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JNK2在糖尿病小鼠視網(wǎng)膜病變?cè)缙诘谋磉_(dá)及相關(guān)作用研究

發(fā)布時(shí)間:2019-10-06 18:20
【摘要】: 研究目的: 通過(guò)觀察JNK2在早期糖尿病視網(wǎng)膜病變小鼠病程中的表達(dá)變化以及視網(wǎng)膜中神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的凋亡情況,探討JNK2在糖尿病視網(wǎng)膜病變(DR)早期的作用機(jī)制,并為進(jìn)一步深入探討糖網(wǎng)病的發(fā)病機(jī)制及早期治療研究提供理論依據(jù)。 研究方法: C57BL/6雄性小鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組一次性腹腔注射1%STZ誘發(fā)糖尿病模型,對(duì)照組腹腔注射同劑量的檸檬酸鈉緩沖液,成模后2、4、8周,分別取出小鼠眼球,左眼提取視網(wǎng)膜用于RT-real-time PCR,檢測(cè)JNK2在不同時(shí)期mRNA的表達(dá)變化,右眼取出眼球行HE染色和TUNEL法,分別觀察視網(wǎng)膜在各期的形態(tài)學(xué)改變及視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的凋亡情況。 研究結(jié)果: 1:JNK2在DM視網(wǎng)膜中的表達(dá)情況:正常組小鼠在各期的表達(dá)變化無(wú)明顯差異,糖尿病2周組小鼠與同期正常組小鼠JNK2表達(dá)量無(wú)顯著差異(t=-0.109,p=0.9150.05);1月組糖尿病比同期正常組小鼠JNK2表達(dá)上調(diào)(p=0.0020.05);2月組JNK2表達(dá)量明顯上調(diào)(p=0.0000.01)。 2:神經(jīng)節(jié)細(xì)胞凋亡率:正常組小鼠神經(jīng)節(jié)細(xì)胞可有少量凋亡,且各組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;糖尿病2周時(shí)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞凋亡不明顯(組間比較p=0.0860.05);糖尿病1月時(shí)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層可見(jiàn)部分凋亡細(xì)胞(組間比較p=0.0000.01);糖尿病2月時(shí)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層凋亡細(xì)胞明顯增多,內(nèi)核層和外核層也可見(jiàn)凋亡細(xì)胞(組間比較p=0.0000.01)。 3:HE染色及神經(jīng)節(jié)細(xì)胞計(jì)數(shù):正常組視網(wǎng)膜分層清晰,RGCS排列整齊,內(nèi)叢狀層染色較均勻,內(nèi)核層和外核層細(xì)胞排列較整齊,視錐細(xì)胞、視桿細(xì)胞排列整齊;2周組糖尿病小鼠視網(wǎng)膜各層與正常組無(wú)明顯變化,實(shí)驗(yàn)組小鼠1月時(shí)視網(wǎng)膜組織分層稍紊亂,細(xì)胞形態(tài)正常,但較稀疏;DM 2月組神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)目減少較明顯,神經(jīng)纖維層及內(nèi)叢狀層變薄,內(nèi)核層細(xì)胞排列較紊亂,外叢狀層厚度亦變薄,外界膜模糊,視桿細(xì)胞層細(xì)胞排列紊亂。神經(jīng)節(jié)細(xì)胞2周組糖尿病與正常組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(組間比較p=0.1370.05),糖尿病1月組小鼠神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)開(kāi)始變少(組間比較p=0.0000.05):兩月組節(jié)細(xì)胞數(shù)量進(jìn)一步減少(組間比較p=0.0000.05)。 結(jié)論: 1:糖尿病視網(wǎng)膜病變的發(fā)生是多種因素,多種途徑共同調(diào)控的復(fù)雜過(guò)程。 2:JNK2可能是糖尿病視網(wǎng)膜病變?cè)缙诘闹匾{(diào)控因素之一,其表達(dá)與DM的病程密切相關(guān)。 3:JNK2的表達(dá)量與視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的凋亡在早期糖尿病視網(wǎng)膜病變中呈正相關(guān)性。 4:JNK2抑制劑的研究有可能成為糖網(wǎng)病早期治療的一種新方法。
【圖文】:

曲線圖,曲線圖,病程,糖尿病


病2周組相比P二0.000<0.05.兩者相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。州K2相對(duì)腦組織的表達(dá)量在正常組隨病程的延長(zhǎng)無(wú)明顯變化,而糖尿病組隨病程的延長(zhǎng)刃呵KZ的上調(diào)倍數(shù)明顯增加(圖6)。J月Q農(nóng)活且相對(duì)盆妞以曲變化份況.曲分組—正常組—精尿病組弓.a,‘N相對(duì)乙.組級(jí)上.倍致月份(圖6)JNKZ表達(dá)量的變化曲線圖

曲線圖,視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞,凋亡,曲線圖


組平均秩次18.50,糖尿病1月組平均秩次 7.oo.P=0.000<0.05.說(shuō)明糖尿病2月組的凋亡率高于糖尿病1月組。正常組之間神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的凋亡率隨病程無(wú)明顯變化,糖尿病之間神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的凋亡率隨病程的延長(zhǎng)凋亡明顯增加(圖7)。小巨神經(jīng)節(jié)們.硯亡.況.幼小鼠分組—正常組—粉尿病組丫//眾樂(lè)5云.胞調(diào)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)亡率視弓網(wǎng) 1.002,003一oo月份(圖7)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞凋亡曲線圖陽(yáng)性細(xì)胞細(xì)胞核或細(xì)胞漿染色呈棕黃色,,陰性細(xì)胞因甲基綠染色細(xì)胞核呈藍(lán)綠色外觀。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示正常小鼠視網(wǎng)膜各層內(nèi)可見(jiàn)少量神經(jīng)節(jié)細(xì)胞凋亡,糖尿病4周時(shí)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層可見(jiàn)少量的凋亡細(xì)胞。糖尿病第8周時(shí)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層凋亡細(xì)胞明顯增多,內(nèi)核層和外核層也可見(jiàn)凋亡細(xì)胞(圖8一13)。(圖8一13)小鼠視網(wǎng)膜各層的TUNEL染色結(jié)果、圖8正常2周組 (TUNELX200)圖9正常1月組(rFI〕 NELX200)
【學(xué)位授予單位】:昆明醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2010
【分類號(hào)】:R774.1

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本文編號(hào):2545871

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