【摘要】：目的:通過(guò)建立新西蘭大白兔阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征(Obstructive sleep apnea-hypopnea syndrome,OSAHS)的動(dòng)物模型,研究OSAHS對(duì)頦舌肌(genioglossus,GG)功能結(jié)構(gòu)的影響,探討下頜前移矯治器(mandible advanced device, MAD)治療后GG的改變。為臨床研究MAD治療OSAHS對(duì)GG的影響提供理論依據(jù)。 方法: 動(dòng)物分組:30只純種新西蘭大白兔,6月齡,雄性,隨機(jī)分為3組,每組10只,分別為阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征組(Group OSAHS)、下頜前移矯治器組(Group MAD)和對(duì)照組(control group)。 模型建立:OSAHS組和MAD組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均于1%戊巴比妥鈉行全身麻醉后,在軟腭中距軟硬腭交界0.5cm處粘膜下肌層注射聚丙烯酰胺水凝膠1-2ml。注射后,動(dòng)物仰臥位出現(xiàn)明顯打鼾和間斷的呼吸暫停,頭顱側(cè)位片顯示軟腭后緣1/4點(diǎn)1/2點(diǎn)3/4點(diǎn)處上氣道寬度較對(duì)照組明顯減小,發(fā)生睡眠呼吸暫停時(shí)動(dòng)脈血?dú)夥治鲲@示血氧飽和度較對(duì)照組降低了22%,上述表明OSAHS動(dòng)物模型建立成功。 MAD組在建模成功后,取印模,制作并配戴上前牙斜面導(dǎo)板矯治器,導(dǎo)下頜向前。 睡眠觀察:建模2天后,三組動(dòng)物每天上午以5-6ml/kg劑量經(jīng)口灌注10%水合氯醛,仰臥位睡眠4-6小時(shí),持續(xù)8周。 上氣道間隙測(cè)量:分別對(duì)三組動(dòng)物拍仰臥位頭顱側(cè)位片進(jìn)行上氣道間隙分析,取軟腭后緣最上點(diǎn)1/4點(diǎn)1/2點(diǎn)3/4點(diǎn)和最下點(diǎn)的五個(gè)位點(diǎn),進(jìn)行上氣道間隙測(cè)量。 動(dòng)脈血?dú)夥治?仰臥位睡眠發(fā)生呼吸暫停時(shí),分別抽取三組動(dòng)物耳緣動(dòng)脈血1ml進(jìn)行血?dú)夥治觥?體外收縮能力測(cè)量:8周后,三組動(dòng)物在1%戊巴比妥鈉全麻下,暴露并分離頦舌肌,迅速剝離并制備成直徑2mm的縱向肌條,肌條一端結(jié)扎固定在浴槽底部固定鉤上,另一端與高度敏感的張力換能器相連,懸掛于恒溫37℃含95% O_2和5% CO_2的生理溶液浴槽里,pH值調(diào)至7.40。平衡30分鐘后,由鉑電極產(chǎn)生刺激,測(cè)量單收縮的最大收縮張力、收縮時(shí)間、半舒張時(shí)間、刺激頻率分別為10Hz、20Hz、40Hz、60Hz、80Hz、100Hz時(shí)的張力-頻率關(guān)系。休息10分鐘后,進(jìn)行頦舌肌誘導(dǎo)疲勞試驗(yàn),給予0. 5Hz的連續(xù)刺激,持續(xù)時(shí)間5分鐘,每間隔1分鐘記錄持續(xù)時(shí)間為300毫秒單刺激下的肌張力。 肌纖維型測(cè)定:取5mm×5mm×3mm大小頦舌肌組織,立即置于異戊烷/液氮中快速冷凍,-80℃儲(chǔ)存?zhèn)溆�。用ATP酶染色(鈣鈷激活法)進(jìn)行Ⅰ、Ⅱ型肌纖維型測(cè)定。 軟腭HE染色:取下凝膠注射部位軟腭組織,固定于10%福爾馬林中,石蠟切片,常規(guī)HE染色,光學(xué)顯微鏡下觀察。 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:所有數(shù)據(jù)均采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05。 結(jié)果: 1上氣道間隙測(cè)量:OSAHS組軟腭后1/4點(diǎn)1/2點(diǎn)和3/4點(diǎn)上氣道間隙均較MAD組對(duì)照組明顯減小,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);MAD組與對(duì)照組比較差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 2血?dú)夥治?OSAHS組較MAD組對(duì)照組的血氧飽和度氧分壓和pH值均顯著降低,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),二氧化碳分壓較MAD組對(duì)照組顯著升高,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);MAD組較對(duì)照組比較以上各項(xiàng)指標(biāo)均無(wú)顯著性差異(P0.05)。 3體外收縮能力:三組間頦舌肌單收縮的最大收縮張力,收縮時(shí)間,半舒張時(shí)間沒(méi)有顯著差異(P0.05),三組間頦舌肌的張力-頻率關(guān)系也沒(méi)有顯著差異(P0.05),但在疲勞試驗(yàn)過(guò)程中,OSAHS組在1min、2min、3min、4min、5min時(shí)GG收縮張力與初始張力比值分別為88.20±4.80%、64.80±6.58%、57.30±4.24%、37.10±3.38%、28.30±3.50%,MAD組在1min、2min、3min、4min、5min時(shí)GG收縮張力與初始張力比值分別為94.30±3.33%、83.10±3.51%、71.60±4.01%、55.40±2.95%、45.70±6.27%,對(duì)照組在1min、2min、3min、4min、5min時(shí)GG收縮張力與初始張力比值分別為98.80±7.33%、87.70±4.50%、74.20±4.99%、52.00±5.10%、48.20±4.10%,OSAHS組較對(duì)照組頦舌肌易疲勞性明顯增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。而MAD組與對(duì)照組比較,頦舌肌疲勞性無(wú)顯著性差異(P0.05)。 4肌纖維分型:光學(xué)顯微鏡下觀察,100倍物鏡下纖維計(jì)數(shù)顯示OSAHS組II型纖維(易疲勞性纖維)比例為85.64±3.03%,較對(duì)照組II型纖維(易疲勞性纖維)比例78.70±3.34%增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),而對(duì)照組與MAD組(80.21±2.07%)之間沒(méi)有顯著性差異(P0.05)。 5血氧飽和度與頦舌肌疲勞性相關(guān)分析:二者在各時(shí)間點(diǎn)均呈明顯的正相關(guān),其中在疲勞實(shí)驗(yàn)中的第2分鐘時(shí)相關(guān)系數(shù)最大,r=0.773,P0.001,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 6軟腭組織學(xué)觀察:肉眼觀察軟腭凝膠注射部位,呈白色透明狀,質(zhì)韌且有彈性,邊界清楚,未見(jiàn)向周?chē)M織擴(kuò)散,白色膠狀物外有完整包膜。光鏡下可見(jiàn)凝膠藍(lán)染,呈交聯(lián)狀,有纖維膜包繞,沒(méi)有引起周?chē)M織炎癥、壞死等不良反應(yīng),也未見(jiàn)對(duì)鄰近組織的損傷。 結(jié)論: OSAHS可導(dǎo)致GG疲勞性增加,下頜前移矯治器治療OSAHS,能預(yù)防頦舌肌功能結(jié)構(gòu)的損傷。
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類(lèi)號(hào)】：R766

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本文編號(hào)：2528761