【摘要】：研究背景:急性心肌缺血誘發(fā)的視網(wǎng)膜應(yīng)激反應(yīng)可引起視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡顯著增加,感覺神經(jīng)參與了急性心肌缺血傷害性刺激的感受及調(diào)制,對(duì)應(yīng)激性視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡具有一定的保護(hù)作用。同時(shí),急性心肌缺血誘發(fā)的視網(wǎng)膜應(yīng)激反應(yīng)可引起視網(wǎng)膜感覺神經(jīng)遞質(zhì)CGRP的表達(dá)量增加,CGRP的表達(dá)上調(diào)是否對(duì)視網(wǎng)膜應(yīng)激性損傷有一定的影響。感覺神經(jīng)對(duì)應(yīng)激性視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用是通過(guò)何種機(jī)制實(shí)現(xiàn)的,感覺神經(jīng)遞質(zhì)CGRP是否在其中起重要的作用尚不清楚。 目的:采用結(jié)扎大鼠冠狀動(dòng)脈左前降支(CAO)的方法制作急性應(yīng)激反應(yīng)動(dòng)物模型,將細(xì)胞凋亡率和半胱氨酸天冬蛋白酶3(caspase-3)活性作為觀察指標(biāo),觀察降鈣素基因相關(guān)肽拮抗劑CGRP_(8-37)干預(yù)對(duì)大鼠應(yīng)激性視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡的影響;采用辣椒素去感覺神經(jīng)大鼠模型,觀察感覺神經(jīng)對(duì)急性心肌缺血誘發(fā)的視網(wǎng)膜急性應(yīng)激反應(yīng)中CGRP表達(dá)的影響。 方法:采用結(jié)扎大鼠冠狀動(dòng)脈左前降支3h的方法制備急性應(yīng)激反應(yīng)動(dòng)物模型。(1)將健康成年雄性SD大鼠12只24只眼,按隨機(jī)數(shù)字表法將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為CGRP_(8-37)干預(yù)組和對(duì)照組,每組各6只12只眼。CGRP_(8-37)干預(yù)組大鼠于造模前15min經(jīng)尾靜脈注射10-7 mol/L CGRP受體拮抗劑CGRP_(8-37),對(duì)照組注射等劑量的生理鹽水。采用TUNEL法和半胱氨酸天冬蛋白酶3(caspase-3)活性檢測(cè)法分別觀察各組大鼠視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡情況。(2)辣椒素去感覺神經(jīng)SD大鼠6只(12眼/組)和未去神經(jīng)雄性SD大鼠6只(12眼/組),制作結(jié)扎冠狀動(dòng)脈(CAO)3h模型,將其分為辣椒素去感覺神經(jīng)CAO3h組和未去神經(jīng)CAO3h組,采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)兩組視網(wǎng)膜CGRP的表達(dá)變化。 結(jié)果:(1)CGRP_(8-37)干預(yù)組視網(wǎng)膜細(xì)胞的總凋亡率為42.8%±2.8%,明顯高于對(duì)照組的凋亡率37.5%±2.9%,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-3.244, P0.01);CGRP_(8-37)干預(yù)組大鼠視網(wǎng)膜caspase-3活性的吸光度值為(11.3±3.1),對(duì)照組caspase-3活性的吸光度值為(4.9±1.2),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-4.603, P0.01)。(2)結(jié)扎冠狀動(dòng)脈3h后,與未去神經(jīng)組大鼠視網(wǎng)膜內(nèi)源性CGRP表達(dá)量(29.4±9.0 pg/ml)相比,辣椒素去感覺神經(jīng)組的表達(dá)量(17.2±3.3 pg/ml)顯著下降,兩組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論:急性心肌缺血誘發(fā)的視網(wǎng)膜應(yīng)激反應(yīng)可引起視網(wǎng)膜細(xì)胞的凋亡顯著加重,本研究證實(shí)CGRP_(8-37)干預(yù)后應(yīng)激性視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡加重,提示內(nèi)源性CGRP對(duì)應(yīng)激反應(yīng)引起的視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡有保護(hù)作用。辣椒素去感覺神經(jīng)后,急性心肌缺血誘發(fā)的視網(wǎng)膜應(yīng)激反應(yīng)中內(nèi)源性CGRP的表達(dá)量減少,提示感覺神經(jīng)對(duì)視網(wǎng)膜應(yīng)激反中CGRP的表達(dá)上調(diào)發(fā)揮重要的調(diào)控作用,從而實(shí)現(xiàn)其對(duì)視網(wǎng)膜應(yīng)激性損傷的保護(hù)作用。
【圖文】：

圖 1 視網(wǎng)膜 TUNEL 染色( ×400) 藍(lán)色為正常細(xì)胞核，，棕黃色為凋亡細(xì)胞核 A：對(duì)照組 CAO 3 h可見部分棕黃色凋亡細(xì)胞 B：CGRP8-37 干預(yù)組 CAO 3 h，可見 GCL、INL 及 RPE 層可見較明顯的凋亡細(xì)胞表 1 CGRP8-37干預(yù)組與對(duì)照組視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡率（x_±s，%）組別 GCL 層 INL 層 RPE 層 視網(wǎng)膜全層CGRP8-37干預(yù)組 61.0±4.5 21.0±4.2 46.3±6.5 42.8±2.8對(duì)照組 52.8±5.3 16.0±2.1 43.7±6.0 37.5±2.9t -2.913 -2.670 -0.743 -3.244P <0.05 <0.05 >0.05 <0.01注： GCL：視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞，INL：內(nèi)核層，RPE：視網(wǎng)膜色素上皮（Independent-samples T test)表2 CGRP8-37干預(yù)組與對(duì)照組caspase-3活性的比較（x_±s，fold ）組別 樣本數(shù) caspase-3活性CGRP8-37干預(yù)組 6 11.2±3.1
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R774.1

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2 徐e

本文編號(hào)：2537607