【摘要】：目的探討不同年齡及生長因子對大鼠內(nèi)耳前體細胞體外增殖的影響。方法 1分離取出出生后1天(P1)、7天(P7)、14天(P14)、21天(P21)、30天(P30)、60天(P60)各天齡12只(24耳)SD大鼠的球囊斑、橢圓囊斑、Corti器的前體細胞,在無血清條件下進行單細胞懸浮培養(yǎng),至第七天,在倒置相差顯微鏡下對所形成的細胞球進行計數(shù);2取P1大鼠球囊斑、橢圓囊斑、Corti器高增殖細胞分為實驗組和對照組,實驗組分為四組,培養(yǎng)液分別添加表皮生長因子(epidermal growth factor,EGF)、堿性成纖維細胞生長因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、胰島素樣生長因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)、白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF),對照組不加生長因子,觀察不同生長因子對細胞球數(shù)量的影響;3免疫熒光染色檢測細胞球的表型特征。結(jié)果1P1SD大鼠內(nèi)耳各器官單細胞表現(xiàn)為nestin陽性,培養(yǎng)7天后,可形成懸浮的細胞球,球體細胞免疫熒光表現(xiàn)為nestin和BrdU陽性;2耳蝸Corti器只在P1、P7可形成細胞球,而球囊斑、橢圓囊斑各天齡段均可形成細胞球;3培養(yǎng)液中添加EGF、bFGF、IGF-1組,培養(yǎng)形成的細胞球數(shù)量明顯增多,與對照組比較,差異有顯著統(tǒng)計學意義(P0.01);添加LIF組則與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論大鼠內(nèi)耳球囊斑、橢圓囊斑以及耳蝸Corti器內(nèi)有高增殖能力細胞,能表達神經(jīng)干細胞的特性;隨著鼠齡的增長,這種增殖能力總體表現(xiàn)為減退趨勢;EGF、bFGF、IGF-1均可單獨促進P1大鼠內(nèi)耳前體細胞的增殖,而LIF無促增殖作用。
【作者單位】： 南昌大學第一附屬醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科;
【基金】：江西省自然科學基金(2007GZY1408)資助
【分類號】：R764

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