發(fā)布時間：2019-09-28 04:29

【摘要】：目的：本實驗旨在研究基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑GM6001在準(zhǔn)分子激光角膜上皮下磨鑲術(shù)(LASEK)術(shù)后角膜損傷修復(fù)中的作用,探討LASEK術(shù)后角膜愈合的機制。 方法：(1)GM6001(基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑)眼液的制備(2)建立兔LASEK模型(3)27只新西蘭白兔(54只眼)術(shù)后隨機分3組,每組6只兔,分別為基質(zhì)金屬蛋白酶抑制荊(GM6001)組、氟美童(Fluoromethalone,FML)組和陰性對照(negative control,NC)組。分別于術(shù)后0.5月、1月、2月共3個時間點在裂隙燈下對兔角膜進行Haze評估并記錄分級,各組隨機選取3只兔行角膜共聚焦顯微鏡檢查,隨后處死取角膜組織固定后分別行光鏡、透射電鏡觀察,Ⅲ型膠原免疫組織化學(xué)法檢測。 結(jié)果： 1、裂隙燈顯微鏡觀察：術(shù)后0.5月和1月,Haze分級水平組間比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01),GM6001組和FML組Haze分級水平明顯低丁NC組(P0.01),但GM6001組和FML組相比,籌異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；術(shù)后2月組間整體比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 2、角膜組織病理切片：兔LASEK術(shù)后不同時間點各組光鏡下均見角膜上皮層明顯增厚,上皮細胞呈6-7層,與NC組相比,GM6001組和FML組術(shù)區(qū)角膜前部基質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)少量角膜基質(zhì)細胞聚集。 3、角膜Ⅲ型膠原免疫組織化學(xué)法：正常兔角膜基質(zhì)Ⅲ型膠原為陰性表達；NC組角膜Ⅲ型膠原早強附性表達；GM6001組角膜Ⅲ型膠原呈弱陽性表達；FML組角膜Ⅲ型膠原呈陽性表達。 4、角膜超微結(jié)構(gòu)觀察：與NC組和FML組相比,GM6001組前基質(zhì)成纖維細胞較較少,角膜基質(zhì)層膠原纖維粗細均勻且排列整齊規(guī)則,成纖維細胞體積小,細胞器含量少,細胞較穩(wěn)定。 5、角膜共聚焦顯微鏡觀察：兔LASEK術(shù)后各時間點GM6001組與其他兩組比較前基質(zhì)內(nèi)的細胞排列較規(guī)則。前基質(zhì)細胞數(shù)量統(tǒng)計學(xué)分析,GM6001組術(shù)區(qū)前部基質(zhì)內(nèi)角膜細胞數(shù)與NC組和FML組相比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01),后兩組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。 結(jié)論：GM6001通過抑制角膜基質(zhì)細胞的增生及Ⅲ膠原纖維的合成,減少haze的形成,其療效與FML相似。兔LASEK術(shù)后Haze形成的機制與手術(shù)損傷后引起角膜內(nèi)MMPs的釋放增加,誘發(fā)角膜基質(zhì)內(nèi)角膜細胞活化增殖,新生膠原纖維排列紊亂有關(guān)。
【圖文】：

一INC組術(shù)后0.5月圖2一2GM6001組術(shù)后0.5月圖2一3FML組術(shù)后0.5月

GM6001在以SEK術(shù)后角膜損傷修復(fù)中作用的研究圖2一 4NC組術(shù)后1月圖2一5GM6001組術(shù)后1月圖2七FML組術(shù)后1月圖2一7NC組術(shù)后2月圖2一8GM6001組術(shù)后2月圖2-，F(xiàn)ML組術(shù)后2月2.2高倍鏡 (x40)兔LASEK術(shù)后不同時間點各組光鏡下均見角膜上皮層明顯增厚，上皮細胞呈5一6層，，前部基質(zhì)成纖維細胞明顯增多，而各組上皮下前基質(zhì)層則表現(xiàn)出較大差異，膠原纖維排列紊亂。NC組術(shù)區(qū)角膜前部基質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)大量角膜細胞局部聚集，細胞外基質(zhì)明顯增加;GM6O01組術(shù)區(qū)角膜前基質(zhì)層角膜細胞聚集;FML組術(shù)區(qū)角膜前基質(zhì)層與GM6O01組相似。
【學(xué)位授予單位】：石河子大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R779.63

【參考文獻】

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本文編號：2543102