本文關(guān)鍵詞：H_2O_2誘導的視網(wǎng)膜色素上皮細胞的凋亡過程中AChE的表達，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：探討氧化應(yīng)激誘導視網(wǎng)膜色素上皮(RPE)細胞凋亡過程中乙酰膽堿酯酶（AChE）的變化及其可能發(fā)揮作用的分子機制。 方法：培養(yǎng)人RPE細胞株ARPE-19，分為H2O2氧化組、H2O2未處理組（對照組）和氧化保護組（加入EGCG）。MTT法觀察不同濃度H2O2對ARPE-19細胞活性的影響；免疫熒光檢測正常視網(wǎng)膜AChE的表達；分別采用TUNEL染色和Western印跡法檢測高濃度H2O2作用2小時后AChE和PARP-1的表達變化。采用t檢驗統(tǒng)計分析不同濃度H2O2作用不同時間的結(jié)果。 結(jié)果： H2O2＞500μmol/L時，處理2h后AChE的表達開始升高，選擇1000μmol/L為后續(xù)實驗濃度。H2O2作用RPE細胞2h后，MTT顯示細胞活性隨著H2O2濃度升高而下降，Western印跡法檢測到AChE和PARP的表達量明顯上升。免疫熒光AChE染色陽性。此外，加入EGCG后，細胞活力從31.20％±3.90％升高到70.23％±12.96％。 結(jié)論：H2O2可以導致RPE細胞凋亡，RPE細胞凋亡過程中AChE的表達升高。
【關(guān)鍵詞】：視網(wǎng)膜色素上皮細胞 細胞凋亡 過氧化氫 乙酰膽堿酯酶
【學位授予單位】：南昌大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R77
【目錄】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-7
• 中英文縮略詞表7-9
• 第1章 引言9-12
• 第2章 材料與方法12-20
• 2.1 實驗材料12-13
• 2.1.1 試劑／試劑盒來源12
• 2.1.2 主要儀器及應(yīng)用軟件12-13
• 2.2 主要試劑的配制13-14
• 2.3 實驗方法14-19
• 2.3.1 人 RPE 細胞氧化損傷模型的建立14-15
• 2.3.2 實驗分組15
• 2.3.3 MTT 法檢測細胞活力15-16
• 2.3.4 細胞免疫熒光染色16
• 2.3.5 免疫熒光和 TUNEL 雙重染色16-17
• 2.3.6 Western Blotting 法檢測凋亡過程中 AChE 蛋白表達的變化17-19
• 2.4 圖像分析19
• 2.5 統(tǒng)計學處理19-20
• 第3章 結(jié)果20-23
• 3.1 RPE 細胞的形態(tài)20
• 3.2 氧化應(yīng)激條件下培養(yǎng)的細胞系 ARPE-19 細胞生物學特征20-21
• 3.3 氧化應(yīng)激條件下培養(yǎng)的 ARPE-19 細胞 AChE 表達量的變化21-23
• 第4章 討論23-27
• 4.1 氧化應(yīng)激和 RPE 細胞凋亡的聯(lián)系23
• 4.2 RPE 細胞凋亡的途徑23-24
• 4.3 AChE 在細胞凋亡過程中的可能機制24-25
• 4.4 RPE 細胞損傷治療的新方向25-27
• 第5章 結(jié)論與展望27-28
• 5.1 結(jié)論27
• 5.2 進一步工作的方向27-28
• 致謝28-30
• 參考文獻30-37
• 攻讀學位期間的研究成果37-38
• 綜述38-43
• 參考文獻41-43

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 ;Calcium Overload Is A Critical Step in Programmed Necrosis of ARPE-19 Cells Induced by High-Concentration H_2O_2[J];Biomedical and Environmental Sciences;2010年05期

  本文關(guān)鍵詞：H_2O_2誘導的視網(wǎng)膜色素上皮細胞的凋亡過程中AChE的表達，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：253220