【摘要】： 目的:觀察靶向survivin基因的siRNA對(duì)喉癌細(xì)胞株Hep-2增殖和凋亡的影響,為喉癌的基因治療提供有效靶點(diǎn)及技術(shù)。方法:使用陽(yáng)離子脂質(zhì)體LipofectamineTM2000將靶向survivin基因的siRNA轉(zhuǎn)染至喉癌細(xì)胞株Hep-2;MTT[3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽]法檢測(cè)survivin-siRNA對(duì)喉癌細(xì)胞株Hep-2增殖的影響;轉(zhuǎn)染survivin-siRNA后,RT-PCR檢測(cè)喉癌細(xì)胞株Hep-2 survivin基因mRNA表達(dá)的變化;Western Blot檢測(cè)survivin基因蛋白表達(dá);流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)喉癌細(xì)胞株Hep-2凋亡情況。結(jié)果:各濃度survivin-siRNA轉(zhuǎn)染組細(xì)胞增殖抑制率和凋亡率均明顯高于對(duì)照組(P0.05),survivin mRNA和蛋白表達(dá)有不同程度減弱,并且有明顯的濃度依賴(lài)性,隨著濃度的上升表達(dá)率下降。結(jié)論:利用RNA干擾技術(shù)沉默survivin基因表達(dá)可以顯著抑制喉癌細(xì)胞株Hep-2細(xì)胞增殖,并在一定程度上誘導(dǎo)其自發(fā)凋亡,不同濃度survivin-siRNA轉(zhuǎn)染能下調(diào)survivin mRNA和蛋白表達(dá),靶向survivin基因的RNA干擾技術(shù)在喉癌的基因治療中具有一定價(jià)值。
【圖文】：

2 SiRNA 對(duì) survivin 基因 mRNA 表達(dá)的抑制作用 Sp-2 細(xì)胞 mRNA 表達(dá)有明顯抑制作用，，抑制率明顯高于空白和非特異性 siRNA 對(duì)照組(P < 0. 05)；0.2μmol/L、0.4μmol/Lsurvivin mRNA 表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P < 0. 05)，而空白對(duì)非特異性siRNA 對(duì)照組內(nèi)survivin mRNA 水平無(wú)明顯變化(圖rvivin-siRNA 作用于 Hep-2 細(xì)胞 24h 后 survivin mRNA 表達(dá)明誘導(dǎo)survivin mRNA 特異性降解。

2.3 SiRNA 轉(zhuǎn)染 Hep-2 細(xì)胞后 survivin 蛋白表達(dá)變化 各濃度染組 survivin 蛋白表達(dá)有不同程度下調(diào),并且有明顯的濃度依賴(lài)性，隨率下降，0.8μmol/L 濃度轉(zhuǎn)染組最明顯，而在空白對(duì)照組、空脂質(zhì)體對(duì)siRNA 對(duì)照組內(nèi) survivin 蛋白表達(dá)無(wú)明顯改變(圖 2.3)。
【學(xué)位授予單位】：寧波大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類(lèi)號(hào)】：R739.65

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2524328