本文關(guān)鍵詞：骨橋蛋白與整合素在糖尿病大鼠視網(wǎng)膜的表達(dá)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:該研究主要目的在于通過對大鼠左下腹腔注射STZ建立SD大鼠糖尿病視網(wǎng)膜病變的模型,討論當(dāng)糖尿病大鼠發(fā)生視網(wǎng)膜病變時,骨橋蛋白、整合素αvβ3的表達(dá)水平,進(jìn)而初步討論其在DR病變進(jìn)程中的作用和機理。方法:選取出生6周大小健康的清潔級Sprague Dawley大鼠60只,建立類似人類I型糖尿病模型。每只大鼠入選時均排除其他眼科疾病,稱重體重約130至150g,實驗整個進(jìn)程時,常規(guī)實驗室大鼠飼料喂養(yǎng)20周,采用隨機分組法將15只列為普通對照組(I組),對其左下腹腔皮下注射等量檸檬酸緩沖液。另外45只大鼠同樣采用隨機分組法均分為3組,每組15只,4組大鼠稱重評估健康狀況后均適應(yīng)性喂養(yǎng)一周,注射STZ前禁食不禁水約12小時,按照55mg/kg的劑量配制10%STZ溶液,避光保存,半小時內(nèi)在大鼠左下腹腔內(nèi)注射。氯霉素軟膏涂抹注射部位防止感染,注射后恢復(fù)常規(guī)禁食,約72小時后于大鼠尾靜脈采血測血糖。大鼠進(jìn)食后血糖濃度始終保持在16.7mmol/L則判定為達(dá)標(biāo)糖尿病大鼠模型,此時大鼠表現(xiàn)為明顯多尿多飲。分組中II組常規(guī)喂養(yǎng)12周,III組常規(guī)喂養(yǎng)16周,IV組常規(guī)喂養(yǎng)20周。20周后采用全身灌注法固定眼球,摘取雙眼后送檢免疫組化,檢測骨橋蛋白、αvβ3的陽性表達(dá)水平。結(jié)果:(1)體重及空腹血糖變化比較:較之II、III、IV組,I組大鼠體重明顯增高(P0.05),差異有統(tǒng)計學(xué)意義;糖尿病大鼠三組之間兩兩之間體重變化無統(tǒng)計學(xué)意義。較之II、III、IV組,I組大鼠血糖無明顯增高(P0.05),差異有統(tǒng)計學(xué)意義,糖尿病大鼠三組之間兩兩之間血糖變化無統(tǒng)計學(xué)意義。(2)免疫組化法檢查:結(jié)果顯示在糖尿病大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的胞漿中骨橋蛋白和αVβ3的表達(dá)呈陽性,陽性細(xì)胞的胞漿為淡黃色或棕黃色,二者積分光密度測定值經(jīng)過統(tǒng)計學(xué)分析存在明顯差異性(P0.01),實驗組陽性率明顯高于對照組。骨橋蛋白、αvβ3在45只實驗組大鼠中的陽性率分別為81%、72%。(3)HE染色病理學(xué)切片示:糖尿病大鼠(II組、III組及IV組)視網(wǎng)膜切片可見大量突破內(nèi)界膜的內(nèi)皮細(xì)胞核,相比空白對照組大鼠有明顯的統(tǒng)計學(xué)差異性(P0.05)。結(jié)論:(1)糖尿病組大鼠12周時視網(wǎng)膜已出現(xiàn)明顯改變:視網(wǎng)膜較之對照組大鼠明顯厚度減少,血管旁細(xì)胞罕見。(2)骨橋蛋白、αvβ3在糖尿病組大鼠視網(wǎng)膜的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層表達(dá)水平明顯上調(diào),且隨病程時間推移遞增,這一結(jié)果表明二者可能在DR病程的進(jìn)展中起著重要作用。(3)骨橋蛋白的陽性率和αvβ3具有一致性,骨橋蛋白表達(dá)上調(diào)可能促進(jìn)αvβ3的表達(dá)增加。
【關(guān)鍵詞】：糖尿病視網(wǎng)膜病變 骨橋蛋白 整合素αvβ3
【學(xué)位授予單位】：皖南醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R587.2;R774.1
【目錄】：

• 中英文縮略詞對照表5-9
• 摘要9-11
• Abstract11-13
• 前言13-15
• 研究材料與方法15-21
• 1 材料15-17
• 1.1 實驗對象15
• 1.2 實驗分組15
• 1.3 主要試劑15
• 1.4 主要溶液配制15-16
• 1.4.1 0.1mmol/L檸檬酸緩沖液15-16
• 1.4.2 1%STZ溶液16
• 1.4.3 檸檬酸鈉緩沖液（PBS）16
• 1.4.4 4%多聚甲醛磷酸鹽緩沖液16
• 1.5 實驗儀器16-17
• 1.5.1 操作器械及物品16
• 1.5.2 實驗儀器16-17
• 2 方法17-21
• 2.1 動物模型建立17
• 2.1.1 糖尿病組17
• 2.1.2 空白對照組17
• 2.2 完整摘取眼球17-18
• 2.3 組織蠟塊的制備18
• 2.4 修正蠟塊18
• 2.5 切片18
• 2.6 HE染色18
• 2.7 免疫組化染色法18-19
• 2.8 視網(wǎng)膜骨橋蛋白、整合素αVβ3表達(dá)的半定量測定19
• 2.9 數(shù)據(jù)處理19-21
• 結(jié)果21-27
• 3.1 大鼠的一般情況21-22
• 3.1.1 一般情況21
• 3.1.2 大鼠血糖測試情況21
• 3.1.3 糖尿病大鼠造模成功率21
• 3.1.4 各組實驗大鼠存活情況21
• 3.1.5 實驗前各組大鼠的體重和空腹血糖21-22
• 3.1.6 實驗結(jié)束時各組大鼠的體重和空腹血糖22
• 3.2 形態(tài)學(xué)觀察22
• 3.3 免疫組織化學(xué)染色法22-24
• 3.3.1 各組大鼠視網(wǎng)膜骨橋蛋白免疫組化染色結(jié)果22-23
• 3.3.2 各組大鼠視網(wǎng)膜整合素αVβ3免疫組化染色結(jié)果23-24
• 3.4 免疫組化結(jié)果分析24-27
• 3.4.1 骨橋蛋白24
• 3.4.2 整合素αVβ324-27
• 討論27-35
• 4.1 糖尿病視網(wǎng)膜病變27
• 4.2 動物選擇及模型建立27-30
• 4.3 骨橋蛋白(OPN)與整合素αVβ3與糖尿病視網(wǎng)膜病變30-35
• 4.3.1 OPN與整合素αVβ3的一般生物學(xué)特性30-32
• 4.3.1.1 OPN的一般生物學(xué)特性30-31
• 4.3.1.2 整合素αvβ3的一般生物學(xué)特性31-32
• 4.3.2 OPN與整合素αVβ3在糖尿病視網(wǎng)膜病變中的關(guān)系32-35
• 結(jié)論35-36
• 參考文獻(xiàn)36-41
• 綜述41-63
• 參考文獻(xiàn)55-63
• 作者簡介及讀研期間主要科研成果63-64
• 致謝64

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本文編號：254381