、7d、14d、28d隨機過量麻醉處死,每組5只,正常對照組5只,行3點鐘位縫線標記,立即摘除大鼠眼球,浸泡于4%多聚甲醛的固定液中。48 h后沿角鞏膜緣切除眼前節(jié),剝離晶狀體,余下部分逐節(jié)脫水、透明、石蠟包埋,做4μm厚切片,烘干備用,做視網(wǎng)膜石蠟切片,常規(guī)蘇木素-伊紅染色鏡下觀察視網(wǎng)膜各層組織學(xué)改變,甲苯胺藍染色計數(shù)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞(RGCs),用免疫組織化學(xué)法檢測各個時間段Brn-3a的表達情況。 結(jié)果 35只大鼠(35眼)術(shù)前的基線眼壓是(13.61±1.60)mmHg, 4W時的眼壓幾乎是正常眼壓的1.59倍,且在4W內(nèi)眼壓維持穩(wěn)定。光鏡下正常大鼠的視網(wǎng)膜從內(nèi)向外依次為神經(jīng)節(jié)細胞層(GCL)、內(nèi)核層(INL)、感光細胞層(ONL)。GCL的細胞呈單層排列,較為整齊,胞核清楚數(shù)目相對較少,INL和ONL呈多層排列,且細胞排列緊密,數(shù)目相對較多。造模鼠眼視細胞內(nèi)外節(jié)斷裂,RGCs層明顯空泡變且排列稀疏、細胞體積大小不一,核仁不清或無,核內(nèi)染色質(zhì)稀少且分布不均,神經(jīng)纖維層水腫。RGCs計數(shù),正常對照組(n=5)RGCs是29.08±1.98(個/高倍視野),模型組與正常對照組相比,除1d組外均有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。RGCs層Brn-3a蛋白表達陽性的細胞在細胞核著色,與正常對照組相比,各模型組Brn-3a蛋白表達差異均有顯著意義(p0.01)。 結(jié)論 采用Shareef-Sharma模型成功地建立大鼠慢性高眼壓動物模型,其眼壓中等程度升高;模型組中RGCs的丟失與高眼壓持續(xù)的時間存在高度相關(guān)性,高眼壓時間越長,RGCs的丟失越多;Brn-3a~+細胞僅存在于視網(wǎng)膜的GCL,Brn-3a的表達隨著時間的推移、RGCs的凋亡而逐漸減少。
【圖文】:

眼壓,雙眼


圖 1 實驗期間雙眼眼壓值比較Fig1 Comparison of IOP of Oculus Uterque during the experiment

鞏膜靜脈,大鼠,眼球


11圖 2 高眼壓模型的建立(A、B 分別為暴露的大鼠眼球、正常的大鼠上鞏膜靜脈,,C、D 為烙閉成功的上鞏膜靜脈)Fig2 establishment of chronic glaucoma model
【學(xué)位授予單位】:福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2011
【分類號】:R775.9

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前5條

1 路雪婧,段俊國,廖品正,張富文;持續(xù)高眼壓對大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞的損傷[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2005年09期

2 諶宏鳴,謝富康;Brn-3a誘導(dǎo)胚胎干細胞向神經(jīng)樣細胞定向分化的研究[J];解剖學(xué)報;2002年06期

3 馬建洲;謝琳;賀翔鴿;孫亞麗;;正常大鼠麻醉狀態(tài)下的眼壓分布規(guī)律[J];中國臨床康復(fù);2005年38期

4 江冰,蔣幼芹;燈盞細辛對大鼠視神經(jīng)壓榨傷后視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞的保護作用[J];中華眼科雜志;2003年08期

5 鐘毅敏,彭大偉,楊華勝;上鞏膜靜脈壓力計的臨床應(yīng)用[J];中國實用眼科雜志;2001年01期



本文編號:2547106

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