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缺氧對(duì)腦脊液-視神經(jīng)屏障中腦膜上皮細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線(xiàn)粒體膜電位的影響

發(fā)布時(shí)間:2019-09-04 15:57
【摘要】:目的探討腦膜上皮細(xì)胞(meningothelial cells,MECs)參與視神經(jīng)疾病的發(fā)病機(jī)理,研究缺氧對(duì)MECs功能變化的影響。方法將培養(yǎng)的MECs分別在體積分?jǐn)?shù)21%O2(對(duì)照組)和體積分?jǐn)?shù)1%O2(缺氧組)環(huán)境下孵育1 d和2 d,采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)測(cè)定和比較MECs的總抗氧化能力(total anti-oxidative capacity,T-AOC);采用MitoTracker Red檢測(cè)和比較MECs在正常氧和缺氧環(huán)境下作用2 d的線(xiàn)粒體膜電位的變化;通過(guò)測(cè)定鈣聯(lián)蛋白的熒光染色,以評(píng)價(jià)MECs暴露于氧化應(yīng)激環(huán)境后對(duì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)功能的影響。結(jié)果與對(duì)照組相比,缺氧組的氧化應(yīng)激能力降低,結(jié)果顯示T-AOC下降。對(duì)照組和缺氧組細(xì)胞分別培養(yǎng)1 d后,細(xì)胞中T-AOC分別為(0.012 4+0.001 1)U·L-1和(0.011 9+0.009 0)U·L-1,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.915、P=0.382)。分別培養(yǎng)2 d后,缺氧組細(xì)胞中T-AOC(0.010 7+0.008 3)U·L-1低于對(duì)照組(0.012 9+0.008 7)U·L-1,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=4.616、P=0.001)。不同氧環(huán)境作用于細(xì)胞2 d后,采用共焦顯微鏡熒光探針?lè)椒ǚ治鲎饔糜趯?duì)照組和缺氧組的MECs線(xiàn)粒體膜電位的變化,結(jié)果發(fā)現(xiàn)缺氧組細(xì)胞熒光強(qiáng)度與對(duì)照組相比明顯減低;同時(shí)通過(guò)熒光顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn),缺氧組MECs鈣聯(lián)蛋白綠色熒光強(qiáng)度較對(duì)照組明顯增強(qiáng)。結(jié)論缺氧通過(guò)影響MECs內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及線(xiàn)粒體功能而影響其氧化應(yīng)激能力。
【作者單位】: 青海紅十字醫(yī)院眼科;成都血液中心研究室;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助(編號(hào):81160122) 青海省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(編號(hào):2014-Z-913)~~
【分類(lèi)號(hào)】:R774.6

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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4 吳本s,

本文編號(hào):2531850


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